2.4. Determination of the trypsin-i

2.4. Determination of the trypsin-inhibitor activity
The trypsin-inhibitor activity of ovomucoid was quantified
indirectly by trypsin-activity (TA in BA U/mg) measurement of
an ovomucoid-trypsin mixture: for example, if the inhibitor
capacity decreased due to ovomucoid denaturation, a higher trypsin
activity of the ovomucoid-trypsin mixture was observed. In
this work, a decrease in inhibitor capacity of ovomucoid will be
termed ‘ovomuocoid inactivation’. The trypsin-inhibitor activity
of each ovomucoid system was determined using an optimized
spectrophotomethric assay as described by Grauwet et al.
(2010b). This assay is based on the action of (partially inhibited)
trypsin on a Na-Benzoyl–Arginine–Ethyl–Ester substrate (BAEE)
(trypsin quality control test of Sigma, Germany). Trypsin cleaves
the ester bond releasing Na-benzyol-L-arginine units (BA in U/
mg), which absorbs light at 253 nm (trypsin quality control test
of Sigma, Germany). This results in an increase in absorbance at
253 nm (DA253 nm), which was recorded during 3 min at 25 C.
The slope DA253 nm/min of the linear section of this curve was a
measure for the trypsin activity; a lower slope value corresponds
to a higher inhibitor capacity (Van der Plancken et al., 2004).
Based on the ratio of the trypsin activity of trypsin-ovomucoid
mixtures and the trypsin activity of trypsin, the trypsin-inhibitor
activity (TIA, %) and the residual trypsin-inhibitor activity (resTIA,
%) could be calculated (Van der Plancken et al., 2004; Grauwet
et al., 2010b). The detection limit for the residual trypsin-inhibitor
activity response was 6%. All samples were measured twice.
Averaged resTIA-values were interpreted. The absolute experimental
error was 2%.

Kết quả (Việt) 1:

2.4. xác định các chất ức chế trypsin hoạt độngHoạt động ức chế trypsin của ovomucoid được định lượnggián tiếp bằng cách đo lường hoạt động trypsin (TA trong BA U/mg)một hỗn hợp ovomucoid-trypsin: ví dụ, nếu chất ức chếcông suất giảm do ovomucoid denaturation, trypsin caohoạt động của ovomucoid trypsin hỗn hợp được quan sát thấy. Ởcông việc này, một sự giảm xuống trong chất ức chế khả năng của ovomucoid sẽgọi là 'ovomuocoid ngừng hoạt động'. Hoạt động ức chế trypsincủa mỗi ovomucoid hệ thống đã được xác định bằng cách sử dụng một tối ưu hóaspectrophotomethric khảo nghiệm như được mô tả bởi Grauwet et al.(2010b). khảo nghiệm này dựa trên các hành động của (một phần inhibited)trypsin trên một bề mặt Na-Benzoyl-Arginine-Ethyl-Ester (BAEE)(trypsin kiểm soát chất lượng kiểm tra Sigma, Đức). Trypsin cleavesester trái phiếu phát hành Na-benzyol-L-arginine đơn vị (BA trong U /mg), mà hấp thụ ánh sáng tại 253 nm (trypsin kiểm soát chất lượng kiểm traSigma, Đức). Điều này dẫn đến sự gia tăng hấp thu tại253 nm (DA253 nm), được ghi lại trong thời gian 3 phút tại 25 C.Độ dốc DA253 nm/min của phần tuyến tính của đường cong này mộtCác biện pháp đối với các hoạt động của trypsin; một giá trị thấp hơn độ dốc tương ứngmột năng lực ức chế cao (Van der Plancken et al, 2004).Dựa trên tỷ lệ của hoạt động của trypsin của trypsin-ovomucoidhỗn hợp và hoạt động của trypsin của trypsin, chất ức chế trypsinhoạt động (TIA, %) và hoạt động của dư chất ức chế trypsin (resTIA,%) có thể là tính toán (Van der Plancken et al., năm 2004; Grauwetet al., 2010b). Giới hạn phát hiện cho trypsin dư ức chếhoạt động phản ứng là 6%. Tất cả các mẫu được đo hai lần.Giá trị resTIA trung bình đã được giải thích. Tuyệt đối thử nghiệmlỗi là 2%.

Kết quả (Việt) 2:

2.4. Xác định hoạt tính của trypsin-chất ức chế
các hoạt động của trypsin-chất ức chế ovomucoid được định lượng
gián tiếp bằng trypsin-hoạt động (TA trong BA U / mg) đo lường của
một hỗn hợp ovomucoid-trypsin: ví dụ, nếu các chất ức chế
khả năng giảm do biến tính ovomucoid, một trypsin cao
hoạt động của hỗn hợp ovomucoid-trypsin đã được quan sát. Trong
tác phẩm này, làm giảm khả năng ức chế của ovomucoid sẽ được
gọi là 'bất hoạt ovomuocoid'. Các hoạt động của trypsin-chất ức chế
của từng hệ thống ovomucoid được xác định bằng một tối ưu hóa
khảo nghiệm spectrophotomethric như mô tả của Grauwet et al.
(2010b). Xét nghiệm này được dựa trên các hành động của (một phần ức chế)
trypsin trên một chất nền Na-Benzoyl-Arginine-Ethyl-Ester (BAEE)
(trypsin kiểm tra kiểm soát chất lượng của Sigma, Đức). Phân cắt Trypsin
các liên kết este phóng Na-benzyol-L-arginine đơn vị (BA U /
mg), mà hấp thụ ánh sáng ở 253 nm (trypsin kiểm tra kiểm soát chất lượng
của Sigma, Đức). Điều này dẫn đến sự gia tăng hấp thụ ở
253 nm (DA253 nm), được ghi nhận trong thời gian 3 phút ở 25 C?.
Độ dốc DA253 nm / phút của phần tuyến tính của đường cong này là một
thước đo cho sự hoạt động của trypsin; một giá trị độ dốc thấp hơn tương ứng
với một năng lực chất ức chế cao hơn (Van der Plancken et al., 2004).
Dựa trên tỷ lệ của các hoạt động trypsin của trypsin-ovomucoid
hỗn hợp và hoạt tính của trypsin của trypsin, trypsin-chất ức chế
hoạt động (TIA,% ) và các hoạt động trypsin inhibitor-dư (resTIA,
%) có thể được tính toán (Van der Plancken et al, 2004;. Grauwet
. et al, 2010b). Giới hạn phát hiện cho trypsin inhibitor-dư
phản ứng hoạt động là 6%. Tất cả các mẫu được đo hai lần.
Trung bình của người resTIA-giá trị đã được giải thích. Các thí nghiệm tuyệt
lỗi là 2%.