điện cho phép giữ khoảng cách tốt là cácmảnh vỡ có thể được xác định bằng thực nghiệm bởitải mẫu khác nhau trên một gel song song tại liên tụckhoảng thời gian.Những đoạn phải thực hiện trên DGGE gelthông thường các sản phẩm Đảng Cộng sản Romania. Độ phân giải tối ưu làthu được khi các phân tử không hoàn toàn denature.Việc bổ sung một kẹp GC bp 30 đến 40 đến một tronglớp lót PCR đảm bảo rằng các đoạn của DNAwillvẫn còn một phần đôi-stranded và vùngkiểm tra là thuộc phạm vi thấp nhất chảy (Myers et al.,1985; Sheffield et al., 1989). Chemiclamps là psoralen-lớp lót PCR derivatised có thể được sử dụng như thay thếđể GC giá gắn cung cấp tác dụng tương tự (Fu¨hr,Năm 1996). Tuy nhiên, như các chemiclamps mộtliên kết với các sợi DNA ở một đầu, họ không thểđược sử dụng khi DGGE mảnh phải được trình tựbởi vì các ban nhạc không thể được reamplified trực tiếp,trừ khi lồng nhau chất nền, mồi được sử dụng. Hành vi nóng chảyđôi-stranded DNA đã được miêu tả bởi mộtMô hình máy tính được phát triển bởi Lerman et al. (1984).Phần mềm máy tính có sẵn, chẳng hạn như MacMeltk(Sinh học-Rad, Hercules, Hoa Kỳ), mà có thể tính toán DNAnóng chảy Hồ sơ và hiển thị các khu vực của lý thuyết caovà ổn định thấp tên miền các chuỗi được biết đến.Vị trí của chất nền, mồi và GC kẹp do đó có thểtối ưu hóa bằng cách phân tích những ảnh hưởng vị trí trên cácDNA chảy Hồ sơ.Ban nhạc trong dấu vân tay DGGE có thể được tiết lộ bởiethidium bromua nhuộm. Các thủ tục nhạy cảm nhấtbạc nhuộm (Felske et al., 1996),mặc dù nhiều màu bạc gel không thể được sử dụng chothí nghiệm lai và đơn sợi DNAmảnh vỡ cũng được phát hiện. Màu xanh lá cây SYBER tôi làcũng một thay thế cho visualising DGGE sáp bọt dùng(Muyzer et al., 1997). SYBER Green nhuộm nàokhông cung cấp cho nền nhuộm, do đó cho phép cácCác phát hiện của DNA mảnh ngay cả lúc rất thấpnồng độ.Thiết bị DGGE được cung cấp bởi khác nhauCác công ty như Bio-Rad, INGENY (Leiden, cácHà Lan), và CBS khoa học (Del Mar, Mỹ).3. những gì chúng tôi nhận được từ DGGE?Đảng Cộng sản Romania-DGGE kỹ thuật được sử dụng rộng rãi trongvi khuẩn sinh thái vì có khả năng cung cấp một
đang được dịch, vui lòng đợi..