2.2. Isolation of neutrophilsHuman

2.2. Isolation of neutrophils
Human peripheral blood polymorphonuclear leukocytes (HPPMNs) were isolated from the peripheral blood of healthy humans by Ficoll-Hypaque (Flow Laboratories) density gradient centrifugation [21] and were washed twice with Krebs–Ringer phosphate solution, pH 7.4 (KRP) [22]. The cells were counted and resuspended in KRP at a concentration of 1x 10^8 cells / ml.
2.3.Assay of superoxide generation Superoxide generation was assayed by measuring the reduction of cyt.c at37C using a dual-beam spectrophotometer (Shimadzu UV-3000; Shimadzu,Kyoto, Japan) under constant stirring conditions [23]. The standard assay6mixture consisted of 1x10^6 cells / ml, 1 mmol / l CaCl , 20 mmol / l cyt.c,102
mmol / l glucose, 0–50 mmol / l steroidal saponin and a stimulus (12.5nmol/l
fMLP, 1 nmol / l PMA or 10 mmol / l AA) in a final volume of 2 ml of KRP.
After preincubation for 3 min with a steroidal saponin, the reaction was started
by adding a stimulus and the absorbance change at 550–540 nm (DA)was550–540monitored for 5 min.
2.4.Detection of tyrosyl phosphorylation of neutrophil proteins

Kết quả (Việt) 1:

2.2. sự cô lập của bạch cầu trung tínhMáu ngoại vi polymorphonuclear leukocytes (HPPMNs) bị cô lập từ máu ngoại vi của con người khỏe mạnh bởi Ficoll-Hypaque (chảy Laboratories) mật độ gradient số [21] và đã được rửa sạch hai lần với giải pháp phosphate Krebs – chuoâng, pH 7.4 (KRP) [22]. Các tế bào đã được tính và resuspended ở KRP lúc nồng độ của 1 x 10 ^ 8 tế bào / ml.2.3.Assay superoxide thế hệ Superoxide thế hệ được assayed bằng cách đo lường việc giảm cyt.c at37C bằng cách sử dụng một chùm kép phối (Shimadzu UV-3000; Shimadzu, Kyoto, Nhật bản) dưới liên tục khuấy điều kiện [23]. Assay6mixture tiêu chuẩn bao gồm 1 x 10 ^ 6 các tế bào / ml, 1 mmol / l CaCl, 20 mmol / l cyt.c,102mmol / l glucose, 0-50 mmol / l steroid saponin và một kích thích (12.5nmol / lfMLP, 1 nmol / l PMA hoặc 10 mmol / l AA) trong một tập cuối cùng của 2 ml KRP.Sau khi preincubation trong 3 phút với một steroid saponin, các phản ứng đã được bắt đầubằng cách thêm một kích thích và hấp thu thay đổi tại 550-540 nm (DA) was550-540monitored trong 5 phút.2.4.Detection tyrosyl phosphorylation protein bạch cầu trung tính

Kết quả (Việt) 2:

2.2. Phân lập của bạch cầu trung
nhân ngoại vi bạch cầu đa nhân trong máu (HPPMNs) được phân lập từ máu ngoại vi của con người khỏe mạnh bằng cách Ficoll-Hypaque (Flow Laboratories) mật độ Gradient ly tâm [21] và được rửa hai lần bằng dung dịch phosphat Krebs-Ringer, pH 7.4 (KRP) [22]. Các tế bào được đếm và lơ lửng trong KRP ở nồng độ 1x 10 ^ 8 tế bào / ml.
2.3.Assay của thế hệ superoxide dismutase thế hệ đã được khảo nghiệm bằng cách đo sự giảm cyt.c at37C sử dụng một máy quang phổ kép chùm (Shimadzu UV-3000 ; Shimadzu, Kyoto, Nhật Bản) trong điều kiện khuấy liên tục [23]. Các assay6mixture tiêu chuẩn gồm 1x10 ^ 6 tế bào / ml, 1 mmol / l CaCl, 20 mmol / l cyt.c, 102
mmol glucose / l, 0-50 mmol / l steroid saponin và một kích thích (12.5nmol / l
fMLP, 1 nmol / l PMA hoặc AA 10 mmol / l) trong một thể tích cuối cùng của 2 ml KRP.
Sau preincubation trong 3 phút với một saponin steroid, các phản ứng đã được bắt đầu
bằng cách thêm một kích thích và thay đổi độ hấp thụ ở 550-540 nm ( DA) was550-540monitored trong 5 phút.
2.4.Detection của tyrosyl phosphoryl hóa protein bạch cầu trung tính