AgNO3 and 20 ml of 0.001 M sodium c

AgNO3 and 20 ml of 0.001 M sodium citrate. The resultant solution was stirred
for 5 min and aged for 1.5 h.
In the first method, the spherical silver hydrosols were prepared by reducing
aqueous AgNO3 with sodium citrate at near-boiling temperature. In a typical
procedure, an aqueous solution of AgNO3 (100 ml, 0.001 M) was brought to
boiling, and then 3 ml of the silver seed solution and an aqueous solution of
sodium citrate were added so that the final concentration of sodium citrate in the
reaction mixture became 0.001 M. The solution was heated until the color was
greenish yellow. The solution was cooled to room temperature. The silver nanoparticles
were purified by centrifugation. To remove excess silver ions, the silver
pellet was washed three times with deionized water. A dried powder of the
nanosize silver was obtained by freeze-drying. To carry out interaction of the
silver nanoparticles with bacteria, the silver nanoparticle powder in the freezedrying
cuvette was resuspended in water; the suspension was homogenized with
a Branson 2200 ultrasonicator. The resulting silver concentration was measured
by either inductively coupled plasma (ICP) emission spectroscopy (ES) (ICPS-
1000IV; Shimadzu, Kyoto, Japan) or ICP mass spectrometry (MS) (ELAN 6100;
Perkin-Elmer SCIEX).
Elongated (rod-shaped) and truncated triangular silver nanoplates were synthesized
by a solution phase method for the large-scale preparation of truncated
triangular nanoplates (8). To the particle growth solution containing 5 ml of 0.01
M AgNO3, 10 ml of 0.1 M ascorbic acid, 146 ml of 0.1 M CTAB, and 5 ml of silver
seeds, 1 ml of 1 M NaOH was added to accelerate particle growth. The solution
color changed from light yellow to brown, red, and green within a few minutes.
The resultant solution was aged at 21°C for 12 h, 35°C for 5 min, and 21°C for
24 h. The color of the aged solution changed from green to red.
The silver nanoplates were purified by centrifugation. The surfactants and the
smaller particles were separated by centrifugation at 2,100 g for 10 min. The
resultant precipitate was suspended in water and centrifuged again at 755 g for
10 min. Finally, the precipitate was suspended in water, and rods with larger
aspect ratios were removed by centrifuging at 84 g for 10 min. The supernatant
solution contained the truncated triangular silver nanoplates. It was not possible
to quantify the precipitate by weight, as it was always associated with some
water. The resulting silver level was quantified by ICP-ES or ICP-MS analysis
and reported in milligrams per liter or parts per million (detection limit of
Ag, 0.1 ppb).
Organism preparation. E. coli ATCC 10536 was grown overnight in NB at
37°C. Washed cells were resuspended in NB, and optical density (OD) was
adjusted to 0.1, corresponding to 108 CFU/ml at 600 nm.
Bacterial growth or killing kinetics in presence of nanosilver. To examine the
bacterial growth or killing kinetics in the presence of silver nanoparticles, E. coli
cells were grown in 100 ml of NB supplemented with different doses of nanosilver
(total silver content, 1, 6, 12, 12.5, 50, or 100 g), at 37°C with continuous
agitation. The cylindrical sample containers were placed horizontally on an
orbital shaker platform and agitated at 225 rpm. Growth or killing rates and
bacterial concentrations were determined by measuring OD at 600 nm. The OD
values were converted into concentration of E. coli cells (CFU per milliliter) (21,
31). OriginPro 7.5 software was used to analyze the experimental data and for
graphing (see Fig. 1 and 3 to 7).
Bacterial susceptibility to nanosilver. To examine the susceptibility of E. coli
to different silver nanoparticles, nutrient agar plates from a solution of agar were
prepared. A 100-l sample of bacterial suspension cultured in NB (with a
concentration of 105 or 107 CFU/ml of E. coli) was plated on a nutrient agar
plate. The plates were then supplemented with different amounts of nanosize
silver particles (1 to 100 g), and the plates were incubated further at 37°C. The
numbers of resultant colonies were counted after 24 h of incubation. Silver-free
plates incubated under the same conditions were used as controls. The counts
from three independent experiments corresponding to a particular sample were
averaged.
EFTEM analysis was also carried out to examine sections of the treated
bacteria. Images of negatively stained particles were acquired as follows. Concentrated
aqueous suspensions of E. coli cells were deposited on Formvar-coated
grids and allowed to sit for a few minutes. The grids were exposed to aqueous 1%
phosphotungstic acid for 30 s. The residual staining solution was then removed,
and the samples were immediately transferred to a microscope for inspection.
