At the time designated, fish sauce

At the time designated, fish sauce sample was dialysed
against 10 volumes of distilled water at 4 C for
24 h to remove salt prior to the proteolytic activity assay.
Proteolytic activity was measured using the casein–TCA–Lowry
assay (Klomklao et al., 2004). To
initiate the reaction, 200 ll of dialysed fish sauce sample
were added into assay mixtures containing 2 mg of casein,
200 ll of distilled water and 625 ll of reaction buffer (0.1 M glycine–NaOH, pH 9.0). The enzymatic reaction
was conducted at 55 C for 15 min and terminated by
adding 200 ll of 50% (w/v) trichloroacetic acid (TCA).
Unhydrolysed protein substrate was allowed to precipitate
for 15 min at 4 C, followed by centrifuging at
7000g for 10 min (Hettich zentrifugen, Berlin, Germany).
The oligopeptide content in the supernatant
was determined by the Lowry assay (Lowry, Rosebrough,
Fan, & Randall, 1951), using tyrosine as a standard.
Activity was expressed as tyrosine equivalents in
TCA-supernatant. One unit of activity was defined as
that releasing 1 mmole of tyrosine per min (mmol/Tyr/
min). A blank was run in the same manner, except that
enzyme was added after addition of 50% TCA (w/v).

Kết quả (Việt) 2:

Đồng thời được chỉ định, mẫu nước mắm đã được chạy thận
so với 10 thể tích nước chưng cất ở 4 C trong
24 h để loại bỏ muối trước khi xét nghiệm hoạt động phân giải protein.
Hoạt động thủy phân protein được đo bằng cách sử dụng casein-TCA-Lowry
khảo nghiệm (Klomklao et al., 2004). Để
bắt đầu phản ứng, 200 II của mẫu nước mắm chạy thận
đã được thêm vào hỗn hợp xét nghiệm có chứa 2 mg casein,
200 ll nước cất và 625 II của phản ứng đệm (0,1 M glycine-NaOH, pH 9.0). Các phản ứng enzyme
đã được tiến hành ở 55 C trong 15 phút và kết thúc bằng
việc thêm 200 ll 50% (w / v) trichloroacetic acid (TCA).
Unhydrolysed protein chất nền đã được cho phép để kết tủa
trong 15 phút ở 4 C, tiếp theo bằng cách ly tâm tại
7000g trong 10 phút (Hettich zentrifugen, Berlin, Đức).
Nội dung oligopeptide trong nổi
được xác định bằng xét nghiệm Lowry (Lowry, Rosebrough,
Quạt, & Randall, 1951), sử dụng tyrosine như một tiêu chuẩn.
Hoạt động được thể hiện như là tương đương tyrosine trong
TCA-nổi. Một đơn vị hoạt động đã được định nghĩa như
là phát hành 1 mmole của tyrosine mỗi phút (mmol / Tyr /
phút). Một trống đã chạy theo cách tương tự, ngoại trừ
enzyme đã được thêm vào sau khi bổ sung thêm 50% TCA (w / v).