Affinity chromatography is one of t

Affinity chromatography is one of the most diverse and powerful chromatographic methods for purification of a specific molecule or a group of molecules from complex mixtures. It is based on highly specific biological interactions between two molecules, such as interactions between enzyme and substrate, receptor and ligand, or antibody and antigen. These interactions, which are typically reversible, are used for purification by placing one of the interacting molecules, referred to as affinity ligand, onto a solid matrix to create a stationary phase while the target molecule is in the mobile phase. Successful affinity purification requires a certain degree of knowledge and understanding of the nature of interactions between the target molecule and the ligand to help determine the selection of an appropriate affinity ligand and purification procedure. With the growing popularity of affinity purification, many of the commonly used ligands coupled to affinity matrices are now commercially available and are ready to use. However, in some cases new affinity chromatographic material may need to be developed by coupling the ligand onto the matrix such that the ligand retains specific binding affinity for the molecule of interest. In this chapter, we discuss factors which are important to consider when selecting the ligand, proper attachment chemistry, and the matrix. In recent years, matrices with unique features which overcome some of the limitations of more traditional materials have been developed and these are also described. Affinity purification can provide significant time savings and several hundred-fold or higher purification, but the success depends on the method used. Thus, it is important to optimize the purification protocol to achieve efficient capture and maximum recovery of the target.

Kết quả (Việt) 1:

Sắc kí ái lực là một trong những đa dạng nhất và mạnh mẽ chromatographic phương pháp khô của một phân tử cụ thể hoặc một nhóm các phân tử từ hỗn hợp phức tạp. Nó được dựa trên đánh giá cao cụ thể sinh học tương tác giữa hai phân tử, chẳng hạn như các tương tác giữa các enzyme và chất nền, thụ và phối tử, hoặc kháng thể và kháng nguyên. Những tương tác, mà là thuận nghịch thường, sử dụng làm sạch bằng cách đặt một trong các phân tử tương tác, được gọi là phối tử mối quan hệ, lên một ma trận vững chắc để tạo ra một giai đoạn văn phòng phẩm trong khi các phân tử mục tiêu là trong giai đoạn di động. Thanh lọc mối quan hệ thành công đòi hỏi một mức độ nhất định của kiến thức và sự hiểu biết về bản chất của sự tương tác giữa các phân tử mục tiêu và phối tử để giúp xác định sự lựa chọn của một mối quan hệ thích hợp phối tử bị lọc nước và thủ tục. Với sự phổ biến ngày càng tăng của ái lực làm sạch, nhiều người trong số các ligand thường được sử dụng cùng với ma trận ái lực đang thương mại có sẵn và sẵn sàng để sử dụng. Tuy nhiên, trong một số trường hợp mối quan hệ mới chromatographic vật liệu có thể cần phải được phát triển bởi khớp nối phối tử vào ma trận như vậy mà phối tử vẫn giữ mối quan hệ ràng buộc cụ thể cho các phân tử của lãi suất. Trong chương này, chúng tôi thảo luận về các yếu tố mà rất quan trọng để xem xét khi lựa chọn phối tử, hóa học thích hợp tập tin đính kèm, và ma trận. Những năm gần đây, các ma trận với tính năng độc đáo mà vượt qua một số hạn chế của vật liệu truyền thống đã được phát triển và đây cũng được mô tả. Ái lực làm sạch có thể cung cấp tiết kiệm đáng kể thời gian và một số hundred-fold hoặc cao hơn làm sạch, nhưng sự thành công phụ thuộc vào phương pháp được sử dụng. Vì vậy, nó là quan trọng để tối ưu hóa giao thức thanh lọc để đạt được hiệu quả chụp và phục hồi tối đa của mục tiêu.

Kết quả (Việt) 2:

Sắc ký ái lực là một trong những phương pháp sắc ký đa dạng và mạnh mẽ nhất để thanh lọc của một phân tử hoặc một nhóm các phân tử từ hỗn hợp phức tạp cụ thể. Nó được dựa trên các tương tác sinh học rất cụ thể giữa hai phân tử, chẳng hạn như sự tương tác giữa enzyme và chất nền, thụ thể và phối tử, hoặc kháng thể và kháng nguyên. Những tương tác này, mà thường đảo ngược, được sử dụng trong lọc bằng cách đặt một trong các phân tử tương tác, được gọi ligand như mối quan hệ, vào một ma trận vững chắc để tạo ra một pha tĩnh trong khi các phân tử mục tiêu là trong pha động. Tịnh duyên thành công đòi hỏi một mức độ nhất định kiến ​​thức và sự hiểu biết về bản chất của sự tương tác giữa các phân tử mục tiêu và các ligand để giúp xác định các lựa chọn của một mối quan hệ phối tử và thanh lọc thủ tục thích hợp. Với sự phổ biến ngày càng tăng của thanh lọc mối quan hệ, nhiều người trong số các phối tử thường được sử dụng cùng với các ma trận ái lực với doanh nghiệp thương mại có sẵn và sẵn sàng để sử dụng. Tuy nhiên, trong một số trường hợp mới mối quan hệ vật chất sắc ký có thể cần phải được phát triển bằng cách kết hợp các ligand vào ma trận như vậy mà các ligand giữ mối quan hệ ràng buộc cụ thể cho các phân tử quan tâm. Trong chương này, chúng ta thảo luận về yếu tố rất quan trọng để xem xét khi lựa chọn các ligand, hóa tập tin đính kèm thích hợp, và các ma trận. Trong những năm gần đây, các ma trận với các tính năng độc đáo mà khắc phục một số hạn chế của vật liệu truyền thống đã được phát triển và đây cũng được mô tả. Lọc Affinity có thể tiết kiệm thời gian đáng kể và một số thanh lọc trăm lần hoặc cao hơn, nhưng sự thành công phụ thuộc vào phương pháp sử dụng. Vì vậy, điều quan trọng là để tối ưu hóa các giao thức lọc để đạt được hiệu quả chụp và thu hồi tối đa của mục tiêu.