Sritunyalucksana, K. 2001. Characte

Sritunyalucksana, K. 2001. Characterisation of Some Immune Genes in the Black Tiger Shrimp,

Penaeus monodon. Acta Universitatis Upsaliensis. Comprehensive Summaries of Uppsala

Dissertations from the Faculty of Science and Technology 645, 45 pp. Uppsala. ISBN 91-554-

5087-3.

The molecular mechanisms of the immune system in shrimp, Penaeus monodon, are

completely unknown, despite its economic importance as an aquaculture species, especially in

Asia and Latin America. The genes and their gene products involved in the prophenoloxidase

activating system, which is considered to be a non-self recognition and defence system in many

invertebrates, have been isolated and characterised in shrimp. These include a zymogen of this

cascade, prophenoloxidase (proPO); a cell adhesion protein, peroxinectin and a pattern

recognition protein, β-1,3-glucan binding protein (GBP). All proteins are synthesised in shrimp

hemocytes, not in the hepatopancreas. The shrimp proPO cDNA clone has 3,002 bp and contains

an open reading frame of 2,121 bp encoding a putative polypeptide of 688 amino acids, with a

molecular mass of 78.7 kDa. Comparison of amino acids sequences showed that this shrimp

proPO was more closely to that of another crustacean, the freshwater crayfish, Pacifastacus

leniusculus, than to insect proPOs.

Upon activation of the proPO system in shrimp, a cell adhesion activity in the hemolymph

is generated. Inhibition of adhesion by an antiserum against the crayfish cell adhesion protein,

peroxinectin, revealed that the cell adhesion activity detected in shrimp hemolymph might result

from a peroxinectin in shrimp. Indeed, a cDNA clone which encoded shrimp peroxinectin was

isolated with an open reading frame of 2,337 bp encoding a putative protein of 778 amino acids

including a signal peptide. Two putative integrin-binding motifs (RGD and KGD) are present

suggesting that integrin is involved in the adhesion activity. The peroxinectin transcript was

slightly reduced in shrimp injected with a β-1,3-glucan or laminarin.

Also found in shrimp hemolymph was a 31 kDa-GBP that could bind to β-1,3-glucan

polymers such as curdlan and zymosan, but not to LPS. The cDNA sequence of shrimp GBP

showed high similarity to that of crayfish LGBP, other insect recognition proteins as well as

bacterial and sea urchin glucanases. Shrimp injected with an insoluble β-1,3-glucan, curdlan or

heat-killled Vibrio harveyi did not show any significant changes in relevant mRNA levels.

An attempt to knock out the LGBP expression by its exogeneous dsRNA was done in a

proliferating blood cell culture from the hematopoietic tissue of crayfish. We found that the

expression of endogeneous LGBP mRNA could be substantially inhibited by incubation of

dsRNA-LGBP in the cell culture. The effect is quick, specific, and also affects the cell

behaviours.

Kết quả (Việt) 1:

Sritunyalucksana, K. năm 2001. Characterisation của một số gen miễn dịch ở tôm sú,Chi tôm he sú. Acta Universitatis Upsaliensis. Bản tóm lược toàn diện của UppsalaLuận văn khoa khoa học và công nghệ 645, 45 trang Uppsala. ISBN 91-554 -5087-3.Các cơ chế phân tử của hệ miễn dịch, tôm, Penaeus sú,hoàn toàn không rõ, mặc dù của nó tầm quan trọng kinh tế như một loài nuôi trồng thủy sản, đặc biệt là trongChâu á và Mỹ Latinh. Các gen và sản phẩm gen của họ tham gia vào prophenoloxidasekích hoạt hệ thống, được coi là các hệ thống công nhận và bảo vệ một-tự trong nhiềuxương sống, đã được cô lập và đặc trưng trong tôm. Chúng bao gồm một zymogen nàyCascade, prophenoloxidase (proPO); một tế bào bám dính protein, peroxinectin và một mô hìnhcông nhận protein, β-1,3-glucan ràng buộc protein (GBP). Tất cả protein được tổng hợp trong tômhemocytes, không có trong các hepatopancreas. Bản sao cDNA proPO tôm có 3.002 bp và chứamột khung đọc mở của 2,121 bp mã hóa một polypeptide giả định của axit amin 688, với mộtkhối lượng phân tử của 78.7 kDa. So sánh các trình tự axit amin đã chỉ ra rằng tôm nàyproPO là chặt chẽ hơn với một crustacean, tôm nước ngọt, Pacifastacusleniusculus, hơn đến côn trùng proPOs.Sau khi kích hoạt của hệ thống proPO ở tôm, một hoạt động bám dính tế bào trong hemolymphđược tạo ra. Ức chế độ bám dính của một antiserum chống lại chất đạm bám dính tế bào của tôm,peroxinectin, tiết lộ rằng hoạt động bám dính tế bào phát hiện trong tôm hemolymph có thể dẫn đếntừ một peroxinectin ở tôm. Thật vậy, một bản sao cDNA mã hóa tôm peroxinectin làbị cô lập với một khung đọc mở của 2,337 bp mã hóa một protein giả định của axit amin 778bao gồm một peptide tín hiệu. Integrin-ràng buộc motif hai giả định (RGD và KGD) có mặtgợi ý rằng integrin là tham gia vào các hoạt động bám dính. Bảng điểm peroxinectin làhơi giảm trong tôm tiêm với một β-1,3-glucan hoặc laminarin.Cũng được tìm thấy ở tôm hemolymph là một kDa 31-GBP mà có thể liên kết với β-1,3-glucanpolyme chẳng hạn như curdlan và zymosan, nhưng không phải để LPS. Dãy cDNA tôm GBPcho thấy cao tương tự của tôm LGBP, protein khác nhận dạng côn trùng cũng nhưvi khuẩn và urchin biển glucanases. Tôm tiêm với một không hòa tan β-1,3-glucan, curdlan hoặcnhiệt-killled Vibrio harveyi đã không hiển thị bất kỳ thay đổi đáng kể trong có liên quan mRNA cấp.Một cố gắng để knock out biểu hiện LGBP bởi dsRNA exogeneous của nó đã được thực hiện mộtphổ biến văn hóa tế bào máu từ các tế bào tạo máu của tôm. Chúng tôi thấy rằng cácbiểu hiện của endogeneous LGBP mRNA có thể được đáng kể ức chế bởi ấp trứng củadsRNA-LGBP trong các nền văn hóa tế bào. Hiệu quả là nhanh chóng, cụ thể, và cũng có thể ảnh hưởng đến các tế bàohành vi.