EFTEM images were acquired on a LIBRA 120 (Carl Zeiss) transmission electron
microscope.
Characterization of silver nanoparticles. The synthesized nanoparticles were
characterized by UV-visible spectroscopy and EFTEM. EFTEM images were
observed with a LIBRA 120 (Carl Zeiss) transmission electron microscope. The
samples were prepared by placing a drop of homogeneous suspension on a
copper grid with a lacey carbon film and allowing it to dry in air. Mean particle
size was analyzed from the digitized images with Image Tool software. UVvisible
absorption spectra were recorded with an Optizen 2120 UV-visible spectrophotometer
(Mecasys, Daejeon, Korea) with a 1-cm quartz cell.
RESULTS
UV-visible spectroscopy is one of the most widely used techniques
for structural characterization of silver nanoparticles.
The absorption spectrum (Fig. 1a) of the pale yellow silver
colloids prepared by citrate reduction showed a surface plasmon
absorption band with a maximum of 420 nm, indicating
the presence of lone spherical or roughly spherical Ag nanoparticles,
and TEM imaging confirmed this (Fig. 2A). A minimum
at 320 nm corresponds to the wavelength at which the
FIG.

Kết quả (Việt) 1:

AgNO3 và 20 ml Citrat natri 0,001 M. Các giải pháp kết quả đã được khuấycho 5 phút và tuổi cho 1.5 h.Trong phương pháp đầu tiên, hydrosols bạc hình cầu đã được chuẩn bị bằng cách giảmdung dịch nước AgNO3 với natri citrat ở nhiệt độ gần đun sôi. Trong một điển hìnhthủ tục, một giải pháp dung dịch nước của AgNO3 (100 ml, 0,001 M) đã được đưa đếnđun sôi, và sau đó 3 ml giải bạc hạt và dung dịchCitrat natri đã được thêm vào để nồng độ cuối cùng của Citrat natri trong cácphản ứng hỗn hợp trở thành 0,001 M. Giải pháp nước nóng cho đến khi màu sắchơi xanh màu vàng. Các giải pháp đã được làm mát bằng nước đến nhiệt độ phòng. Các hạt nano bạcđã được tinh chế bằng số. Để loại bỏ dư thừa các ion bạc, bạcmiếng được rửa ba lần với deionized nước. Một bột khô cácnanosize bạc được thu được bằng đông khô. Để thực hiện tương tác của cáchạt nano bạc với vi khuẩn, bột bạc đó freezedryingCuvette resuspended trong nước; Hệ thống treo được homogenized vớimột ultrasonicator Branson 2200. Nồng độ bạc kết quả đã được đobởi một trong hai ăngten cùng plasma (ICP) phát xạ phổ (ES) (ICPS-1000IV; Shimadzu, Kyoto, Nhật bản) hoặc ICP mass spectrometry (MS) (ELAN 6100;Perkin-Elmer SCIEX).Thuôn dài (cây gậy hình) và cắt ngắn nanoplates hình tam giác bạc đã được tổng hợpbằng phương pháp giai đoạn giải pháp cho việc chuẩn bị quy mô lớn của cắt ngắnhình tam giác nanoplates (8). Giải pháp phát triển hạt có chứa 5 ml 0,01M AgNO3, 10 ml của axít ascorbic 0.1 M, 146 ml 0.1 M CTAB và 5 ml bạchạt giống, 1 ml 1 M NaOH được bổ sung để tăng tốc độ tăng trưởng hạt. Các giải phápmàu sắc thay đổi từ màu vàng ánh sáng để nâu, màu đỏ và màu xanh lá cây trong vòng vài phút.Các giải pháp kết quả độ tuổi tại 21° C cho 12 h, 35° C cho 5 phút, và 21° C cho24 h. Màu sắc của các giải pháp tuổi thay đổi từ xanh sang màu đỏ.Nanoplates bạc đã được tinh chế bằng số. Các bề mặt và cáchạt nhỏ hơn đã được tách ra bởi số 2.100 g cho 10 phút cáckết quả precipitate bị đình chỉ trong nước và ly, một lần nữa tại 755 g cho10 phút. Cuối cùng, precipitate đã bị đình chỉ trong nước, và thanh với lớn hơntỷ lệ khía cạnh được tháo dỡ bởi centrifuging 84 g cho 10 phút. Supernatantgiải pháp chứa nanoplates bạc hình tam giác cắt