STORAGE OF LIPID EXTRACTSLipid extr

STORAGE OF LIPID EXTRACTS


Lipid extracts should not be stored in the dry state. Oxidative degradation is slower in solutions even in the absence of added antioxidants; This protection depends on the chemical nature of the solvent and the physical conditions of storage.
Air and light should be avoided. The best storage conditions are a super freezer (-70°C) to store for a long time (up to one year) lipid extracts in chloroform-methanol mixtures filling well stoppered glass vials (with Teflon liners), the cap being secured with a wide length of self-sticking tape. Pencil written labels should be protected by an outer layer of polyester tape. For long period of storage, it can be useful to flush vials or tubes with nitrogen before closing to prevent fatty acid oxidation. For the same purpose, a low amount of antioxidant such as BHT (butylated hydroxytoluene or 2,6-di-tert-butyl-4-methoxyphenol) or ethyl gallate (i.e. about 50 µg BHT/ml) may be added in the solvent if the natural antioxidant amount is estimated too low (purified extracts). The antioxidant is used as a concentrated solution in ethanol (10 mg/ml).
After long periods of storage, the cleavage of ester lipids and plasmalogens must be expected with a concomitant rise in free fatty acids, diacylglycerols methyl or ethyl esters. These problems can be minimized by using neutral extracts and 2-propanol instead of methanol or ethanol in the solvent mixture. It must be remembered that best results are obtained with freshly prepared materials.

To prevent labile lipids from oxygen attack it is possible to use a commercially available oxygen absorber (Ageless, Mitsubishi Gas Chem Co) placed inside the sample package. After a short "pretreatment" at 2°C, the labile lipids appear preserved even at room temperature for a long time. This method allows transportation of biomaterial samples to a distant laboratory without utilizing any freezing system (Hirao S et al., J Oleo Sci 2003, 52, 583).

It has been demonstrated that after one year storage of plasma samples at -80°C various lipid parameters (cholesterol, triglycerides) were altered (Devanapalli B et al., Clin Chim Acta 2002, 322, 179). Thus, even at low temperature, intact biological samples must be extracted as soon as possible. In contrast, it was shown that after storage at -80°C up to 4 years, the fatty acid compositions of plasma triglycerides and erythrocyte phospholipids were practically unchanged (Hodson L et al., Clin Chim Acta 2002, 321, 63).

Kết quả (Việt) 1:

LƯU TRỮ CỦA CÁC CHẤT CHIẾT XUẤT TỪ LIPIDChất chiết xuất từ lipid không nên được lưu trữ trong trạng thái khô. Oxy hóa suy thoái là chậm hơn ở các giải pháp ngay cả trong sự vắng mặt của chất chống oxy hoá bổ sung; Bảo vệ này phụ thuộc vào bản chất hóa học của dung môi và các điều kiện vật lý của các lưu trữ.Không khí và ánh sáng nên tránh. Các điều kiện lưu trữ tốt nhất là một tủ đông siêu (-70 ° C) để lưu trữ cho một thời gian dài (lên đến một năm) lipid chiết xuất trong các hỗn hợp methanol cloroform điền cũng stoppered chai lọ thủy tinh (có lớp lót Teflon), nắp được bảo đảm bằng một độ dài rộng của băng tự gắn bó. Bút chì viết nhãn cần được bảo vệ bởi một lớp bên ngoài của băng polyester. Trong thời gian dài dung lượng lưu trữ, nó có thể hữu ích để tuôn ra lọ hoặc ống với nitơ trước khi đóng cửa để ngăn chặn quá trình oxy hóa acid béo. Đối với cùng một mục đích, số lượng thấp của các chất chống oxy hoá như BHT (butylated hydroxytoluene hoặc 2,6-di-tert-butyl-4-methoxyphenol) hoặc ethyl gallate (tức là khoảng 50 μg BHT/ml) có thể được thêm vào trong dung môi nếu lượng chất chống oxy hóa tự nhiên được ước tính quá thấp (chiết xuất tinh khiết). Chất chống oxy hoá được sử dụng như một giải pháp tập trung trong ethanol (10 mg/ml). Sau thời gian dài dung lượng lưu trữ, cleavage ester lipid và plasmalogens phải được dự kiến với sự gia tăng đồng thời miễn phí fatty acid, diacylglycerols methyl hoặc ethyl Este. Những vấn đề này có thể được giảm thiểu bằng cách sử dụng các chất chiết xuất từ trung lập và 2-propanol thay methanol hoặc ethanol trong hỗn hợp dung môi. Nó phải được nhớ rằng kết quả tốt nhất thu được với các vật liệu tươi chuẩn bị.Để ngăn chặn labile lipid từ oxy cuộc tấn công đó là có thể sử dụng một hấp thụ oxy thương mại có sẵn (Ageless, Mitsubishi khí Chem Co) đặt bên trong các mẫu gói. Sau khi một đoạn ngắn "pretreatment" ở 2° C, lipid labile xuất hiện được bảo tồn ngay cả ở nhiệt độ phòng trong một thời gian dài. Phương pháp này cho phép vận chuyển của biomaterial mẫu đến một phòng thí nghiệm ở xa mà không cần sử dụng bất kỳ hệ thống đóng băng (Hirao S et al., J Oleo Sci 2003, 52, 583).Nó đã được chứng minh rằng sau một năm lưu trữ của các mẫu huyết tương ở-80 ° C thông số lipid khác nhau (cholesterol, chất béo trung tính) đã được thay đổi (Devanapalli B et al., Clin Chim Acta 2002, 322, 179). Vì vậy, ngay cả ở nhiệt độ thấp, còn nguyên vẹn các mẫu sinh học phải được tách ra càng sớm càng tốt. Ngược lại, nó được chỉ ra rằng sau khi lưu trữ ở-80 ° C đến 4 tuổi, thành phần axit béo của huyết tương triglycerides và erythrocyte phospholipid đã không thay đổi thực tế (Hodson L et al., Clin Chim Acta 2002, 321, 63).

