Nguyên tắc
catalase
2 H2O2 ⎯⎯⎯⎯ → O2 2 H2O?
Sự biến mất của hydrogen peroxide (H2O2) được đo spectrophotometrically ở 240 nm.
De fi định nghĩa của đơn vị
Một đơn vị (U) là định nghĩa là lượng enzyme phân hủy 1 mmol H2O2 mỗi phút ở 25 ° C và pH 7.0
theo các điều kiện được mô tả dưới đây.
thuốc thử
A. Đệm Phosphate, 50 mM; pH 7.0: hỗn hợp dung dịch 50 mM Na2HPO4 và 50 giải pháp mM KH2PO4 để làm cho độ pH 7.0
giải pháp.
B. Hydrogen peroxide (H2O2) giải pháp: tăng thêm khoảng 0,75 ml 30% H2O2 đến 100 ml đệm phosphate (thuốc thử A).
(Chuẩn bị tươi trước khi đo và bảo quản ở nhiệt độ 4 ° C)
Đo độ hấp thụ của hỗn hợp (2.0 ml đệm phosphate (thuốc thử A) và 1,0 ml dung dịch H2O2) tại
240 nm trong con đường của ánh sáng 1 cm so với đệm phosphate (thuốc thử A) và kiểm tra độ hấp thụ của 0,85 (? 0,02).
Nếu không bổ sung thêm 30% H2O2 hoặc đệm phosphate (thuốc thử A) vào dung dịch H2O2 và lặp lại việc kiểm tra tương tự.
Mẫu: hòa tan men đông khô với nồng độ 5,0 mg / ml trong nước đá lạnh đệm phosphate (thuốc thử A)
và pha loãng thành một hoạt động khối lượng 0,3-0,6 U / ml với Ice lạnh đệm phosphate (thuốc thử A) ngay lập tức trước khi
đo.
đang được dịch, vui lòng đợi..