Kết quả (Việt) 2:

Sritunyalucksana, K. 2001. Một số tính chất của gen miễn dịch ở tôm sú, Penaeus monodon. Acta Universitatis Upsaliensis. Tóm tắt toàn diện của Uppsala luận văn của Khoa Khoa học và Công nghệ 645, 45 pp. Uppsala. ISBN 91-554- 5087-3. Các cơ chế phân tử của hệ thống miễn dịch ở tôm Penaeus monodon, là hoàn toàn không biết, mặc dù tầm quan trọng kinh tế của nó như là một loài nuôi trồng thủy sản, đặc biệt là ở châu Á và châu Mỹ Latin. Các gen và các sản phẩm gen của họ tham gia vào các prophenoloxidase hệ thống kích hoạt, được coi là một sự công nhận không tự và hệ thống phòng thủ ở nhiều loài không xương sống, đã được phân lập và đặc trưng ở tôm. Chúng bao gồm một zymogen này cascade, prophenoloxidase (proPO); một protein kết dính tế bào, peroxinectin và một mẫu protein công nhận, beta-1,3-glucan protein ràng buộc (GBP). Tất cả các protein được tổng hợp trong sản phẩm tôm hemocytes, không phải trong gan tụy. Tôm proPO cDNA bản sao có 3,002 bp và chứa một khung đọc mở của 2.121 bp mã hóa một polypeptide giả định của 688 axit amin, với một khối lượng phân tử là 78,7 kDa. So sánh các axit chuỗi amino cho thấy tôm này proPO đã chặt chẽ hơn để mà của một loài giáp xác, tôm càng nước ngọt, Pacifastacus leniusculus, hơn Propos côn trùng. Sau khi kích hoạt của hệ thống proPO ở tôm, một hoạt động kết dính tế bào trong Hemolymph được tạo ra. Sự ức chế sự bám dính của một kháng huyết thanh chống lại các protein kết dính tế bào tôm càng, peroxinectin, tiết lộ rằng các hoạt động kết dính tế bào phát hiện trong Hemolymph tôm có thể kết quả từ một peroxinectin trong tôm. Thật vậy, một bản sao cDNA mã hóa mà peroxinectin tôm đã bị cô lập với một khung đọc mở của 2.337 bp mã hóa một protein giả định của 778 axit amin trong đó có một peptide tín hiệu. Hai họa tiết integrin-binding protein (RGD và KGD) có mặt gợi integrin được tham gia vào các hoạt động bám dính. Bảng điểm peroxinectin đã giảm nhẹ trong tôm tiêm một β-1,3-glucan hoặc laminarin. Cũng được tìm thấy trong Hemolymph tôm là 31 kDa-GBP có thể gắn kết với beta-1,3-glucan polyme như curdlan và zymosan, nhưng không phải với LPS. Trình tự cDNA của GBP tôm cho thấy sự tương đồng cao với của tôm càng LGBP, protein công nhận côn trùng khác cũng như glucanases nhím khuẩn và biển. Tôm bị tiêm một loại β-1,3-glucan, curdlan hoặc không hòa tan nhiệt killled Vibrio harveyi không cho thấy bất kỳ thay đổi đáng kể nồng độ mRNA có liên quan. Một nỗ lực để loại bỏ những biểu hiện LGBP bởi exogeneous RNA mạch kép của nó đã được thực hiện trong một tế bào máu phát triển hạt nhân văn hóa từ các mô tạo máu của tôm càng. Chúng tôi thấy rằng các biểu hiện của endogeneous LGBP mRNA có thể bị ức chế đáng kể bằng cách ủ của dsRNA-LGBP trong nuôi cấy tế bào. Hiệu quả là nhanh chóng, cụ thể, và cũng ảnh hưởng đến các tế bào vi.