DISCUSSIONIn this study, we investi

DISCUSSION
In this study, we investigated whether treatment with WEAA can protect rat brain from injury induced by transient focal cerebral ischemia. We found that both ischemia-reper-
fusion-induced infarct volume and edema were reduced by WEAA in a dose-dependent manner, and that MPO activity was suppressed significantly in post-ischemic brain tissue. A. asphodeloides, which is widely used in traditional Chi-nese medicine, is known to have anti-diabetic, anti-platelet aggregation, and diuretic activity, and various steroidal saponins have been isolated from A. asphodeloides.11,12) Among these, timosaponin A-III and markogenin glycoside have been reported to inhibit ADP-, 5-HT-, and arachidonic acid-induced aggregation of human platelets.
12)Kaname et al.17) also reported that timosaponin E1 and E2 inhibit platelet aggregation and delay activated partial thromboplas- tin time in a concentration-dependent manner. Moreover, anemarsaponin B was reported to have inhibitory activity
against platelet aggregation induced by platelet activatingfactor (PAF) in vitro.18) These results suggest that steroidal saponins from A. asphodeloides might be useful as novel antithrombotic therapeutic agents post-myocardial infarction.
13) However, no study has been undertaken on the neuroprotec- tive effects of A. asphodeloidesin ischemic brain damage.WEAA was found to have a significant neuroprotective effect after double treatment in this rat reperfusion model, approaching 48% at 22 h similar to that of MCI-186 as posi- tive control. MCI-186 has been reported to have neuroprotec- tive effects in both hemispheric embolization and transientcerebral ischemia in rats.19—21)
In addition, post-treatment with WEAA delayed for 2 and 4 or 3 and 5 h after ischemia
significantly prevented the progression of infarction after MCAO. The time between onset of ischemia and initiation of drug treatment is a critical factor in treating acute ischemic stroke: our results obtained by the study of therapeutic time
window support the usefulness of WEAA in treating acute
ischemic stroke. In animals treated with WEAA only minimal numbers of
MPO-positive cells were present at 24 h after MCAO,whereas in marked contrast the brains of control rats con- tained dramatic accumulations of MPO-positive cells both
within pial and parenchymal blood vessels and within the striatum and cortex areas. In the sham group, almost no MPO-positive cells were observed in the striatum and cortex
areas (data not shown). However, WEAA did not show sig-
nificant free radical scavenging properties (only 16.4% inhi- bition of DPPH). Since inhibition of MPO activity plays a more critical role in injured brain tissue than DPPH radical- scavenging activity, it appears that the reduced brain infarct
volume due to WEAA treatment is more likely due to reduced neutrophil infiltration. Analysis of the infarct volume and MPO activity data demonstrated a clear correlation between reduction of brain infarct volume and MPO activity of injured tissue rather than with DPPH radical-scavenging activity. However, it is difficult to exclude the involvement of radical scavenging effects because higher concentrations of WEAA inhibited DPPH radicals and protected neuronal cell
death in rat hippocampal slices in culture deprived of oxygen
and glucose (data not shown).
Using MCAO model, Chopp et al.22)showed that treating rats with anti-Mac-1 antibodies also significantly reduced neutrophil accumulation in the ischemic cortex and subcor-tex. Furthermore, Matsuo et al.6)reported reductions in thelevel of cortical and striatal neutrophils when ischemic rats were pretreated with an anti-neutrophil monoclonal antibody. Both studies showed a positive correlation between reduced neutrophil infiltration and the subsequently reduced ischemic injury. Recently, several reports suggest that PAF enhances presynaptic synthesis and release of glutamate in neuronal cultures and PAF-induced neurotoxicity involves the NMDA receptor/nitric oxide signal pathway.23,24)It has also been shown that PAF receptor antagonists markedly prevent tissue injury and infarct volume in ischemic states. 25,26)Dong and Han 18)
reported that anemarsaponin B isolated from A. as-phodeloides inhibits platelet aggregation. As shown in the Materials and Methods section, anemarsaponin B is con-
tained in high amounts in the extract of A. asphodeloides. If anemarsaponin B acts as a PAF antagonist and an active compound in WEAA, the neuroprotective effect of WEAA
on ischemia-reperfusion-induced brain injury can be medi- ated by PAF inhibition. Unfortunately, more detailed exami-nations could not be undertaken because the amounts of ane-marsaponin B available were insufficient to study the neuro- protective effect in rat MCAO model. Although the precise mechanism of the mode of action of WEAA and an active compound were not elucidated in the present study, it is apparent that the neuroprotective effect is mediated

Kết quả (Việt) 2:

THẢO LUẬN
Trong nghiên cứu này, chúng tôi nghiên cứu xem điều trị với WEAA có thể bảo vệ não của chuột khỏi bị tổn thương gây ra bởi thiếu máu não thoáng qua đầu mối. Chúng tôi thấy rằng cả hai thiếu máu cục bộ-reper-
hợp gây ra khối lượng nhồi máu và phù nề đã giảm WEAA một cách phụ thuộc vào liều, và rằng hoạt động MPO đã bị đàn áp đáng kể trong mô não sau thiếu máu cục bộ. A. asphodeloides, được sử dụng rộng rãi trong y học Chi-NESE truyền thống, được biết là có chống đái tháo đường, tập hợp chống tiểu cầu và hoạt động lợi tiểu, và saponin steroid khác nhau đã được phân lập từ A. asphodeloides.11,12) Trong số này , timosaponin A-III và glycoside markogenin đã được báo cáo để ức chế ADP-, 5-HT-, và tập hợp axit gây ra arachidonic tiểu cầu của con người.
12) Kaname et al.17) cũng báo cáo rằng timosaponin E1 và E2 ức chế kết tập tiểu cầu và chậm trễ kích hoạt một phần thời gian thiếc thromboplas- một cách phụ thuộc nồng độ. Hơn nữa, anemarsaponin B đã được báo cáo là có hoạt động ức chế
chống kết tập tiểu cầu gây ra bởi tiểu cầu activatingfactor (PAF) trong vitro.18) Những kết quả này gợi ý rằng saponin steroid từ A. asphodeloides thể có ích như tác nhân điều trị chống huyết khối tiểu thuyết sau nhồi máu cơ tim.
13) Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu được thực hiện trên những tác động chính kịp thời neuroprotec- của A. asphodeloidesin não thiếu máu cục bộ damage.WEAA đã được tìm thấy có một tác dụng bảo vệ thần kinh đáng kể sau khi điều trị tăng gấp đôi trong mô hình tái tưới máu chuột này, gần 48% tại 22 h tương tự như của MCI -186 là cực kiểm soát chính kịp thời. MCI-186 đã được báo cáo là có tác dụng chính kịp thời neuroprotec- ở cả hai bán cầu não và thiếu máu cục bộ thuyên tắc transientcerebral trong rats.19-21)
Ngoài ra, sau khi điều trị với WEAA trì hoãn cho 2 và 4 hoặc 3 và 5 giờ sau khi thiếu máu cục bộ
ngăn cản đáng kể sự tiến triển nhồi máu sau MCAO. Thời gian giữa khởi đầu của thiếu máu cục bộ và bắt đầu điều trị thuốc là một yếu tố quan trọng trong điều trị đột quỵ thiếu máu cục bộ cấp tính: Kết quả của chúng tôi thu được từ việc nghiên cứu thời gian điều trị
cửa sổ hỗ trợ hữu ích của WEAA trong điều trị cấp tính
đột quỵ thiếu máu cục bộ. Ở động vật được điều trị bằng WEAA chỉ số tối thiểu của các
tế bào MPO dương đã có mặt tại 24 h sau khi MCAO, trong khi tương phản hẳn não chuột kiểm soát xíu tích lũy đầy kịch tính của các tế bào MPO-tích cực cả
trong PIAL và huyết nhu mô mạch và trong vân và vỏ não vùng. Trong nhóm giả tạo, tế bào hầu như không có MPO-tích cực đã được quan sát thấy trong thể vân và vỏ não
vùng (dữ liệu không hiển thị). Tuy nhiên, WEAA không cho thấy Sigma
có ý tự do thuộc tính nhặt rác triệt để (chỉ 16,4% ức chế của DPPH). Kể từ khi sự ức chế hoạt động MPO đóng một vai trò quan trọng hơn trong mô não bị tổn thương hơn so với hoạt động nhặt rác DPPH radical-, nó xuất hiện rằng giảm não nhồi máu
khối lượng do điều trị WEAA có nhiều khả năng do giảm thâm nhiễm bạch cầu trung tính. Phân tích của khối lượng nhồi máu và dữ liệu hoạt động MPO chứng minh một mối tương quan rõ ràng giữa giảm khối lượng não nhồi máu và hoạt động MPO các mô bị thương chứ không phải là với DPPH hoạt động cực đoan, nhặt rác. Tuy nhiên, rất khó để loại trừ sự tham gia của tác nhặt rác gốc tự do nồng độ cao của WEAA ức chế gốc tự DPPH và bảo vệ tế bào thần kinh
chết trong rat vùng đồi thị slice trong văn hóa thiếu oxy
và glucose (dữ liệu không hiển thị).
Sử dụng mô hình MCAO, Chopp et al 0,22) cho thấy điều trị chuột với anti-Mac-1 kháng thể cũng giảm đáng kể sự tích lũy bạch cầu trung tính trong vỏ não thiếu máu cục bộ và subcor-tex. Hơn nữa, Matsuo et al.6) báo cáo giảm thelevel của bạch cầu trung vỏ não và thể vân khi chuột thiếu máu cục bộ đã được điều trị bằng một kháng thể đơn dòng kháng bạch cầu trung tính. Cả hai nghiên cứu cho thấy một mối tương quan tích cực giữa giảm thâm nhiễm bạch cầu trung tính và sau đó giảm tổn thương thiếu máu cục bộ. Gần đây, một số báo cáo cho thấy PAF tăng cường tổng hợp trước synap và phát hành của glutamate trong các nền văn hóa tế bào thần kinh và PAF gây độc thần kinh liên quan đến các thụ thể NMDA / oxit nitric tín hiệu pathway.23,24) Nó cũng đã được chứng minh rằng PAF chất đối kháng thụ thể rõ rệt ngăn ngừa tổn thương mô và khối lượng nhồi máu tại các tiểu bang thiếu máu cục bộ. 25,26) Đồng và Han 18)
báo cáo rằng anemarsaponin B phân lập từ A. as-phodeloides ức chế kết tập tiểu cầu. Như đã trình bày trong phần Vật liệu và phương pháp, anemarsaponin B là con-
trì ở mức cao trong dịch chiết của A. asphodeloides. Nếu anemarsaponin B hoạt động như một chất đối kháng PAF và một hợp chất hoạt động trong WEAA, tác dụng bảo vệ thần kinh của WEAA
về chấn thương não thiếu máu cục bộ-tái tưới máu gây ra có thể được Medi-ated bằng cách ức chế PAF. Thật không may, chi tiết hơn exami-quốc gia có thể không được thực hiện vì các khoản ane-marsaponin B sẵn có không đủ để nghiên cứu tác dụng bảo vệ neuro- ở chuột mô hình MCAO. Mặc dù cơ chế chính xác của phương thức hành động của WEAA và một hợp chất hoạt động không được làm sáng tỏ trong nghiên cứu này, nó là rõ ràng rằng tác bảo vệ thần kinh trung gian