After induction, 1 million yeast ce

After induction, 1 million yeast cells were processed for individual analysis. The cells were washed with PBS containing 1% BSA (PBSB). Surface expression of the displayed proteins with a C-terminal c-Myc tag was detected using anti-c-Myc chicken antibody (Life Technolo-gies) at a pre-determined dilution (1:400 in PBSB) incu-bated for 1 h at 4°C and subsequently stained with Alexa
Fluor-488 goat anti-chicken antibody (Life Technologies) at a predetermined dilution (1:300 in PBSB) for 1 h at 4°C,protected from light. Binding titration of 2077Hu2 with the displayed HA1 fragments was performed to determine the antibody epitope. The induced cells were incubated with varying concentrations of 2077Hu2 for 1 h at 4°C, and subsequently stained with Alexa Fluor-488 goat
anti-human antibody (Life Technologies) at a pre-determined dilution (1:400 in PBSB), as mentioned above. After washing, the fluorescence from the stained cells was detected by flow cytometric analysis (BD FACS-Aria, BDFACS-Diva Cytometry Software). The binding titration data were fit as described previously using the following equation [25]:

Kết quả (Việt) 1:

Sau khi cảm ứng, 1 triệu tế bào nấm men đã được xử lý để phân tích cá nhân. Các tế bào đã được rửa sạch với PBS có 1% BSA (PBSB). Các biểu hiện bề mặt của các protein được hiển thị với một thiết bị đầu cuối C c-Myc thẻ được phát hiện bằng cách sử dụng kháng thể anti-c-Myc gà (cuộc sống Technolo-kết) ở một pha loãng được xác định trước (1:400 tại PBSB) incu bated cho 1 h 4 ° C và sau đó màu với AlexaFluor-488 dê chống gà kháng thể (cuộc sống công nghệ) tại một pha loãng định trước (1:300 tại PBSB) cho 1 h 4 ° C, được bảo vệ từ ánh sáng. Ràng buộc các chuẩn độ của 2077Hu2 với các mảnh vỡ HA1 Hiển thị được thực hiện để xác định kháng thể epitope. Các tế bào gây ra đã được ủ với nồng độ khác nhau của 2077Hu2 cho 1 h 4° C, và sau đó màu với Alexa Fluor-488 dêcon người chống kháng thể (cuộc sống công nghệ) tại một pha loãng được xác định trước (1:400 PBSB), như đã đề cập ở trên. Sau khi rửa, huỳnh quang từ các tế bào màu đã được phát hiện bởi phân tích cytometric dòng (BD FACS-Aria, BDFACS-Diva Cytometry phần mềm). Dữ liệu chuẩn độ ràng buộc được vừa như mô tả trước đó bằng cách sử dụng phương trình sau [25]: