Results and DiscussionIt was diffic

Results and Discussion

It was difficult to analyze all the data collected after such a large combination of variants. The number of shoots and roots regenerated, and the regeneration frequency (shoots or root regenerated on the total number of explants), were considered for the selection of a competent condition for sweet potato regeneration. As in all the regeneration and transformation protocols it is very important to have high plant conversion in order to increase the likelihood of transformed plants.

Leaves had a higher regeneration frequency compared to stem. Therefore, we consider that leaves are suitable target explants in the transformation studies based on this organogenesis mediated protocol. The most potential area for shoot and root formation was just above the cut piece of petiole on the leaf where a small callus was formed before the emission of roots or shoots, or both.

The stem explants were able to form non-embryogenic calli on the cut side of the explants but early organogenic shoots appear before these calli and they were always regenerated from the meristematic area placed in the nodal section. The CEMSA-78354 stems were harder to manipulate than the Jewel since in the former, the internodal segments are very short and the vegetative buds may have not been completely removed. As a result of this handicapped shoot emission, more than 95% were obtained for the CEMSA-78354 and 70% for the Jewel emissions, on several media from both cultivars (MS + IAA 0.5 mg/L + sucrose 3%; MS + sucrose 3% + BAP 0.1 mg/L + NAA 1.0 mg/L; MS + sucrose 3% + Kin 0.1 mg/L + IAA 0.5 mg/L). However, it is believed that this was due to some remaining meristematic and differentiated tissues from the buds that continued developing into normal plants under the growth regulator effects. Although not yet demonstrated, the classical organogenesis and bud development was observed only a week after culturing the explants under the above mentioned conditions.

Remarkably, the influence of auxin to induce direct organogenesis was observed to be greater than that one of the cytokinins. More stimulation for non embryogenic calli formation were usually found when the explants were treated with cytokinins (even at low concentrations) compared to auxins. In some cases shoots were achieved by giving moderated auxin treatments (IAA 0.5 mg/L; NAA 0.1 mg/L). There is no previous reference of using auxin based stimulation alone to induce plant regeneration in sweet potato, especially for these cultivars.

The CEMSA-78354 cultivar was more difficult to regenerate than the Jewel. This cultivar was induced to form calli under low levels of any kind of growth regulator. The calli were compact and hard to manipulate with blades, they were green throughout the area that was in full contact with the medium, but the cells on the top were always white. Root emission and sporadic shoot formation were obtained as well, but at a very low frequency on a growth regulator free MS medium. This must be due to the endogenous growth regulators for this cultivar. Secondary roots were formed profusely in 127 treatments assayed and it is thought to be a very important fact blocking shoot formation. When the first roots or shoots emitted were separated from the original explants, new roots or shoots were formed again.

Shoot induction both from the original explant and the regenerated root were achieved on several combinations of growth regulators during the regeneration study. However, none was above 20% of regeneration, except for three of the growth regulator combinations studied on which the following observations were based. The most significant results were obtained for the following three combinations (Tables 1-3).

Kết quả (Việt) 1:

