2. Các phương pháp
2.1 Vật
liệu sử dụng trong nghiên cứu này là tất cả các phân tích và sử dụng mà không cần tinh chế thêm. Họ đã
mua từ Merck và bao gồm K2CO3, NaOH, Na2CO3, Na2SO4 khan, HCl, methanol, n-hexane. Tất cả các
dung dịch nước đã được chuẩn bị bằng cách sử aquades. Dầu dừa thô được thu thập từ Kupang, Đông Nusa Tenggara.
2.2 thủ tục nghiệm
2.2.1 trung hòa dầu dừa thô
Một phương pháp tiêu chuẩn được sử dụng để xác định số axit của dầu dừa thô trước khi trung hòa. 50
gram dầu dừa thô được hòa tan trong 50 ml n-hexane và sau đó được đưa vào phễu tách. 30 ml 30%
(w / v), giải pháp Na2CO3 được thêm vào và ống khói tách đang dần bị lung lay. Vàng lớp đáy đục của nó nhất quán gelatinlike được tách ra, trong khi 30 ml 30% (w / v), giải pháp Na2CO3 được thêm vào lớp trên của nó. Phía trên
sau đó lớp được rửa sạch bằng nước cất cho đến khi pH trung tính. Các chất lỏng màu vàng rõ ràng thu được đã được sấy khô với
khan Na2SO4 và bốc hơi để removen-hexane. Các chỉ số axit của sản phẩm trung hòa được
xác định lại. Các sản phẩm trung hòa có thể được tiếp tục sử dụng để tổng hợp methyl este nếu chỉ số axit của nó là
dưới 1.
2.2.2 ester của dầu dừa trung tính
0.25% (w / w) K2CO3 tính toán dựa trên tổng trọng lượng của dầu được hòa tan trong 0,21 mol methanol
(trọng lượng phân tử = 32 g / mol; 6,72 g) trong 100 mL ba cổ bình được trang bị với một nhiệt kế và một
bình ngưng. 0,1 mol của dầu dừa trung tính (trọng lượng phân tử = 638 g / mol; 63,8 g) được thêm vào hỗn hợp và
sau đó làm nóng ở 55 ° C trong 3 h. Hỗn hợp được làm mát từ từ và để qua đêm trong một kênh phân cách. Các productis
lấy ra từ ống khói tách, hòa tan trong n-hexane và rửa sạch bằng nước cất nóng cho đến khi đạt
độ pH trung tính. Sản phẩm cuối cùng thu được sau đó lau khô bằng khan natri sulfat, và hơn nữa đặc trưng sử dụng
khí phổ sắc ký khối phổ (GC-MS).
2.2.3 Phân lập methyl laurat
Methyl laurat sau đó được tách ra khỏi hỗn hợp của methyl este thu được từ bước ester.
sự cô lập được thực hiện bằng cách sử dụng các kỹ thuật chưng cất giảm áp lực thường được gọi là chưng cất phân đoạn.
các phần chưng cất được lấy tại một loạt các dãy bao gồm 80-110, 110-120, 120-130, 130-140 and140-150 ° C.
Mỗi phần tiếp tục được phân tích bằng sắc ký khí. Redistillation cũng có thể được thực hiện để tăng
lượng methyl laurat. Cấu trúc của methyl laurat thu được thêm verfied bằng phân tích với IR
quang phổ, sắc ký khí và khối phổ kế. Các sắc ký khí (hoạt động ở 260 ° C, văn phòng phẩm
giai đoạn CP-FFA, và hãng H2 ở 40 ml / phút) được trang bị một máy dò ion hóa ngọn lửa (FID).
Febri Odel Nitbani et al. / Procedia Hóa học 18 (2016) 132 - 140 135
2.2.4 Thuỷ phân metyl laurat
Tổng cộng 0.01mol methyl laurat (trọng lượng phân tử = 214,3 g / mol; 2,143 g) và 0,08 mol NaOH
(trọng lượng phân tử = 40 g / mol; 3,4 g) được trộn lẫn trong một 100 mL ba cổ bình và khuấy trong 30 phút. 30 ml
nước cất sau đó được thêm vào hỗn hợp này và tiếp tục khuấy cho đến khi tất cả các chất rắn hòa tan. Sản phẩm được
lấy ra khỏi bình, đặt trong một cái phễu tách và sau đó trung hòa với 30 ml dung dịch 10% dung dịch HCl cho đến khi
vươn tay pH 1. Sản phẩm này sau đó được chiết xuất với 3 × 15 mL n-hexane. Lớp hữu cơ được rửa bằng
nước cất để có được một độ pH trung tính và khô khan với Na2SO4. Bay hơi được thực hiện để loại bỏ các còn lại
dung môi n-hexane và phần còn lại được tiếp tục phân tích bởi IR phổ và 1H NMR (Delta 2-NMR, ECA
500MHz).
2.2.5 thử nghiệm kháng khuẩn sử dụng "cũng khuếch tán" phương pháp
thử nghiệm kháng khuẩn hoạt động được tiến hành để tìm hiểu khả năng ức chế tiềm năng của axit lauric bị cô lập trên
sự phát triển của một số vi khuẩn gây bệnh bao gồm S. aureus, B. cereus, S. Thypimurium và E. coli. Khử trùng
vật liệu và các công cụ được sử dụng trong thử nghiệm hoạt động actibacterial được thực hiện trước khi thí nghiệm kháng khuẩn. Việc khử trùng được
thực hiện trong 30 phút trong một nồi hấp ở 121 ° C. Vừa gieo thạch dinh dưỡng (NA) được chuẩn bị bằng cách hòa tan 20 g
NA vào 1 lít aquades và sau đó đun nóng cho đến khi tất cả các NA hòa tan hoàn toàn. Sau đó trung bình này được resterilized trong
nồi hấp. Kiểm tra hoạt tính kháng khuẩn được thực hiện bằng cách ủ NA trung bình đã được sọc bằng một vòng lặp kiểm tra
vi khuẩn ở 37 ° C trong 24 h. Một vòng lặp của vi khuẩn đã được lưu giữ trong 24 giờ được đưa vào một ống nghiệm chứa 9 ml
vô trùng natri clorua sinh lý và đồng bộ với 0,5 MacFarland. Một miếng gạc vô trùng được tiếp tục đưa
vào một ống nghiệm, ép vào tường và trầy xước homogenously trên NA trung bình. Một rỗ với đường kính 6 mm
được lập và lưu giữ trong vài phút. 100 ml axit lauric với nồng độ 5%, 10%, 15% và 20% được
chuẩn bị và thêm vào mỗi rỗ. Thủ tục tương tự cũng được thực hiện đối với ciprofloxacin thương mại với
nồng độ 0,5% một
đang được dịch, vui lòng đợi..