The translation defect in Ctk1 depl

The translation defect in Ctk1 depleted cells is not caused by stress
Translation is mostly controlled at the step of initiation. Upon different stress conditions, eIF2 is phosphorylated which leads to a decrease in TC formation and thus inhibits translation initiation. In addition, translation initiation can be shut down in stress conditions via the 4EBPs or eIF4G cleavage (1.2; FIGURE 1).
In order to exclude a possible unspecific stress-induced inhibition of translation initiation upon loss of Ctk1 function, eIF2 phosphorylation as well as the incorporation of radiolabeled mRNA into translation initiation complexes was assessed in Ctk1 depleted cells. The level of eIF2phosphorylation was compared in whole cell protein extracts obtained from mock and Ctk1 depleted, ctk1, and 3-amino-1,2,4-triazole (3AT) treated wt cells, which served as a positive control. 3AT is a drug that induces amino acid starvation by being a competitive inhibitor of an enzyme involved in histidine production. As previously reported, depletion of Ctk1 under control of the GAL1 promoter for 18 hours lead to an almost complete loss of Ctk1, but not to the severe growth defect of ctk1 cells (FIGURE 6A; Röther & Sträßer 2007). As shown in FIGURE 10A, eIF2 phosphorylation was increased in ctk1 but not in Ctk1 depleted cells compared to wt indicating that the translation defect in Ctk1 depleted extracts is not caused by eIF2 phosphorylation.
To assess formation of 48S complexes in extracts of ctk1 cells, a translation init

Kết quả (Việt) 1:

Các khiếm khuyết bản dịch trong tế bào Ctk1 hết không được gây ra bởi sự căng thẳngDịch chủ yếu là kiểm soát ở bước bắt đầu. Khi điều kiện khác nhau căng thẳng, eIF2 phosphorylated mà dẫn đến sự sụt giảm trong hình thành TC và do đó ức chế bắt đầu dịch. Ngoài ra, bắt đầu dịch có thể được đóng cửa trong điều kiện căng thẳng thông qua cát khai 4EBPs hoặc eIF4G (1,2; HÌNH 1).Để loại trừ một có thể sự ức chế unspecific dịch bắt đầu khi mất mát các Ctk1 chức năng, eIF2 phosphorylation cũng như sự kết hợp của radiolabeled mRNA vào khu phức hợp bắt đầu dịch và căng thẳng gây ra được đánh giá trong các tế bào Ctk1 cạn kiệt. Mức độ eIF2phosphorylation được so sánh trong toàn bộ di động protein chất chiết xuất từ thu được từ mô hình và Ctk1 cạn kiệt, ctk1, và 3-amino-1,2,4-triazole (3AT) điều trị wt tế bào, mà phục vụ như là một điều khiển tích cực. 3AT là một loại thuốc đó gây ra axít amin đói bằng cách là một chất ức chế cạnh tranh của một loại enzyme tham gia vào sản xuất histidine. Như đã được báo cáo, sự suy giảm của Ctk1 dưới sự kiểm soát của promoter GAL1 cho 18 giờ dẫn đến một mất gần như hoàn toàn của Ctk1, nhưng không phải để các khiếm khuyết nghiêm trọng tăng trưởng của các tế bào ctk1 (con số 6A; Röther & Sträßer 2007). Như minh hoạ trong hình 10A, eIF2 phosphorylation được tăng lên trong ctk1 nhưng không có trong Ctk1 hết các tế bào so với wt chỉ ra rằng các khiếm khuyết bản dịch ở Ctk1 đã cạn kiệt chất chiết xuất từ không được gây ra bởi eIF2 phosphorylation.Để đánh giá sự hình thành của tổ hợp 48S trong chiết xuất của các tế bào ctk1, init dịch

Kết quả (Việt) 2:

Lỗi dịch thuật trong các tế bào đã bị giảm sút Ctk1 không được gây ra bởi stress
dịch là chủ yếu được kiểm soát ở các bước bắt đầu. Khi điều kiện căng thẳng khác nhau, eIF2 được phosphoryl hóa dẫn đến sự sụt giảm trong hình TC và do đó ức chế sự khởi đầu dịch. Ngoài ra, bắt đầu dịch có thể được tắt trong điều kiện căng thẳng thông qua các 4EBPs hoặc eIF4G phân cắt. (1,2; Hình 1)
Để loại trừ một sự ức chế không đặc hiệu do stress gây ra có thể bắt đầu giao dịch khi mất chức năng Ctk1, eIF2 phosphoryl cũng là sự kết hợp của phóng xạ mRNA thành phức hợp khởi đầu dịch được đánh giá trong Ctk1 tế bào bị cạn kiệt. Mức eIF2phosphorylation được so sánh trong toàn chiết xuất protein tế bào thu được từ mô hình và Ctk1 cạn kiệt, ctk1, và 3-amino-1,2,4-triazole (3AT) được điều trị khối lượng tế bào, trong đó phục vụ như một điều khiển tích cực. 3AT là một loại thuốc gây ra axit amin đói bằng cách ức chế cạnh tranh của một loại enzyme tham gia vào sản xuất histidine. Theo báo cáo trước đó, sự suy giảm của Ctk1 dưới sự kiểm soát của promoter GAL1 trong 18 giờ dẫn đến một sự mất mát gần như hoàn toàn Ctk1, nhưng chưa đến khiếm khuyết nghiêm trọng sự phát triển của các tế bào ctk1 (Hình 6A; Rother & Strasser 2007). Như thể hiện trong hình 10A, eIF2 phosphoryl hóa tăng ở ctk1 nhưng không có trong các tế bào Ctk1 cạn kiệt so với trọng lượng chỉ ra rằng các lỗi dịch trong Ctk1 cạn kiệt chiết xuất không được gây ra bởi eIF2 phosphoryl hóa.
Để đánh giá sự tạo phức 48S trong chiết xuất của  tế bào ctk1, một init dịch