RT4-D6P2T cells were cultured in DM

RT4-D6P2T cells were cultured in DMEM containing 10% FBS on glass control plates and CS/GPTMS_DSP flat membranes and were allowed to reach confluence. The total RNA was isolated from the confluent culture by extraction with TRIzol (Invitrogen). The RNA concentration was quantified by measuring the absorbance at 260/280 nm. The total RNA (1 µg per sample) was reverse-transcribed in a reaction volume of 25 µl with 7.5 mM of random hexamers (Thermo Scientific). Each reaction consisted of cDNA synthesis buffer (50 × 10−3 M Tris-HCl, pH 8.3, 75 × 10−3 M, KCl, 3 × 10−3 M MgCl2), 1 mM deoxynucleotide triphosphate (dNTP), Thermo Scientific), 1.3 U µl−1 ribonuclease inhibitor (RNAsin, Ribolock Thermo Scientific) and 8 U µl−1 Moloney murine leukaemia virus (M-MLV) reverse transcriptase (RevertAid Thermo Scientific). Samples were then exposed to a first cycle: 25 °C for 10 min, 42 °C for 90 min and 90 °C for 10 min. Specific primers designed to amplify B cell lymphoma 2 (Bcl2)-associated X protein (BAX), Bcl2 (two proteins involved in the cascade of caspases, which regulates cellular apoptosis), superoxide dismutase (SOD, an important antioxidant defense in nearly all living cells exposed to oxygen) and mammalian target of rapamycin (mTor, a protein encoded by the MTOR gene involved in the regulation of cell growth, cell proliferation, cell motility, cell survival, protein synthesis, and transcription) are listed below.

Kết quả (Việt) 1:

RT4-D6P2T các tế bào được nuôi cấy trong DMEM có chứa 10% FBS trên kính điều khiển tấm và CS/GPTMS_DSP phẳng màng và đã cho phép để đạt đến confluence. Tất cả RNA được cô lập từ các nền văn hóa confluent bằng cách khai thác với TRIzol (Invitrogen). Nồng độ RNA được định lượng bằng cách đo hấp thu tại 260/280 nm. Tất cả RNA (1 µg / mẫu) được sao chép lại đảo ngược trong một phản ứng khối lượng 25 ML với 7.5 mM của ngẫu nhiên hexamers (nhiệt khoa học). Mỗi phản ứng bao gồm cDNA tổng hợp đệm (50 × 10−3 M Tris-HCl, pH 8.3, 75 × 10−3 M, KCl, 3 × 10−3 M MgCl2), 1 mM deoxynucleotide triphosphate (dNTP), nhiệt khoa học), 1,3 U µl−1 ribonuclease chất ức chế (RNAsin, Ribolock nhiệt khoa học) và 8 U µl−1 Moloney bệnh bạch cầu các virus (M-MLV) ngược (RevertAid nhiệt khoa học). Mẫu sau đó được tiếp xúc với một chu kỳ đầu tiên: 25 ° C trong 10 phút, 42 ° C cho 90 phút và 90 ° C trong 10 phút cụ thể chất nền, mồi được thiết kế để khuyếch đại B cell lymphoma 2 (Bcl2)-liên quan đến X protein (BAX), Bcl2 (hai protein tham gia vào cascade caspase, điều chỉnh quá trình chết rụng tế bào), superoxide dismutase (SOD, một chất chống oxy hoá quan trọng phòng ở gần như tất cả các tế bào sống tiếp xúc với ôxy) và các mục tiêu động vật có vú của rapamycin (mTor một loại protein được mã hóa bởi gen MTOR tham gia vào các quy định của tăng trưởng tế bào, sự gia tăng tế bào, tế bào motility, tế bào sống, tổng hợp protein và phiên mã) được liệt kê dưới đây.

Kết quả (Việt) 2:

tế bào RT4-D6P2T được nuôi cấy trong DMEM có chứa 10% FBS trên biển kiểm soát thủy tinh và CS / GPTMS_DSP màng phẳng và được cho phép đạt đến hợp lưu. Tổng RNA đã được phân lập từ các nền văn hóa hợp lưu bằng cách chiết với TRIzol (Invitrogen). Nồng độ RNA được định lượng bằng cách đo độ hấp thụ ở 260/280 nm. Tổng RNA (1 mg cho mỗi mẫu) đã được đảo ngược phiên âm trong một thể tích phản ứng của 25 ml với 7,5 mM hexamers ngẫu nhiên (Thermo Scientific). Mỗi phản ứng bao gồm đệm tổng hợp cDNA (50 × 10-3 M Tris-HCl, pH 8.3, 75 × 10-3 M, KCl, 3 × 10-3 M MgCl2), 1 mM deoxynucleotide triphosphate (dNTP sẽ), Thermo Scientific) 1,3 U ml-1 ribonuclease chất ức chế (RNAsin, Ribolock Thermo Scientific) và 8 U ml-1 Moloney vi rút bệnh bạch cầu ở chuột (M-MLV) sao chép ngược (RevertAid Thermo Scientific). Các mẫu này sau đó được tiếp xúc với một chu kỳ đầu tiên: 25 ° C trong 10 phút, 42 ° C trong 90 phút và 90 ° C trong 10 phút. mồi cụ được thiết kế để khuếch đại u lympho tế bào B 2 (BCL2) -associated X protein (BAX), BCL2 (hai loại protein tham gia vào các đợt caspases, điều hòa apoptosis của tế bào), superoxide dismutase (SOD, một vệ chống oxy hóa quan trọng trong gần như tất cả sinh hoạt tế bào tiếp xúc với oxy) và mục tiêu của động vật có vú rapamycin (mTOR, một loại protein được mã hóa bởi gene mTOR liên quan đến các quy định về tăng trưởng tế bào, tăng sinh tế bào, sự vận động tế bào, tế bào sống, tổng hợp protein, và phiên mã) được liệt kê dưới đây.