Trong một cuộc khảo sát ban đầu cho sự xuất hiện của chitinolytic
hoạt động trong P. £ uorescens phân lập, các tế bào được
phát triển trong 3 ngày tại 28³C trong 25 ml Tryptic nành Broth
(TSB; Difco) trên máy lắc quay (200 rpm). Tăng trưởng
được xác định bằng đo quang mật độ
(OD, 600 nm) và hoạt động chitinolytic (xem dưới đây)
đã được xác định trong phân bào và nổi
sau một ly tâm ở 7000Ug cho 7 phút ở 20³C.
Các phần tế bào được rửa trong 0,9% NaCl và
lơ lửng trong 10% TSB trung mà không có thêm
sự tập trung. Các mẫu được lưu giữ tại 320³C cho sau này
phân tích các hoạt động của enzyme và đẳng điện tập trung
gel điện di (xem dưới đây). Kết quả thu được
là giá trị trung bình của ba lần nhắc lại độc lập.
Endochitinase sản xuất đã được nghiên cứu trong ba chủng
chi tiết trong TSB trung bình (30 ml) trong thời gian 3 ngày
ủ, đại diện cho một chu kỳ tăng trưởng đầy đủ của các
chủng phân lập trong các nền văn hóa hàng loạt. Các nền văn hóa đã được tiêm
tế bào, vốn đã được precultured trong 25 ml
TSB và rửa một lần trong 0.9% NaCl, một OD600nm
0.1. Các nền văn hóa đã được ủ ở 28³C trên một
shaker quay (200 rpm). Một số mẫu
đang được dịch, vui lòng đợi..