5. HPLC analysisPreliminary identif

5. HPLC analysis

Preliminary identification of resveratrol was carried out using an Agilent 1200 Series HPLC (Santa Clara, CA) system. The column used was a Phenomenex Luna C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm particle size) with a guard column. The binary mobile phase consisted of solvent (A) (0.5% aqueous acetic acid) and solvent (B) (0.5% acetic acid in methanol). The flow rate of the mobile phase was 0.8 ml/min. The elution gradient started with 100% A and 0% B. A decreased to 95.3% and B increased to 4.7% in 4 min. Over the next 38 min, solvent A was decreased to 25.3% whilst solvent B was increased to 74.7%. A was decreased to 5% at 54.5 min before increasing to 100% from 55 to 65 min. The absorbance was measured by a UV–Vis diode array detector at a wavelength of 280 nm. Resveratrol in the peanut skin extracts (PSE) was initially identified by comparing the retention times and UV-spectra of the PSE samples to a t-resveratrol standard analysed under the same chromatographic conditions. The resveratrol peak was then collected 12 times to obtain a concentrated sample for further identification, using LC–MS–MS. After collection, the eluted fraction was dried under nitrogen gas and reconstituted in 100 μl of MeOH.

Kết quả (Việt) 2:

5. phân tích HPLC xác định sơ bộ của resveratrol đã được thực hiện bằng cách sử dụng một Agilent 1200 series HPLC (Santa Clara, CA) hệ thống. Các cột được sử dụng là một Phenomenex Luna C18 (250 mm x 4.6 mm, kích thước 5 micron hạt) với một cột bảo vệ. Pha động nhị phân gồm dung môi (A) (0,5% dung dịch axit axetic) và dung môi (B) (0,5% acid acetic trong methanol). Tốc độ dòng chảy của pha động là 0,8 ml / phút. Gradient rửa giải bắt đầu với 100% A và 0% B. A giảm xuống còn 95,3% và B tăng lên đến 4,7% trong 4 phút. Trong 38 phút tiếp theo, dung môi A đã giảm xuống còn 25,3% trong khi dung môi B đã tăng lên đến 74,7%. A đã giảm xuống mức 5% tại 54,5 phút trước khi tăng tới 100% 55-65 phút. Độ hấp thụ được đo bằng một UV-Vis diode array detector ở bước sóng 280 nm. Resveratrol trong chiết xuất đậu phộng da (PSE) ban đầu được xác định bằng cách so sánh thời gian lưu giữ và UV-quang phổ của các mẫu PSE để một tiêu chuẩn t-resveratrol phân tích theo các điều kiện sắc ký như nhau. Đỉnh cao resveratrol sau đó được thu thập 12 lần để có được một mẫu tập trung để xác định thêm, sử dụng LC-MS-MS. Sau khi bộ sưu tập, các phần tách rửa được sấy khô trong khí nitơ và tái tạo trên 100 ml MeOH.