Vector tái tổ hợp sau đó được chuyển đổi thành các tế bào E. coli Top10 theo hướng dẫn của nhà sản xuất (ChampionTM pET200 Directional Biểu Kit TOPO?, Invitrogen). Sinh khối của các tế bào chuyển hóa được sử dụng để trích xuất DNA vector cho fi cation identi tái tổ hợp. Tái tổ hợp pET 200 / D-TOTO vector đã phải chịu tiêu hóa và PCR.
SACI và SmaI đã được lựa chọn cho analysisof faeG-1NT và Feda-C gen tương ứng. Tiêu hóa của
vectơ tái tổ hợp với SACI hoặc SmaI sản xuất hai mảnh ADN tuyến tính là 6,5 kb (faeG-1NT) hoặc 6,2 kb
(Feda-C), như mong đợi chỉ ra rằng gene được thực sự
đưa vào trong các vector. Phân tích PCR cho thấy gene
khuếch đại với các kích thước dự kiến của 829 bp (faeG-1NT)
và 516 bp (faeA-C).
đang được dịch, vui lòng đợi..
