Reversed-phase (RPC), ion-pair (IP)

Reversed-phase (RPC), ion-pair (IP), ion-exchange (IEC), hydrophilic interaction (HILIC),
hydrophobic interaction (HIC), normal-phase (NP), gel permeation (GPC), size-exclusion (SEC),
nonaqueous RP (NARP)
due to its faster analysis since shorter column length can be used. However,
columns packed with sub-2-µm packing should be purchased with caution
since they are best used for clean samples on low-dispersion instruments. The
following column dimensions are suggested:
•
50–100 mm ×4.6 mm i.d. for simple samples (e.g., assays of the main
component)
•
100–150 mm × 3.0–4.6 mm i.d. for purity testing or multi-component
testing of complex samples
•
20–150 mm ×2.0 mm columns for LC/MS
Guidelines on mobile phase selection are discussed in Chapter 2, Section 2.3
and are illustrated in the case study below. After evaluation of the first sample
chromatograms, further method development to fine-tune the separation will
be performed until all method goals are achieved. Other bonded phases or
column configurations can be selected to enhance method performance.These
are discussed in the Section 8.6.
8.4.4 Generating a First Chromatogram
8.4.4.1 Case Study: Initial Method Development Using a Broad Gradient and Mobile Phase Selection In this case study, a broad scouting gradient is used to obtain the first sample chromatogram. The method goal is to
develop an MS-compatible composite method (combined assay and impurity)
for a drug substance. This pharmaceutical active ingredient (API) is a basic
200

Kết quả (Việt) 2:

Giai đoạn đảo ngược (RPC), ion đôi (IP), trao đổi ion (IEC), tương tác hút nước (HILIC),
tương tác kỵ nước (HIC), bình thường pha (NP), gel thẩm thấu (GPC), kích thước, loại trừ ( SEC),
RP nonaqueous (NARP)
do phân tích nhanh hơn kể từ chiều dài cột ngắn hơn có thể được sử dụng. Tuy nhiên,
cột đóng gói với bao bì phụ-2-micron nên được mua thận trọng
kể từ khi chúng được sử dụng tốt nhất cho các mẫu sạch vào các công cụ phân tán thấp. Các
kích thước cột sau đây được đề nghị:
•
50-100 mm × 4.6 mm id cho các mẫu đơn giản (ví dụ, xét nghiệm của chính
thành phần)
•
100-150 mm × 3,0-4,6 mm id để kiểm tra độ tinh khiết hoặc nhiều thành phần
thử nghiệm mẫu phức tạp
•
20-150 mm × 2.0 mm cột cho LC / MS
Hướng dẫn về lựa chọn pha động được thảo luận trong Chương 2, mục 2.3
và được minh họa trong các nghiên cứu trường hợp dưới đây. Sau khi đánh giá các mẫu đầu tiên
sắc ký, phương pháp phát triển hơn nữa để tinh chỉnh việc tách sẽ
được thực hiện cho đến khi tất cả các mục tiêu phương pháp đạt được. Khác giai đoạn ngoại quan hoặc
cấu hình cột có thể được lựa chọn để nâng cao phương pháp performance.These
được thảo luận trong Phần 8.6.
8.4.4 Tạo ra một tiên sắc ký đồ
8.4.4.1 Trường hợp nghiên cứu: Phát triển ban đầu Phương pháp Sử dụng một Gradient rộng và giai đoạn lựa chọn di động Trong nghiên cứu trường hợp này , một gradient trinh sát rộng được sử dụng để có được trên sắc ký đồ mẫu đầu tiên. Mục tiêu là phương pháp để
phát triển một phương pháp tổng hợp MS-tương thích (kết hợp khảo nghiệm và tạp chất)
cho một chất ma túy. Thành phần hoạt chất dược phẩm này (API) là một cơ bản
200