Multidrug resistance (MDR) constitu

Multidrug resistance (MDR) constitutes a major obstacle for success of cancer treatment. The MDR phenotype is responsible for resistance to a wide variety of anticancer drugs, such as anthracyclines, vinca-alkaloids and others [1]. Although several mechanisms could be involved in the acquisition of this phenotype, the role of two different membrane proteins, P-glycoprotein (Pgp) and multidrug resistance associated protein (MRP), has been well established [2-4]. Both proteins are members of the same ATP-binding cassette (ABC) superfamily of transport proteins. Pgp was first identified as a consequence of its overexpression in multidrug-resistant tumour cells, where it mediates the ATP-dependent efflux of a variety of chemotherapeutic agents. In addition to its role during the acquisition of the MDR phenotype, Pgp is expressed in normal tissues, both as a consequence of differentiation and also in response to environmental challenges, and it has been proposed to play a role as a cell protector against cellular toxins [5]. In addition, a general antiapoptotic role for Pgp has been proposed [6].
It is clear that Pgp has several functions in different cells and tissues. Pgp is encoded by a multigene family in higher eukaryotes [7]. The ABCB1 gene (before MDR1) encodes the human Pgp. In cultured cells, constitutive overexpression of Pgp is mediated by changes in gene dosage or transcription. Pgp can also be transiently induced in cultured cells by a variety of stimuli, such as heat shock, UV radiation, and chemotherapeutic agents [8-11]. The regulation of Pgp expression has been mostly related to transcriptional control of the ABCB1 gene expression [8-11]. The proximal promoter
of ABCB1 contains several regulatory regions, such as an inverted CCAAT box and a GC element, both of which are required for constitutive promoter activity in several cell
lines [12-16]. It has been reported that in the colon carcinoma cell line SW620, the histone deacetylase inhibitor (iHDAC) trichostatin A (TSA), induces an increase in ABCB1 transcription through the inverted CCAAT box element, with the requirement of the NF-Y transcription factor [17]. This result can denote a big caveat, since a number of iHDACs are able to inhibit tumour growth, and several of them are used in clinical trials [18]. However, an increase in Pgp expression mediated by these inhibitors would hamper their combination with other cytotoxic agents that are substrates of Pgp. We have previously in vestigated in the human colon carcinoma cell lines SW620, HT-29 and HT-29/M6 the effect of TSA and Suberoylanilide Hydroxamic Acid (SAHA) on Pgp expression, demonstrating a translational control of Pgp expression [19]. The MDR1 mRNA produced in these cell lines is 285 bp shorter that the MDR1 mRNA produced in the human MCF-7/Adr
and K562/Adr cell lines, both of them expressing Pgp protein. The different size of the MDR1 mRNA is due to the use of alternative promoters [19]. Interestingly, the ABCB1
gene is located in a genetic locus with the nested gene RUNDC3B in the complementary DNA strand. More specifically, several RUNDC3B exons are located in the complementary strand of the ABCB1 gene that corresponds with the intronic region between exon−1andexon1ofthe
MDR1 mRNA, raising the possibility of transcriptional interference between both genes. The study presented herein has been designed to gain insight in ABCB1 regulation determining whether the translational control of Pgp functions also in pancreatic cancer cell lines, the putative regulation of ABCB1 alternative promoters by iHDACs, and whether the expression of the ABCB1 nested gene RUNDC3B interferes with the expression of the MDR1 mRNA isoforms.

Kết quả (Việt) 1:

Multidrug sức đề kháng (MDR) tạo thành một trở ngại lớn cho sự thành công của điều trị ung thư. Các kiểu hình MDR là chịu trách nhiệm về sức đề kháng với nhiều loại thuốc chống ung thư, chẳng hạn như anthracyclines, vinca-ancaloit và những người khác [1]. Mặc dù một số cơ chế có thể được tham gia vào việc mua lại của kiểu hình này, vai trò của hai khác nhau màng protein, P-glycoprotein (Pgp) và sức đề kháng multidrug liên quan đến protein (MRP), đã là cũng được thành lập [2-4]. Cả hai protein là thành viên của cùng một ràng buộc ATP cassette (ABC) siêu họ vận chuyển protein. PGP đã lần đầu tiên được xác định do hậu quả của của nó tế trong các tế bào khối u kháng dòng, nơi nó hàm efflux ATP phụ thuộc vào một loạt các chemotherapeutic đại lý. Ngoài vai trò của nó trong việc mua lại của các kiểu hình MDR, Pgp được thể hiện trong bình thường mô, cả do hậu quả của sự khác biệt, và cũng có trong các phản ứng với các thách thức về môi trường, và nó đã được đề xuất để đóng một vai trò như một di động bảo vệ chống lại độc tố di động [5]. Ngoài ra, một vai trò tổng antiapoptotic cho Pgp đã là đề xuất [6].
Nó là rõ ràng rằng Pgp có một số chức năng trong tế bào khác nhau và các mô. PGP được mã hóa bởi một gia đình multigene trong sinh vật nhân chuẩn cao [7]. Gen ABCB1 (trước khi MDR1) mã hóa Pgp của con người. Trong văn hóa tế bào, tế thì của Pgp là trung gian bởi những thay đổi liều lượng gen hoặc sao chép. PGP có thể cũng được mặt gây ra trong nuôi cấy tế bào bởi một loạt các kích thích, chẳng hạn như cú sốc nhiệt, Tia cực tím, và các đại lý chemotherapeutic [8-11]. Các quy định của Pgp biểu hiện đã được phần lớn liên quan đến việc kiểm soát transcriptional biểu hiện gen ABCB1 [8-11]. Gần promoter
của ABCB1 có một số quy định khu vực, chẳng hạn như một hộp CCAAT ngược và một yếu tố GC, cả hai đều được yêu cầu cho thành promoter hoạt động trong một số tế bào
dòng [12-16]. Nó đã được báo cáo rằng trong đại tràng ung thư biểu mô tế bào dòng SW620, histone deacetylase chất ức chế (iHDAC) trichostatin A (TSA), gây ra sự gia tăng trong ABCB1 sao chép thông qua CCAAT hộp tố bị lộn ngược, với các yêu cầu của các yếu tố phiên mã NF-Y [17]. Kết quả này có thể biểu thị một caveat lớn, kể từ khi một số iHDACs có thể ức chế khối u phát triển, và một vài người trong số họ được sử dụng trong thử nghiệm lâm sàng [18]. Tuy nhiên, sự gia tăng trong biểu hiện Pgp trung gian của các chất ức chế sẽ cản trở của họ kết hợp với các tác nhân độc tế bào có chất nền của Pgp. Chúng tôi đã từng ở vestigated trong con người đại tràng ung thư biểu mô tế bào dòng SW620, HT-29 và HT-29/M6 tác dụng của TSA và Suberoylanilide Hydroxamic axit (SAHA) trên Pgp biểu hiện, chứng minh một điều khiển tịnh của Pgp biểu hiện [19]. MRNA MDR1 sản xuất trong những dòng tế bào là 285 bp ngắn hơn MDR1 mRNA sản xuất trong con người MCF-7/Adr
và K562/Adr di động dây chuyền, cả hai người trong số họ thể hiện Pgp protein. Kích thước khác nhau của MDR1 mRNA là do việc sử dụng của thay thế quảng bá [19]. Điều thú vị, ABCB1
gen này tọa lạc trong một locus di truyền với gen RUNDC3B lồng nhau trong chuỗi ADN bổ sung. Cụ thể hơn, một số RUNDC3B exon nằm trong sợi gen ABCB1 tương ứng với khu vực intronic giữa exon−1andexon1ofthe, bổ sung
MDR1 mRNA, nâng cao khả năng của các can thiệp transcriptional giữa cả hai gen. Nghiên cứu trình bày trong tài liệu này đã được thiết kế để đạt được cái nhìn sâu sắc trong quy định ABCB1 xác định cho dù sự kiểm soát tịnh của Pgp chức năng cũng trong tuyến tụy ung thư tế bào dòng, các quy định giả định của ABCB1 thay thế quảng bá bởi iHDACs, và cho dù sự biểu hiện của ABCB1 lồng nhau gen RUNDC3B cản trở sự biểu hiện của isoforms MDR1 mRNA.