ngắn. Nó là không thểđể định lượng precipitate theo trọng lượng, như nó đã luôn luôn gắn liền với một sốnước. Mức độ bạc kết quả định lượng bằng cách phân tích ICP-ES hoặc ICP-MSvà báo cáo trong mg / lít hoặc phần triệu (phát hiện giới hạn củaAG, 0.1 ppb).Chuẩn bị sinh vật. E. coli ATCC 10536 được trồng, qua đêm ở NB tại37° C. Rửa các tế bào đã được resuspended trong NB, và quang học mật độ (OD) làđiều chỉnh để 0.1, tương ứng với 108 CFU/ml ở 600 nm.Vi khuẩn phát triển hoặc giết chết động học trong sự hiện diện của nanosilver. Để kiểm tra cácvi khuẩn phát triển hoặc giết chết động học sự hiện diện của hạt nano bạc, E. colitế bào được trồng ở 100 ml NB bổ sung với các liều lượng khác nhau của nanosilver(tổng số nội dung bạc, 1, 6, 12, 12,5, 50 hoặc 100 g), lúc 37° C với liên tụckích động. Các thùng chứa mẫu hình trụ được đặt theo chiều ngang trên mộtquỹ đạo shaker nền tảng và giao động 225 rpm. Tỷ lệ tăng trưởng hoặc giết chết vàvi khuẩn nồng độ đã được xác định bằng cách đo OD tại 600 nm. ODgiá trị được chuyển đổi thành các tập trung của E. coli tế bào (CFU mỗi milliliter) (21,31). OriginPro 7,5 phần mềm được sử dụng để phân tích các dữ liệu thử nghiệm và chovẽ đồ thị (xem hình 1 và 3-7).Vi khuẩn nhạy cảm với nanosilver. Để kiểm tra tính nhạy cảm của E. colihạt nano bạc khác nhau, chất dinh dưỡng agar tấm từ một giải pháp của agar làchuẩn bị sẵn sàng. Một mẫu 100-l của vi khuẩn đình chỉ nuôi cấy trong NB (với mộtnồng độ của 105 hoặc 107 CFU/ml của E. coli) được mạ trên một agar dinh dưỡngtấm. Các mảng được bổ sung sau đó với số tiền khác nhau của nanosizebạc hạt (1-100 g), và các tấm được ủ thêm ở 37° C. Cácsố lượng kết quả thuộc địa đã được tính sau 24 h ấp. Bạc miễn phítấm ủ theo các điều kiện tương tự đã được sử dụng như điều khiển. Số lầntừ ba thí nghiệm độc lập tương ứng với một mẫu cụ thể đãTrung bình.EFTEM phân tích cũng được thực hiện để kiểm tra các phần của các điều trịvi khuẩn. Hình ảnh của tiêu cực màu hạt đã được mua lại như sau. Tập trungdung dịch nước đình chỉ của E. coli tế bào đã được gửi vào bọc Formvarlưới và có thể ngồi trong một vài phút. Lưới đã tiếp xúc với dung dịch nước 1%phosphowolframic axit cho 30 s. Dư nhuộm giải pháp sau đó đã được gỡ bỏ,và các mẫu được ngay lập tức chuyển sang một kính hiển vi để kiểm tra.EFTEM hình ảnh đã được mua lại trên một LIBRA 120 (Carl Zeiss) truyền điện tửkính hiển vi.Đặc tính của các hạt nano bạc. Các hạt nano tổng hợpđặc trưng quang phổ UV có thể nhìn thấy và EFTEM. EFTEM hình ảnh đãquan sát bằng kính hiển vi điện tử truyền LIBRA 120 (Carl Zeiss). Cácmẫu đã được chuẩn bị bằng cách đặt một giọt đồng nhất treo trên mộtlưới đồng với một bộ phim lacey cacbon và cho phép nó để khô trong không khí. Có nghĩa là hạtKích thước được phân tích từ các hình ảnh số hóa với công cụ hình ảnh phần mềm. UVvisiblequang phổ hấp thụ được ghi nhận với một phối Optizen 2120 UV-nhìn thấy(Mecasys, Daejeon, Hàn Quốc) với một tế bào thạch anh 1 cm.KẾT QUẢQuang phổ UV Hiển thị là một trong những kỹ thuật được sử dụng rộng rãi nhấtcho cấu trúc đặc tính của các hạt nano bạc.Quang phổ hấp thụ (hình 1a) nhạt màu vàng bạcHệ keo chuẩn bị bởi citrat giảm cho thấy một plasmon bề mặthấp thụ ban nhạc với một đa số 420 nm, chỉ rasự có mặt của duy nhất hình cầu hay hình cầu khoảng Ag hạt nano,và TEM hình ảnh xác nhận này (hình 2A). Tối thiểutại 320 nm tương ứng với các bước sóng mà tại đó cácHÌNH.