Kết quả và thảo luậnNó đã được khó khăn để phân tích tất cả các dữ liệu thu thập được sau khi kết hợp lớn các biến thể. Số lượng các cành và rễ tái sinh, và tần suất tái sinh (cành hoặc gốc tái tạo trên tổng số explants), đã được xem xét cho việc lựa chọn một điều kiện có thẩm quyền để tái tạo khoai. Như trong tất cả các giao thức tái tạo và chuyển đổi nó là rất quan trọng phải có cao thực vật chuyển đổi để tăng khả năng chuyển đổi cây trồng. Lá có một tần số tái sinh cao hơn so với xuất phát. Vì vậy, chúng ta xem xét rằng lá là phù hợp với mục tiêu explants trong các nghiên cứu của chuyển đổi dựa trên giao thức organogenesis trung gian này. Các khu vực tiềm năng nhất cho hình chụp và gốc ngay trên mảnh cắt cuống lá trên lá nơi callus nhỏ được thành lập trước khi phát thải của rễ hoặc cành, hoặc cả hai.Explants thân cây đã có thể hình thành không embryogenic calli trên mặt cắt của các explants nhưng cành organogenic sớm xuất hiện trước calli và họ luôn luôn đã được tái tạo từ các khu vực meristematic được đặt trong phần nút. Thân CEMSA-78354 đã khó khăn hơn để thao tác hơn Ngọc kể từ năm trước đây, các phân đoạn internodal là rất ngắn và chồi thực vật có thể đã không được loại bỏ hoàn toàn. Là kết quả của khí thải tàn tật bắn này, hơn 95% đã được các CEMSA-78354 và 70% cho lượng phát thải của Jewel, trên một số phương tiện truyền thông từ cả hai giống cây trồng (MS + IAA 0,5 mg/L + sucrose 3%; MS + sucrose 3% + BAP 0.1 mg/L + NAA 1.0 mg/L; MS + sucrose 3% + Kin 0.1 mg/L + IAA 0,5 mg/L). Tuy nhiên, người ta tin rằng điều này là do một số còn lại meristematic và phân biệt mô từ các chồi đó tiếp tục phát triển thành cây bình thường dưới những tác động điều chỉnh tốc độ tăng trưởng. Mặc dù chưa được chứng minh, sự phát triển organogenesis và bud cổ điển được quan sát thấy chỉ một tuần sau khi nuôi explants dưới ở trên đề cập đến điều kiện.Đáng chú ý, sự ảnh hưởng của auxin để tạo ra trực tiếp organogenesis được quan sát thấy được lớn hơn là một trong những cytokinins. Thêm kích thích cho sự hình thành không embryogenic calli thường được tìm thấy khi các explants đã được điều trị với cytokinins (ngay cả ở nồng độ thấp) so với auxins. Trong một số trường hợp cành đã đạt được bằng cách đưa ra phương pháp điều trị auxin kiểm duyệt (IAA 0,5 mg/L; NAA 0.1 mg/L). Có là không có tài liệu tham khảo trước bằng cách sử dụng auxin dựa trên sự kích thích một mình để tạo ra các thực vật tái tạo trong khoai lang, đặc biệt là đối với những giống cây trồng.CEMSA-78354 cây trồng đã khó khăn hơn để tái tạo hơn Ngọc. Giống cây trồng này đã gây ra để tạo thành calli dưới mức thấp của bất kỳ hình thức nào của điều chỉnh tăng trưởng. Của calli là nhỏ gọn và cứng để thao tác với lưỡi, họ đã được màu xanh lá cây trong suốt khu vực đầy đủ tiếp xúc với các phương tiện, nhưng các tế bào trên đầu trang luôn trắng. Sporadic shoot hình thành và phát thải gốc được thu được là tốt, nhưng ở một tần số rất thấp trên một tốc độ tăng trưởng điều miễn phí MS phương tiện. Đây hẳn là do việc điều chỉnh sự phát triển nội sinh cho cây trồng này. Rễ thứ cấp được thành lập profusely trong 127 assayed và nó được cho là một thực tế rất quan trọng ngăn chặn bắn hình thành. Khi lần đầu rễ hoặc cành phát ra đã được tách ra từ explants gốc, rễ mới hoặc cành đã được thành lập lại.Cảm ứng bắn cả từ explant gốc và rễ regenerated đã đạt được trên một số kết hợp của các điều chỉnh tốc độ tăng trưởng trong thời gian học tái tạo. Tuy nhiên, không có gì là trên 20% của tái sinh, ngoại trừ ba kết hợp điều chỉnh tăng trưởng nghiên cứu trên đó các quan sát sau đây được dựa. Các kết quả quan trọng nhất đã được cho ba kết hợp sau (bảng 1-3).

Kết quả (Việt) 2:

Kết quả và thảo luận

Thật khó để phân tích tất cả các dữ liệu thu thập được sau khi một sự kết hợp lớn của các biến thể. Số chồi và rễ phát sinh, và tần số tái sinh (chồi hay rễ tái sinh trên tổng số cấy), được xem xét trong việc lựa chọn một điều kiện có thẩm quyền để tái sinh khoai lang. Như trong tất cả các giao thức tái sinh và chuyển đổi nó là rất quan trọng để có chuyển đổi cây cao để tăng khả năng của các nhà máy chuyển đổi.

