EdU (5-ethynyl-2’-deoxyuridine) is

EdU (5-ethynyl-2’-deoxyuridine) is a novel alternative for BrdU (5-bromo-2’-deoxyuridine)
assay to directly measure active DNA synthesis or S-phase synthesis of the cell cycle. EdU is a
nucleoside analog of thymidine and is incorporated into DNA during active DNA synthesis.1
Detection of EdU is based on a click reaction,1-5 which is a copper (I) catalyzed reaction
between an azide and an alkyne. The EdU contains the alkyne which can be reacted with the
an azide-containing detection reagent, to form a stable, triazole ring (Figure 1).
The advantages of the click reaction with EdU labeling are readily evident while performing
the assay. The small size of the detection azide allows the use of mild conditions to access
EdU incorporated into the DNA. This is in contrast to BrdU-based assays that require DNA
denaturation (typically using HCl, heat, or digestion with DNase) to expose the BrdU for
detection with an anti-BrdU antibody (Figure 2). Eliminating the denaturation step allows
for a simple, fast protocol producing more reproducible results and measurements which are
easily multiplexed with relevant antibody based targets including phospho-histone H3, Ki-67,
and cyclin B1 by flow cytometry, fluorescence microscopy, or high-throughput imaging
(HCS) (Figures 3 and 4)

Kết quả (Việt) 2:

Edu (5 ethynyl-2'-deoxyuridine) là một lựa chọn mới cho BrdU (5-bromo-2'-deoxyuridine)
khảo nghiệm để đo trực tiếp hoạt động tổng hợp DNA hoặc S pha tổng hợp của chu kỳ tế bào. Edu là một
nucleoside thymidine và được tích hợp vào ADN trong DNA hoạt động synthesis.1
Phát hiện Edu được dựa trên một phản ứng nhấp chuột, 1-5 mà là một đồng (I) xúc tác phản ứng
giữa một azide và một ankin. EDU chứa ankin có thể phản ứng với
một thuốc thử phát hiện azide chứa, để tạo thành một, vòng triazole ổn định (hình 1).
Những lợi thế của phản ứng nhấp chuột với nhãn edu là dễ dàng hiển nhiên trong khi thực hiện
xét ​​nghiệm. Kích thước nhỏ của azit phát hiện cho phép người sử dụng điều kiện ôn hòa để truy cập
Edu kết hợp vào DNA. Điều này trái ngược với các xét nghiệm BrdU dựa trên yêu cầu DNA
biến tính (thường sử dụng HCl, nhiệt, hoặc tiêu hóa với DNase) để lộ BrdU cho
phát hiện với một kháng thể chống BrdU (Hình 2). Loại bỏ các bước biến tính cho phép
cho một đơn giản, giao thức nhanh chóng sản xuất kết quả tái sản xuất nhiều hơn và các phép đo được
một cách dễ dàng ghép với các mục tiêu kháng thể có liên quan dựa bao gồm phospho-histone H3, Ki-67,
và cyclin B1 bởi dòng cytometry, kính hiển vi huỳnh quang, hoặc thông lượng cao hình ảnh
(HCS) (hình 3 và 4)