Kết quả (Việt) 2:

LƯU GIỮ lipid chiết


chiết xuất lipid không nên bảo quản trong trạng thái khô. Suy thoái oxy hóa là chậm hơn trong các giải pháp ngay cả trong trường hợp không có chất chống oxy hóa tăng; Bảo vệ Điều này phụ thuộc vào tính chất hóa học của dung môi và các điều kiện vật lý của lưu trữ.
Không khí và ánh sáng nên tránh. Các điều kiện bảo quản tốt nhất là một tủ đông siêu (-70 ° C) để lưu trữ trong một thời gian dài (lên đến một năm) chiết xuất lipid trong hỗn hợp chloroform-methanol làm đầy lọ thủy tinh cũng có nút đậy (có lớp lót Teflon), nắp được bảo đảm bằng một chiều dài rộng của băng tự dính. Nhãn Bút chì viết cần được bảo vệ bởi một lớp bên ngoài của băng polyester. Đối với thời gian dài lưu trữ, nó có thể hữu ích để tuôn ra lọ hoặc ống với nitơ trước khi đóng cửa để ngăn chặn béo oxy hóa acid. Đối với cùng một mục đích, một lượng thấp của chất chống oxy hóa như BHT (butylated hydroxytoluene hoặc 2,6-di-tert-butyl-4-methoxyphenol) hoặc ethyl gallate (tức là khoảng 50 mg BHT / ml) có thể được thêm vào trong các dung môi nếu lượng chất chống oxy hóa tự nhiên được ước tính quá thấp (chiết xuất tinh khiết). Các chất chống oxy hóa được sử dụng như một giải pháp tập trung trong ethanol (10 mg / ml).
Sau thời gian dài lưu trữ, phân cắt của lipid este và plasmalogens phải được dự kiến với sự gia tăng đồng thời các axit béo tự do, diacylglycerols methyl hoặc ethyl este. Những vấn đề này có thể được giảm thiểu bằng cách sử dụng các chất chiết xuất trung lập và 2-propanol thay vì methanol hoặc ethanol trong hỗn hợp dung môi. Nó phải được nhớ rằng kết quả tốt nhất thu được với các vật liệu tươi chuẩn bị.

Để ngăn chặn chất béo không ổn định từ cuộc tấn công oxy có thể sử dụng một chất hấp thụ oxy thương mại có sẵn (Ageless, Mitsubishi Gas Chem Co) đặt bên trong các gói mẫu. Sau một "tiền xử lý" ngắn ở 2 ° C, các chất béo không ổn định xuất hiện bảo quản ngay cả ở nhiệt độ phòng trong một thời gian dài. Phương pháp này cho phép vận chuyển mẫu vật liệu sinh học đến một phòng thí nghiệm ở xa mà không cần sử dụng bất kỳ hệ thống máy lạnh (Hirao S et al., J Oleo Sci 2003, 52, 583).

Nó đã được chứng minh rằng sau khi lưu trữ một năm mẫu huyết tương ở -80 ° C các thông số lipid khác nhau (cholesterol, triglyceride) đã được thay đổi (Devanapalli B et al., Clin Chim Acta 2002, 322, 179). Vì vậy, ngay cả ở nhiệt độ thấp, các mẫu sinh học còn nguyên vẹn phải được trích ra càng sớm càng tốt. Ngược lại, người ta thấy rằng sau khi bảo quản ở -80 ° C đến 4 năm, các thành phần axit béo triglyceride huyết tương và hồng cầu phospholipid là thực tế không thay đổi (Hodson L et al., Clin Chim Acta 2002, 321, 63).