4. Materials and methods4.1. Sample

4. Materials and methods

4.1. Sample collection and DNA extraction

The A. vera plants were collected from Sungai Buloh horticulture

nursery area (3.235283 N, 101.568342 E), Selangor. For a relatively

wide coverage, five different plants were dug at different points in the

same location, neatly transferred into sterile biosafety bag and brought

to Laboratory for immediate analyses. Each plant was washed under

running tap water to remove soil particles and allowed to drain. The

leaves, stems and roots were detached with sterile knife and washed

with sterile distilled water plus a few drops of Tween-20 and left for

10–15 min to drain. These were then cut into 4–5 pieces (2–3 cm in

size). Surface sterilization was performed according to the methods

described by Azevedo et al. [30] with modifications to the duration for

sterilization and ethanol concentrations. Briefly, tissues were immersed

separately in 90% ethanol (5 min), followed by sodium hypochlorite

(3%) solution (2 min), and into 75% ethanol (3 min). The disinfected

leaves, stems and roots were rinsed three times in sterile distilled water and drained in laminar flow hood

Kết quả (Việt) 1:

4. vật liệu và phương pháp4.1. Lấy mẫu bộ sưu tập và khai thác DNAA. vera cây được thu thập từ Sungai Buloh làm vườnvườn ươm khu vực (3.235283 N, 101.568342 E), Selangor. Cho một tương đốiphạm vi bảo hiểm rộng, năm nhà máy khác nhau đã được đào tại các điểm khác nhau trong cáccùng một vị trí, chuyển vào an toàn sinh học vô trùng túi gọn gàng và mangđể trong phòng thí nghiệm phân tích ngay lập tức. Mỗi nhà máy rửa sạch dướichạy vòi nước để loại bỏ các hạt đất và cho phép để ráo nước. Cáclá, thân cây và rễ được tách ra bằng dao vô trùng và rửa sạchvới vô trùng chưng cất nước cộng với một vài giọt Tween-20 và bên trái để10 – 15 phút để ráo nước. Những sau đó đã được cắt thành 4-5 miếng (2-3 cmKích thước). Khử trùng bề mặt được thực hiện theo các phương phápđược mô tả bởi Azevedo et al. [30] với những cải tiến trong suốt thời gian chonồng độ khử trùng và ethanol. Một thời gian ngắn, các mô bị đắm mìnhmột cách riêng biệt trong 90% ethanol (5 phút), theo sau là natri hypocloritgiải pháp (3%) (2 phút), và vào 75% ethanol (3 phút). Sự khửlá, thân cây và rễ được rửa ba lần trong nước cất vô trùng và thoát nước tốt trong mui xe laminar flow

Kết quả (Việt) 2:

4. Vật liệu và phương pháp

4.1. Thu thập mẫu DNA và khai thác

các nhà máy vera A. đã được thu thập từ vườn Sungai Buloh

khu vực vườn ươm (3.235283 N, 101.568342 E), Selangor. Đối với một tương đối

phủ sóng rộng, năm nhà máy khác nhau đã được đào tại các điểm khác nhau trong

cùng một vị trí, gọn gàng chuyển vào túi an toàn sinh học vô trùng và đưa

đến phòng thí nghiệm để phân tích ngay lập tức. Mỗi nhà máy đã được rửa sạch dưới

vòi nước chảy để loại bỏ các hạt đất và cho phép để ráo nước. Các

lá, thân và rễ được tách ra với con dao vô trùng và rửa sạch

bằng nước cất vô trùng cộng với một vài giọt Tween-20 và để lại cho

10-15 phút để ráo nước. Những sau đó được cắt thành 4-5 miếng (2-3 cm trong

kích thước). Khử trùng bề mặt được thực hiện theo các phương pháp

được mô tả bởi Azevedo et al. [30] với những thay đổi với thời gian cho

nồng độ khử trùng và ethanol. Tóm lại, mô được ngâm

riêng trong 90% ethanol (5 phút), tiếp theo là sodium hypochlorite

(3%), giải pháp (2 phút), và thành 75% ethanol (3 phút). Việc khử trùng

lá, thân và rễ được rửa ba lần trong nước cất vô trùng và để ráo nước trong dòng chảy mui xe laminar