Kết quả (Việt) 2:

AgNO3 và 20 ml 0,001 M sodium citrate. Các giải pháp thu được được khuấy
trong 5 phút và độ tuổi cho 1,5 h.
Trong phương pháp đầu tiên, hydrosols bạc hình cầu đã được chuẩn bị bằng cách giảm
AgNO3 dung dịch nước với sodium citrate ở nhiệt độ gần sôi. Trong một điển hình
thủ tục, dung dịch AgNO3 (100 ml, 0.001 M) đã được đưa đến
sôi, và sau đó 3 ml dung dịch hạt bạc và dung dịch
sodium citrate đã được thêm vào để các nồng độ cuối cùng của sodium citrate trong
Hỗn hợp phản ứng đã trở thành 0,001 M. Các giải pháp đã được làm nóng đến khi màu sắc là
vàng lục. Giải pháp đã được làm lạnh đến nhiệt độ phòng. Các hạt nano bạc
đã được tinh chế bằng cách ly tâm. Để loại bỏ các ion bạc dư thừa, các bạc
pellet được rửa ba lần với nước cất. Một bột khô của
bạc nanosize đã thu được bằng cách đông khô. Để thực hiện các tương tác của các
hạt nano bạc với vi khuẩn, bột bạc hạt nano trong freezedrying
cuvette được lơ lửng trong nước; đình chỉ đã được đồng nhất với
một Branson 2200 ultrasonicator. Nồng độ bạc kết quả được đo
bằng một trong hai cách quy nạp plasma kết (ICP) quang phổ phát xạ (ES) (ICPS-
1000IV; Shimadzu, Kyoto, Nhật Bản) hoặc ICP phổ khối lượng (MS) (ELAN 6100;
Perkin-Elmer SCIEX).
Trái dài (rod hình chữ) và cắt ngắn nanoplates bạc tam giác đã được tổng hợp
bằng phương pháp pha giải pháp cho việc chuẩn bị quy mô lớn của cắt ngắn
nanoplates tam giác (8). Để các giải pháp tăng trưởng hạt có chứa 5 ml 0,01
M AgNO3, 10 ml 0,1 M axit ascorbic, 146 ml 0,1 M CTAB, và 5 ml dung dịch bạc
hạt, 1 ml dung dịch NaOH 1 M đã được thêm vào để tăng tốc phát triển hạt. Các giải pháp
màu sắc thay đổi từ vàng nhạt đến nâu, đỏ, xanh và trong vòng vài phút.
Các giải pháp thu được được tuổi ở 21 ° C trong 12 h, 35 ° C trong 5 phút, và 21 ° C trong
24 h. Các màu của dung dịch trong độ tuổi thay đổi từ màu xanh sang màu đỏ.
Các nanoplates bạc được tinh chế bằng cách ly tâm. Các hoạt động bề mặt và các
hạt nhỏ hơn được phân cách bằng ly tâm ở 2.100 g trong 10 phút. Các
chất kết tủa thu được được treo lơ lửng trong nước và ly tâm một lần nữa tại 755 g cho
10 phút. Cuối cùng, sự kết tủa được lơ lửng trong nước, và que với lớn hơn
tỷ lệ khía cạnh đã được gỡ bỏ bằng cách ly tâm tại 84 g trong 10 phút. Các bề
giải pháp chứa nanoplates bạc tam giác cắt ngắn. Nó là không thể
định lượng được kết tủa bằng trọng lượng, như nó đã luôn luôn gắn liền với một số
nước. Kết quả là mức độ bạc đã được định lượng bằng ICP-ES hoặc ICP-MS phân tích
và báo cáo bằng miligam trên lít hoặc phần triệu (giới hạn phát hiện của
Ag,? 0,1 ppb).
Sinh vật chuẩn bị. E. coli ATCC 10536 được phát triển qua đêm ở NB ở
37 ° C. Tế bào rửa sạch được lơ lửng ở NB, và mật độ quang (OD) đã được
điều chỉnh đến 0,1, tương ứng với 108 CFU / ml ở 600 nm.
