Alpha toxin gene (cpa) oligonucleot

Alpha toxin gene (cpa) oligonucleotide primers were selected from published sequences (19):
5’ GCT AAT GTT ACT GCC GTT GACC 3’ and 3’ TCT GAT ACA TCG TGT AAG 5’.
PCR reactions were performed at a final volume of 50 µL with the following reagents: 10 mM
Tris-HCl, pH 8.3, 50 mM KCl, 50 mM MgCl2, 200 µM dNTP, 10 pmol of each primer, 2U
Taq DNA polymerase, and 5 µl of template DNA. Amplification mixture was incubated in a
thermalcycler PTC-200 DNA Engine. Samples were denatured at 95o
C for 5 minutes and then
submitted to 35 cycles of 1 min at 94o
C, 1 min at 53o
C, and 1 min at 72o
C, with a further
extension cycle of 10 min at 72o
C. C. perfringens type A ATCC 3624 was used as positive
control and water as negative control

Kết quả (Việt) 1:

Chất độc Alpha gen (cpa) oligonucleotide lớp lót đã được lựa chọn từ trình tự xuất bản (19):5' GCT AAT GTT ACT GCC GTT GACC 3 'và 3' TCT GAT ACA TCG TGT AAG 5'.Đảng Cộng sản Romania phản ứng đã được thực hiện tại một khối lượng cuối cùng của 50 ml với các chất phản ứng sau: 10 mMTris-HCl, pH 8.3, 50 mM KCl, 50 mM MgCl2, 200 μm dNTP, 10 pmol mỗi mồi, 2UTaq DNA polymerase, và 5 ml của mẫu DNA. Hỗn hợp khuếch đại được ủ trong mộtthermalcycler PTC-200 DNA động cơ. Mẫu đã denatured lúc 95oC trong 5 phút và sau đógửi đến 35 chu kỳ của 1 phút tại 94oC, 1 phút tại 53oC, và 1 phút tại 72oC, với thêmphần mở rộng chu kỳ của 10 phút tại 72oC. C. perfringens loại A ATCC 3624 được sử dụng như tích cựckiểm soát và nước như là tiêu cực điều khiển

Kết quả (Việt) 2:

Gen độc tố alpha (CPA) mồi oligonucleotide được lựa chọn từ các trình tự xuất bản (19):
5 'GCT AAT GTT ACT GCC GTT GACC 3' và 3 'TCT GAT ACA TCG TGT AAG 5'.
Phản ứng PCR được thực hiện ở một khối lượng cuối cùng của 50 ml với các thuốc thử sau: 10 mM
Tris-HCl, pH 8.3, 50 mM KCl, 50 mM MgCl2, 200 dNTP, 10 pmol của mỗi lớp sơn lót, 2U
Taq DNA polymerase, và 5 ml mẫu DNA. Hỗn hợp khuếch đại được ủ trong một
thermalcycler PTC-200 DNA Engine. Các mẫu được biến tính ở 95o
C trong 5 phút và sau đó
nộp cho 35 chu kỳ của 1 phút ở 94o
C, 1 phút ở 53o
C, và 1 phút ở 72o
C, với thêm
chu kỳ gia hạn 10 phút ở 72o
C. C. perfringens type A ATCC 3624 đã được sử dụng như là tích cực
kiểm soát và nước như kiểm soát tiêu cực