The KBV and bee IPC real-time PCR a

The KBV and bee IPC real-time PCR assays
were used to quantify KBV virus load in positive
UK samples using a relative standard curve
method (User Bulletin 2, Applied Biosystems). For
this method, standard dilutions were prepared from
RNA extracted from a purified KBV preparation
(KBV 14) and from bees collected from the CSL
apiary. Each standard was diluted through five levels
of a two-fold dilution series. The standard dilutions
were tested alongside the UK KBV positive
RNA samples, and for comparison, alongside RNA
extracted from Australian bees known to be naturally
infected with high levels of KBV or covertly
infected (Dennis Anderson personal communication).
Standard curves were constructed for KBV
and bee IPC by plotting the log of each standard
dilution verses the TaqMan
Ct value (threshold cycle
at which the first PCR products were detected).

Kết quả (Việt) 1:

KBV và ong IPC thời gian thực PCR thíđã được sử dụng để định lượng KBV virus tải trong tích cựcUK mẫu bằng cách sử dụng một đường cong tiêu chuẩn tương đốiphương pháp (người dùng bản tin 2, Biosystems áp dụng). Chophương pháp này, tiêu chuẩn dilutions đã được chuẩn bị từRNA được chiết xuất từ một sự chuẩn bị tinh khiết KBV(KBV 14) và từ ong thu thập từ CSLapiary. Mỗi tiêu chuẩn được pha loãng thông qua năm cấp độmột loạt các pha loãng hai lần. Dilutions tiêu chuẩnđã được thử nghiệm cùng với KBV UK tích cựcRNA mẫu, và để so sánh, cùng với RNAchiết xuất từ Úc ong được biết đến là tự nhiênbị nhiễm bệnh với mức độ cao của KBV hoặc tênbị nhiễm (Dennis Anderson cá nhân thông tin liên lạc).Tiêu chuẩn đường cong đã được xây dựng cho KBVvà ong IPC do âm mưu Nhật ký của mỗi tiêu chuẩncâu thơ pha loãng giá trị TaqMan Ct (ngưỡng chu kỳlúc đó các sản phẩm đầu tiên của Đảng Cộng sản Romania đã được phát hiện).

Kết quả (Việt) 2:

Các KBV và ong IPC thời gian thực nghiệm PCR
được sử dụng để xác định số lượng vi rút KBV tải trong dương
mẫu Anh bằng cách sử dụng một đường cong chuẩn tương đối
phương (User Bulletin 2, Applied Biosystems). Đối với
phương pháp này, pha loãng tiêu chuẩn đã được chuẩn bị từ
RNA được chiết xuất từ một sự chuẩn bị KBV tinh khiết
(KBV 14) và từ ong thu thập được từ các CSL
nuôi ong. Mỗi tiêu chuẩn được pha loãng thông qua năm cấp độ
của một loạt pha loãng hai lần. Các pha loãng tiêu chuẩn
đã được thử nghiệm cùng với Anh KBV dương
mẫu RNA, và để so sánh, cùng với RNA
chiết xuất từ ong Úc biết đến là tự nhiên
bị nhiễm với mức độ cao của KBV hoặc ngấm ngầm
nhiễm (Dennis Anderson thông tin cá nhân).
Đường cong chuẩn đã được xây dựng cho KBV
và ong IPC bằng cách vẽ các bản ghi của mỗi tiêu chuẩn
pha loãng câu các TaqMan? Giá trị Ct (chu kỳ ngưỡng
mà tại đó các sản phẩm PCR lần đầu tiên được phát hiện).