Lá có một tần số tái sinh cao hơn so với thân cây. Vì vậy, chúng tôi cho rằng lá cấy mục tiêu phù hợp trong các nghiên cứu chuyển đổi dựa trên thành các cơ quan trung gian giao thức này. Các khu vực tiềm năng nhất để tạo chồi và rễ chỉ ở mức trên mảnh cắt của cuống lá trên lá nơi một sẹo nhỏ được hình thành trước khi sự phát xạ của rễ và chồi non, hoặc cả hai.

Việc cấy gốc đã có thể hình thành mô sẹo không phôi trên cắt mặt của các mẫu cấy nhưng chồi organogenic đầu xuất hiện trước khi những mô sẹo và họ đã luôn luôn tái sinh từ vùng mô phân sinh đặt trong phần nút. Các CEMSA-78.354 cành khó khăn hơn để thao tác hơn Jewel kể từ thời kỳ trước, các phân đoạn internodal là rất ngắn và các chồi có thể đã không được loại bỏ hoàn toàn. Như một kết quả của sự phát thải chụp khuyết tật này, hơn 95% đã thu được CEMSA-78.354 và 70% cho lượng khí thải Jewel, trên một số phương tiện truyền thông từ cả hai giống (MS + IAA 0,5 mg / L + sucrose 3%; MS + sucrose 3% + BAP 0,1 mg / L + NAA 1,0 mg / L; MS + sucrose 3% + Kin 0,1 mg / L + IAA 0,5 mg / L). Tuy nhiên, người ta tin rằng điều này là do một số mô mô phân sinh và biệt hóa còn lại từ các chồi đó tiếp tục phát triển thành cây bình thường dưới tác dụng điều hòa sinh trưởng. Mặc dù chưa chứng minh, sinh cơ quan và nụ phát triển cổ điển đã được quan sát thấy chỉ một tuần sau khi nuôi cấy cấy theo các điều kiện nêu trên.

Đáng chú ý, ảnh hưởng của auxin để kích thích sinh cơ quan trực tiếp quan sát được là lớn hơn so với một trong các cytokinin. Nhiều kích thích cho sự hình thành mô sẹo không phôi thường được tìm thấy khi cấy được điều trị với cytokinin (thậm chí ở nồng độ thấp) so với auxin. Trong một số trường hợp măng đã đạt được bằng cách cho phương pháp điều trị auxin kiểm duyệt (IAA 0,5 mg / L; NAA 0,1 mg / L). Không có tài liệu tham khảo trước khi sử dụng auxin kích thích dựa một mình để tạo ra sự tái sinh cây ở khoai tây ngọt, đặc biệt là đối với các giống cây trồng.

Các CEMSA-78.354 cây trồng là rất khó khăn để tái sinh hơn Jewel. Giống này được cảm ứng để tạo thành mô sẹo dưới mức thấp của bất kỳ loại điều hòa sinh trưởng. Các mô sẹo là nhỏ gọn và dễ dàng thao túng với lưỡi, họ là màu xanh lá cây trong suốt khu vực đó đã được tiếp xúc đầy đủ với các phương tiện, nhưng các tế bào trên đầu luôn trắng. Gốc phát thải và tạo chồi lẻ tẻ đã thu được là tốt, nhưng ở một tần số rất thấp trên một bộ điều chỉnh tốc độ tăng trưởng trung bình miễn phí MS. Điều này phải do cơ quan quản lý tăng trưởng nội sinh cho cây trồng này. Rễ thứ cấp được hình thành đầm đìa trong 127 trị khảo nghiệm và nó được coi là một hình chụp thực tế chặn rất quan trọng. Khi rễ đầu tiên và chồi non phát ra được tách ra từ các mẫu cấy ban đầu, rễ mới hay chồi được hình thành một lần nữa.

Bắn cảm ứng cả từ mẫu cấy ban đầu và gốc tái sinh đã đạt được trên một số kết hợp của điều hòa sinh trưởng trong nghiên cứu tái sinh. Tuy nhiên, không ai có trên 20% tái sinh, ngoại trừ ba của các tổ hợp sinh trưởng nghiên cứu mà các quan sát sau đây được dựa. Kết quả quan trọng nhất đã thu được ba kết hợp sau đây (Bảng 1-3).