2. Vật liệu và phương pháp
2.1. Thuốc thử
MPP
+
và đa-
D
D
-lysine là từ Sigma. Anti-Tyrosine hydroxy-
lase (TH) kháng thể, kháng thể biotin thứ nhãn, ABC (avidin
biotin phức tạp) kit và DAB (diaminobenzidine) là từ Chem-
biểu tượng. DMEM / F12 và N2 (văn hóa, bổ sung) là từ Gibco.
Oligo dT12-18, RNAguard, đảo ngược transcriptase, Taq polymerase
và kit ELISA GDNF là từ Promega. Các SYBR
?
Xanh 1
bộ thuốc nhuộm là từ Applied Biosystems. Anti-GDNF (MAB212) và
chống GFR
một
kháng thể 1 (MAB560) chặn chức năng là từ
R & G. Smilagenin (độ tinh khiết 98%) được sử dụng trong nghiên cứu này đã được cung cấp bởi
Sigma, cấu trúc đã được khẳng định bởi MS và
13
C NMR.
2.2. Văn hóa chính của tế bào mesencephalic
Sprague-Dawley (SD) chuột mang thai được lấy từ Thượng Hải
SIPPR-BK Công ty vật trong phòng thí nghiệm. Các động vật thí nghiệm
đã được thực hiện phù hợp với Viện Y tế quốc gia
hướng dẫn cho việc chăm sóc và sử dụng động vật thí nghiệm (NIH Ấn phẩm
số 80-23), sửa đổi vào năm 1996, và đã được chấp thuận bởi Đạo đức Animal
Ủy ban của Thượng Hải Đại học Giao thông Y tế Ngôi trường. Các
phương pháp nuôi cấy tế bào mesencephalic đã được sửa đổi từ Radad
đang được dịch, vui lòng đợi..
