Analytical Methods. The extracellul

Analytical Methods. The extracellular protein and enzymes from the fermented rice were extracted with distilled water, at a 1:10 ratio of koji to water. Two methods, shaking and blending, were used to extract the extracellular enzymes from the koji. Samples were extracted either by blending in blender jars at high speed (Osterizer 14-speed blender) for 1 min or by shaking in 250-mL flasks at∼150 rpm for∼2.5 h. The supernatant was decanted, and liquid samples were assayed for total protein and various amylase enzyme activities. There was no significant difference (within one standard deviation from average) between the two methods. Details about these extraction methods can be found elsewhere (26). Protein Assay. The protein content was determined by using a reformulated versiMicroorganism and its Maintenance A. oryzae var brunneus was propagated on potato dextrose agar (PDA) medium (Hi-media, Mumbai, India). Slants were grown at 30°C for 7 days and stored at 4°C, and sub-cultured fortnightly.
Preparation of Inoculum To the 7 days old culture slants, 10 ml of 0.1% Tween80 solution was added and the spores were dislodged using an inoculation needle under sterile conditions. Spores in the solution were collected in a sterile flask and the suspension was diluted appropriately for the required spore density. Viable spore density was determined by
622 J SCI IND RES VOL 66 AUGUST 2007
the serial dilution of the spore suspension and spread plating.
on of Coomassie Plus Protein Assay Reagent, G-250 (No. 23236, Pierce Chemistry, Rockford, IL), per package instructions (0.1-

Kết quả (Việt) 1:

Phương pháp phân tích. Ngoại bào protein và enzym từ gạo lên men được chiết xuất bằng nước cất, lúc 1:10 tỉ lệ koji vào nước. Hai phương pháp, run rẩy và pha trộn, được sử dụng để trích xuất các enzym ngoại bào từ koji. Mẫu được chiết xuất bằng pha trộn trong máy xay sinh tố lọ ở tốc độ cao (Osterizer 14-tốc độ máy xay sinh tố) trong 1 phút hoặc lắc trong 250-mL lọ at∼150 rpm for∼2.5 h. Supernatant decanted, và chất lỏng mẫu đã được assayed cho tổng protein và các hoạt động enzyme amylase khác nhau. Đã có không có sự khác biệt đáng kể (trong một trong những tiêu chuẩn độ lệch từ trung bình) giữa hai phương pháp. Thông tin chi tiết về các phương pháp khai thác có thể được tìm thấy ở nơi khác (26). Protein khảo nghiệm. Nội dung chất đạm đã được xác định bằng cách sử dụng một versiMicroorganism reformulated và bảo trì A. oryzae var brunneus được tuyên truyền trên khoai tây dextrose agar (PDA) trung bình (Hi-media, Mumbai, Ấn Độ). Nghiêng đã được trồng tại 30° C trong 7 ngày và được lưu trữ tại 4° C và phụ nuôi cấy hai tuần một lần.Chuẩn bị của Inoculum-7 ngày tuổi văn hóa nghiêng, 10 ml 0,1% Tween80 giải pháp đã được bổ sung và các bào tử bị đánh bật bằng cách sử dụng một cây kim tiêm chủng theo các điều kiện vô trùng. Các bào tử trong các giải pháp đã được thu thập trong một flask vô trùng và hệ thống treo được pha loãng một cách thích hợp cho mật độ spore yêu cầu. Mật độ khả thi spore đã được xác định bởi622 J SCI IND RES VOL 66 THÁNG TÁM 2007pha loãng serial spore treo và lây lan mạ.ngày của Coomassie Plus Protein khảo nghiệm tinh khiết, G-250 (No. 23236, hóa học Pierce, Rockford, IL), mỗi gói phần mềm hướng dẫn (0,1-

Kết quả (Việt) 2:

Phương pháp phân tích. Các protein ngoại bào và enzyme từ gạo lên men được chiết xuất bằng nước cất, với tỷ lệ 1:10 koji với nước. Hai phương pháp, lắc và trộn, đã được sử dụng để trích xuất các enzyme ngoại bào từ koji. Các mẫu được chiết xuất bằng cách pha trộn trong lọ máy xay ở tốc độ cao (Osterizer 14 tốc độ máy xay sinh tố) trong 1 phút hoặc bằng cách lắc trong 250 mL bình at~150 rpm for~2.5 h. Các dịch nổi được chiết, và mẫu chất lỏng được kiểm định về tổng lượng protein và hoạt tính của enzyme amylase khác nhau. Không có khác biệt đáng kể (trong vòng một độ lệch chuẩn từ trung bình) giữa hai phương pháp. Thông tin chi tiết về các phương pháp khai thác có thể được tìm thấy ở nơi khác (26). Khảo nghiệm protein. Hàm lượng protein được xác định bằng cách sử dụng một versiMicroorganism dựng lại và bảo trì A. oryzae var brunneus của nó được truyền bá vào thạch đường khoai tây (PDA) trung bình (Hi-phương tiện truyền thông, Mumbai, Ấn Độ). Slants được trồng ở 30 ° C trong 7 ngày và bảo quản ở nhiệt độ 4 ° C, và phụ nuôi hai tuần một lần.
Chuẩn bị tiêm chủng Để 7 ngày slants nền văn hóa cũ, 10 ml 0,1% Tween80 giải pháp đã được bổ sung và các bào tử được bật ra sử dụng một tiêm kim trong điều kiện vô trùng. Bào tử trong các giải pháp đã được thu thập trong một bình khử trùng và hệ thống treo đã được pha loãng thích hợp cho mật độ bào tử yêu cầu. Mật độ bào tử tồn được xác định bằng
622 J SCI IND RES VOL 66 tháng 8 năm 2007
các pha loãng của các bào tử và lây lan mạ.
Trên của Coomassie Thêm Protein Khảo nghiệm thuốc thử, G-250 (số 23.236, Pierce Hóa học, Rockford, IL), theo hướng dẫn gói (0.1-