Tăng trưởng của vi khuẩn hoặc tiêu diệt động học trong sự hiện diện của nanosilver. Để kiểm tra sự
tăng trưởng của vi khuẩn hoặc tiêu diệt động học với sự có mặt của các hạt nano bạc, E. coli
tế bào được nuôi cấy trong 100 ml của NB bổ sung với liều lượng khác nhau của nanosilver
(tổng hàm lượng bạc, 1, 6, 12, 12.5, 50, hay 100? g), ở 37 ° C với liên tục
kích động. Các container mẫu hình trụ được đặt nằm ngang trên một
nền tảng máy lắc quỹ đạo và giao động ở 225 rpm. Tốc độ tăng trưởng hoặc giết hại và
nồng độ vi khuẩn được xác định bằng cách đo OD ở 600 nm. Các OD
giá trị đã được chuyển đổi thành nồng độ E. coli tế bào (CFU mỗi ml) (21,
31). OriginPro 7,5 phần mềm được sử dụng để phân tích các dữ liệu thực nghiệm và cho
vẽ đồ thị (xem hình. 1 và 3-7).
Tính nhạy cảm của vi khuẩn để nanosilver. Để kiểm tra sự nhạy cảm của E. coli
với các hạt nano bạc khác nhau, tấm thạch dinh dưỡng từ một dung dịch agar đã
chuẩn bị. Một mẫu 100-? L của dịch khuẩn được nuôi cấy trong NB (với
nồng độ 105 hoặc 107 CFU / ml E. coli) được mạ trên môi trường thạch dinh dưỡng
tấm. Các tấm được sau đó được bổ sung với số lượng khác nhau của nanosize
hạt bạc (1-100? G), và các tấm được ủ thêm ở 37 ° C. Các
con số của các thuộc địa kết quả được tính sau 24 giờ ủ. Silver-free
tấm ủ theo các điều kiện tương tự đã được sử dụng như điều khiển. Đếm
từ ba thí nghiệm độc lập tương ứng với một mẫu cụ thể được
tính trung bình.
Phân tích EFTEM cũng đã được thực hiện để kiểm tra các phần của điều trị
vi khuẩn. Hình ảnh của các hạt màu tiêu cực đã được mua lại như sau. Tập trung
huyền phù dung dịch nước của các tế bào E. coli được lắng tụ trên Formvar bọc
lưới và được phép ngồi trong một vài phút. Các lưới đã được tiếp xúc với dung dịch 1%
axit phosphotungstic trong 30 s. Các giải pháp nhuộm dư sau đó đã được gỡ bỏ,
và các mẫu được lập tức chuyển đến một kính hiển vi để kiểm tra.
EFTEM hình ảnh đã được thu thập trên một LIBRA 120 (Carl Zeiss) điện tử truyền qua
kính hiển vi.
Đặc tính của hạt nano bạc. Các hạt nano tổng hợp được
đặc trưng bởi các tia cực tím có thể nhìn thấy quang phổ và EFTEM. Hình ảnh EFTEM đã được
quan sát với một LIBRA 120 (Carl Zeiss) kính hiển vi điện tử truyền qua. Các
mẫu đã được chuẩn bị bằng cách đặt một giọt huyền phù đồng trên một
lưới đồng với một bộ phim lacey carbon và cho phép nó để khô trong không khí. Mean hạt
kích thước đã được phân tích từ những hình ảnh được số hóa với công cụ hình ảnh phần mềm. UVvisible
quang phổ hấp thụ được ghi lại với một Optizen 2120 UV-nhìn thấy được quang phổ
(Mecasys, Daejeon, Hàn Quốc) với một tế bào thạch anh 1-cm.
KẾT QUẢ
UV-nhìn thấy được quang phổ là một trong những kỹ thuật được sử dụng rộng rãi nhất
cho đặc điểm cấu trúc của các hạt nano bạc.
Sự hấp thu (1a hình.) quang phổ của bạc vàng nhạt
chất keo chế bằng cách giảm citrate cho thấy một plasmon bề mặt
dải hấp thụ với mức tối đa là 420 nm, cho thấy
sự hiện diện của lone hình cầu hoặc gần cầu hạt nano Ag,
và ảnh TEM xác nhận điều này (Hình. 2A ). Một tối thiểu
ở 320 nm tương ứng với bước sóng mà tại đó các
FIG.