Kết quả (Việt) 2:

Kháng đa thuốc (MDR) tạo thành một trở ngại lớn cho sự thành công của điều trị ung thư. MDR kiểu hình chịu trách nhiệm về tính kháng nhiều loại thuốc chống ung thư, chẳng hạn như anthracyclines, vinca-alkaloid và những người khác [1]. Protein mặc dù một số cơ chế có thể được tham gia vào việc mua lại của kiểu hình này, vai trò của hai protein màng tế bào khác nhau, P-glycoprotein (PGP) và kháng đa thuốc liên quan (MRP), đã được thành lập [2-4]. Cả hai protein là thành viên của cùng một băng ATP-binding (ABC) siêu họ các protein vận chuyển. Pgp lần đầu tiên được xác định là một hệ quả của quá mức của nó trong tế bào khối u đa kháng thuốc, nơi trung gian cho ra ngoài này phụ thuộc ATP của một loạt các đại lý hóa trị liệu. Ngoài vai trò của nó trong việc mua lại các kiểu hình MDR, PGP được thể hiện trong các mô bình thường, cả hai như là một hệ quả của sự khác biệt và cũng để đáp ứng với những thách thức về môi trường, và nó đã được đề xuất để đóng vai trò như một người bảo vệ tế bào chống lại các độc tố tế bào [5]. Ngoài ra, vai trò antiapoptotic chung của PGP đã được đề xuất [6].
Rõ ràng là PGP có một số chức năng trong tế bào và mô khác nhau. Pgp được mã hóa bởi một gia đình multigene trong sinh vật nhân chuẩn cao hơn [7]. Gen ABCB1 (trước MDR1) mã hóa PGP con người. Trong tế bào nuôi cấy, quá mức cấu thành của PGP là qua trung gian bởi những thay đổi trong liều lượng gen hoặc sao chép. Pgp cũng có thể được gây ra thoáng qua trong tế bào nuôi cấy bởi một loạt các tác nhân kích thích, chẳng hạn như sốc nhiệt, bức xạ tia cực tím, và các đại lý hóa trị liệu [8-11]. Các quy định về biểu hiện PGP đã được chủ yếu là liên quan đến kiểm soát phiên mã của các biểu hiện gen ABCB1 [8-11]. Promoter gần
của ABCB1 có chứa một số khu vực quy định, chẳng hạn như một hộp CCAAT ngược và một phần tử GC, cả hai đều cần thiết cho hoạt động quảng bá cấu thành ở một số tế bào
dòng [12-16]. Nó đã được báo cáo rằng trong dòng tế bào ung thư ruột kết SW620, các chất ức chế histone deacetylase (iHDAC) trichostatin A (TSA), gây ra sự gia tăng ABCB1 phiên mã thông qua các yếu tố hộp CCAAT đảo ngược, với các yêu cầu của các yếu tố phiên mã NF-Y [ 17]. Kết quả này có thể biểu thị một cảnh báo lớn, kể từ khi một số iHDACs có thể ức chế sự phát triển khối u, và một số trong số họ được sử dụng trong các thử nghiệm lâm sàng [18]. Tuy nhiên, sự gia tăng biểu hiện PGP qua trung gian của các chất ức chế sẽ cản trở sự kết hợp của họ với các tác nhân gây độc tế bào khác có chất nền của PGP. Chúng ta có trước đây trong vestigated ở đại tràng ung thư dòng tế bào người SW620, HT-29 và HT-29/M6 ảnh hưởng của TSA và Suberoylanilide hydroxamic Acid (Saha) trên biểu PGP, chứng minh một điều khiển tịnh tiến của PGP biểu hiện [19]. Các MDR1 mRNA sản xuất trong các dòng tế bào là 285 bp ngắn hơn rằng MDR1 mRNA sản xuất trong MCF-7/Adr con người
và K562/Adr dòng tế bào, cả hai đều thể hiện protein PGP. Kích thước khác nhau của MDR1 mRNA là do việc sử dụng quảng bá thay thế [19]. Điều thú vị là ABCB1
gen nằm ở một locus gen với RUNDC3B gen lồng nhau trong sợi DNA bổ sung. Cụ thể hơn, một số exon RUNDC3B nằm trong sợi bổ sung của gen ABCB1 tương ứng với khu vực intronic giữa exon-1andexon1ofthe
MDR1 mRNA, nâng cao khả năng can thiệp phiên mã giữa hai gen. Nghiên cứu được trình bày trong tài liệu này đã được thiết kế để đạt được cái nhìn sâu sắc trong quy định ABCB1 xác định sự kiểm soát tịnh tiến của chức năng PGP cũng trong dòng tế bào ung thư tuyến tụy, quy định giả định của nhà tổ chức thay thế ABCB1 bởi iHDACs, và liệu sự biểu hiện của ABCB1 lồng RUNDC3B gen gây trở ngại sự biểu hiện của các đồng dạng MDR1 mRNA.