AbstractReverse transcription loop-

Abstract
Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) assay is a novel method of gene amplification that amplifies nucleic acid with high specificity, sensitivity and rapidity, which can be applied for disease diagnosis in shrimp aquaculture. The method is performed under isothermal conditions with a set of four specially designed primers that recognize six distinct sequences of the target. In this study, using the RT-LAMP method, a protocol for detecting Taura syndrome virus which is a causative agent of Penaeus vannamei was developed. Time and temperature conditions for detection of TSV were optimized for 60 min at 63 ◦C. The nucleic acids of other shrimp pathogens (yellow head virus; YHV and white spot syndrome; WSSV) were not amplified by this RT-LAMP system. The detection of TSV using RT-LAMP was 10 times more sensitive than the RT-PCR but less sensitive than nested RT-PCR. However this system was more convenient, rapid, and does not require sophisticated PCR machine.
© 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Keywords: Taura syndrome virus (TSV); Penaeus vannamei; Shrimp; Loop-mediated isothermal amplification; LAMP; RT-LAMP; RT-PCR

Kết quả (Việt) 1:

Tóm tắtPhiên mã ngược vòng qua trung gian khuếch đại cách nhiệt (RT-đèn) khảo nghiệm là một phương pháp mới lạ của khuếch đại gen khuếch đại axit nucleic với cao đặc trưng, nhạy cảm và nhanh chóng, mà có thể được áp dụng cho chẩn đoán bệnh ở tôm nuôi trồng thủy sản. Phương pháp này được thực hiện theo các điều kiện cách nhiệt với một tập hợp của bốn lớp lót thiết kế đặc biệt nhận ra sáu chuỗi khác biệt của các mục tiêu. Trong nghiên cứu này, bằng cách sử dụng phương pháp RT-đèn, một giao thức để phát hiện vi rút chứng Taura là một tác nhân gây bệnh của Penaeus vannamei được phát triển. Điều kiện thời gian và nhiệt độ cho phát hiện của TSV đã được tối ưu hóa cho 60 phút tại 63 ◦C. Các axit nucleic của các tác nhân gây bệnh tôm (vi rút đầu màu vàng; Hội chứng tại chỗ YHV và trắng; WSSV) không được khuếch đại bởi hệ thống đèn RT này. Những phát hiện của TSV sử dụng RT-đèn là nhạy cảm gấp 10 lần so với RT-PCR nhưng ít nhạy cảm hơn lồng RT-PCR. Tuy nhiên hệ thống này là thuận tiện hơn, nhanh chóng, và không yêu cầu tinh vi máy PCR.© 2007 Elsevier B.V Tất cả các quyền.Từ khóa: Taura hội chứng virus (TSV); Penaeus vannamei; Tôm; Trung gian Loop khuếch đại cách nhiệt; ĐÈN; RT-ĐÈN; RT-PCR

Kết quả (Việt) 2:

Tóm tắt
Xếp phiên mã loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) khảo nghiệm là một phương pháp mới trong khuếch đại gen khuếch đại acid nucleic có độ đặc hiệu cao, độ nhạy và nhanh chóng, có thể được áp dụng để chẩn đoán bệnh trong nuôi tôm. Phương pháp này được thực hiện trong điều kiện đẳng nhiệt với một bộ bốn mồi thiết kế đặc biệt mà nhận biết sáu chuỗi riêng biệt của mục tiêu. Trong nghiên cứu này, bằng cách sử dụng phương pháp RT-LAMP, một giao thức để phát hiện virus hội chứng Taura mà là một tác nhân gây bệnh của tôm thẻ chân trắng đã được phát triển. Thời gian và nhiệt độ điều kiện cho phát hiện của TSV đã được tối ưu hóa cho 60 phút ở 63 ◦C. Các axit nucleic của các mầm bệnh tôm khác (virus đầu vàng; YHV và trắng đốm; WSSV) đã không được khuếch đại bởi hệ thống RT-LAMP này. Các phát hiện của TSV bằng kỹ thuật RT-LAMP là nhạy cảm hơn 10 lần so với RT-PCR nhưng ít nhạy cảm hơn so với lồng RT-PCR. Tuy nhiên hệ thống này là thuận tiện hơn, nhanh chóng, và không đòi hỏi máy PCR phức tạp.
© 2007 Elsevier BV Tất cả các quyền.

Từ khóa: Taura hội chứng virus (TSV); Penaeus vannamei; Con tôm; Loop-mediated isothermal amplification; ĐÈN; RT-LAMP; RT-PCR