PSS kiểu gen GENE VÀ HIỆP HỘI với những tính trạng THỊT CHẤT LƯỢNG TRONG MỘT LỢN F2 DÂN 1G.O. Band, 1 * SEF Guimarães, 1P.S. Lopes, 3A.V. Pires, 1D.A. Faria, 1K. M. Silva, 2A. A. Benevenuto Júnior, 2L.AM Gomide. Vụ 1Animal Khoa học Công nghệ 2Food, UFV, vicosa, MG, Brasil, CEP: 36.571-000, 3FAESA -Campus II - Faculdade de Saúde, Rodovia Serafim Derenzi, 3115, São Pedro, Vitória, ES, CEP: 29030-001 * Tác giả Hỗ trợ tài chính:. FAPEMIG, CNPq, CAPES TÓM TẮT gen PSS là một gen lớn với các hiệu ứng nổi tiếng trong các đàn thương mại, ảnh hưởng đến những đặc điểm quan trọng trong chăn nuôi heo. Mục tiêu của việc này là để đánh giá những tác động của gen PSS trong đặc tính chất lượng thịt trong một quần thể F2 segregant, được sản xuất bởi qua outbred sử dụng lợn nái thương mại (18) và lợn bản địa của Brazil (2). Kiểu gen của gen PSS đã thu được 596 con lợn F2 bằng kỹ thuật PCR-RFLP. Đặc tính chất lượng thịt được đánh giá sau khi giết mổ. Trong số 596 loài động vật, 493 loài động vật (82,72%) có những đặc điểm NN và 103 loài động vật (17,28%) là Nn. Cả hai kiểu gen không khác nhau về độ pH 24 giờ sau khi giết mổ (5,71 so với 5,70, cho NN và Nn, tương ứng), chất béo cơ bắp nội (1,55% so với 1,65% đến NN và Nn động vật), dịu dàng quan (5551.60g / 1.2 cm so với 5506.60g / 1.2cm để NN và Nn), nhẹ (44,96 so với 45,01 để NN và Nn), góc màu (84,28 so với 83,41 để NN và Nn) và sắc độ (6,68 so với 6,73 đến NN và Nn). Tuy nhiên, động vật Nn trình bày kết quả thấp hơn (P <0,05) đối với pH 45 phút sau khi giết mổ (6,51 so với 6,41), nhỏ giọt cao hơn (3,06% so với 3,92%), nấu ăn (32.50% so với 33,29%) và tổng (34.01% so với 35,67%) tổn thất. Những kết quả này xác nhận rằng chất lượng thịt kém mang gen PSS hiện tại và rằng thậm chí trong thập phân kỳ tác dụng gen được quan sát thấy. Từ khoá: hội chứng PSS, PCR-RFLP, chất lượng thịt, lợn GIỚI THIỆU Do chọn lọc di truyền, lợn đã trở nên ngày càng tăng nhanh, thịt nạc sản xuất với một chuyển đổi thức ăn cao. Một số tác động tiêu cực của nạc, chẳng hạn như tăng tính nhạy cảm stress, dẫn đến một tình trạng kém chất lượng thịt đã được tìm thấy rất thường xuyên. Nó được biết rằng mối tương quan di truyền âm giữa chất lượng thịt và thịt lợn nạc là rất nhiều do sự PSS (Stress Porcine Syndrome) gen. PSS lợn bị ảnh hưởng tăng thân nhiệt hiện nay, khó thở, đỏ da màu tím và một phản ứng căng thẳng đáng kể, với ngừng tim. Sau khi giết mổ, những phát hiện bao gồm nhạt, mềm, exudative (PSE) thịt, và phát triển nhanh chóng của tê cứng. Một trong những hậu quả chính của thịt PSE là chất lượng kém của sản phẩm, ví dụ, sản phẩm chữa khỏi được làm từ thịt PSE có lợi ích ròng tăng thấp, do giảm khả năng giữ nước, khi so sánh với thịt bình thường. Những khiếm khuyết trong PSS động vật mẫn cảm là một gating quá nhạy cảm của Ca2 + kênh -release (receptor ryanodine - mã hóa bởi gen ryr1) của xương. Cơ lưới sarcoplasmatic, trong tình huống này, mở kênh được tạo điều kiện và đóng cửa là ức chế các phương pháp đầu tiên để phát hiện PSS lợn dễ bị là thử nghiệm thách thức halothane. Sau khi thử thách, những con lợn phát triển cứng cơ đã được phân công như PSS nhạy cảm. Tuy nhiên, thử nghiệm halothane đã không thể phát hiện lợn dị hợp tử, do đó, một thử nghiệm DNA đã được phát triển bởi Fujii et al., (1991) có trụ sở tại một so sánh chuỗi có độ dài đầy đủ thụ ryadodine cDNA từ một PSS lợn mẫn cảm và một PSS lợn bình thường. Các tác giả nhận thấy là đa hình (thay thế của một C tại nucleotide 1843 từ động vật bình thường PSS để một T trong cDNA từ một nhạy cảm PSS) mà có thể được liên quan đến sự phát triển của hội chứng. Hậu quả của sự thay thế này là một sự thay đổi trong chuỗi axit amin từ một arginine ở vị trí protein 615 trong PSS bình thường, để một cysteine ở lợn dễ bị PSS. Mục đích của việc này là phân tích kiểu gen PSS bằng PCR-RFLP trong một F2 dân số lợn segregant, được sản xuất bởi qua outbred sử dụng lợn nái thương mại và lợn bản địa của Brazil và kiểu gen sư thống kê một số đặc tính chất lượng thịt được đo sau khi động vật F2 giết mổ. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP chiết DNA: Trong cuộc điều tra này, máu được lấy từ 596 con vật F2 trong giết mổ. Những con vật này được sản xuất bởi qua outbred sử dụng lợn nái thương mại (18) và lợn bản địa của Brazil (2). Các loài động vật F2 được nuôi và giết mổ tại các trang trại chăn nuôi lợn, đặt tại Cục Thú Khoa học, Đại học Liên bang vicosa, vicosa, Minas Gerais State, Brazil. DNA được chiết xuất bởi các giao thức natri clorua. Sau khi khai thác, DNA đã được định lượng trong quang phổ (260 và 280 nm) và pha loãng trong 10 mM Tris (pH 8,0) - 1mm EDTA (pH 8.0), giải pháp để có nồng độ làm việc của 25 ng / ml và bảo quản ở 4oC. Các DNA chứng khoán cũng đã được pha loãng trong dung dịch Tris-EDTA và duy trì ở -20oC. PSS khuếch đại gen và đột biến phát hiện: các mẫu DNA từ các loài động vật F2 được khuếch đại trong một MJ Research PTC 100-96 thermocycler (MJ Research). Các chương trình khuếch đại bao gồm các bước sau đây: sự biến tính ở 94oC, nhiệt độ anneling ở 64 oC, và tính năng máy tại 72oC. Chu trình này được lặp đi lặp lại 35 lần. Phản ứng PCR gồm 1U Taq DNA polymerase, 0,2 um của mỗi dNTP sẽ, 20 mM Tris-HCl (pH 8.3), 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, sơn lót phía trước và ngược 0.2 mM mỗi (forward - 5'-TCCAGTTTGCCACAGGTCCTACCA- 3 'và ngược lại - 5'- TTCACCGGAGTGGAGTCTCTGAGT-3', O'BRIEN et al, 1993) 25 ng DNA của bộ gen, và. trong một thể tích 20μL. Sự thành công của các phản ứng PCR đã được quan sát ở 5% TRANG, nhuộm màu với nitrate bạc khi một 659 bp (cặp base) mảnh được hình dung. Các đột biến gây bệnh của hội chứng PSS (C Þ T thay thế tại nucleotide 1843) đã được phát hiện bởi tiêu hóa của đoạn 659 bp với enzyme giới hạn BsiHKA I (New England Biolabs). Sau khi tiêu hóa enzyme, kiểu gen đã được phân công như sau: lợn đồng hợp tử đối với đột biến (nn) được đặc trưng bởi các mảnh vỡ tại 358 bp, 166 bp và 135 bp. Đối với động vật bình thường (NN), nó được quan sát thấy các ban nhạc tại 524 bp và 135 bp. Hãng dị hợp tử (Nn) cho các ban nhạc đột biến được trình bày tại 524 bp, 358bp, 166 bp và 135 bp. Phân tích Thịt đặc điểm chất lượng: Trong thí nghiệm 596 con vật F2 giết thịt ở 65 Kg trọng lượng hơi được phân tích về những đặc điểm thịt sau: pH 45 phút (pH45) và pH 24 giờ sau khi giết mổ (Phú), nội mỡ cơ bắp (IMF), mất nhỏ giọt (DL), không nấu (CL), tổng số lỗ (TL), dịu dàng quan (OT), độ sáng (L), đỏ (A), vàng (B), góc màu (h) và sắc độ (c). Những phân tích này đã được tiến hành tại Phòng thí nghiệm Khoa học Thịt, tại Sở Khoa học thực phẩm tại Đại học Liên bang vicosa. Thông tin chi tiết có thể được tìm thấy tại BENEVENUTO Jr. (2001). Phân tích thống kê: Phân tích thống kê cho các hiệp hội của các kiểu gen với những đặc điểm chất lượng thịt đã được thực hiện bởi hệ thống SAS PROC GLM, theo mô hình: Yijkl = μ + Gi + Sj + Lc + eijkl đâu : Yijkl = quan sát ở động vật; μ = dân số có nghĩa Gi = kiểu gen tác động i (NN hoặc Nn) Sj = giới tính ảnh hưởng j (1 = thiến nam e 2 = nữ) Lc = hiệu ứng hàng loạt k (k = 1, 2, 3 , 4 và 5) eijkl = sai số ngẫu nhiên Sự khác biệt giữa các kiểu gen đã được thử nghiệm bởi F thử nghiệm ở mức 5%. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN F2 động vật kiểu gen: Tần số kiểu gen cho 596 F2 phân tích động vật là 493 (82,72%) đồng hợp tử bình thường (NN) và 103 (17,28%) hãng dị hợp tử (Nn). Không đồng hợp tử lặn (nn) đã được tìm thấy. Đặc tính chất lượng thịt quả: Các đặc điểm phân tích pH45, DL, CL và TL đã cho thấy sự khác biệt thống kê giữa cả hai kiểu gen (bảng 1) ở mức 5% xác suất. Các giá trị của kiểu gen NN và Nn lần lượt là: 6,51 ± 0,26 và 6,41 ± 0,26 cho pH45, 3,06 ± 1,68 và 3,92 ± 1,68 cho DL, 32.50 ± 2,54 và 33,29 ± 2,54 cho CL và 35,67 ± 2,67 và 34,01 ± 2,67 cho TL. Như kiểu gen Nn trình bày giá trị cao nhất cho DL, CL và TL, nó có thể được xác nhận rằng alen biến n có ảnh hưởng tiêu cực đến chất lượng thịt, kể từ khi động vật Nn có khả năng giữ nước tồi tệ nhất, đó là liên kết với một pH thịt thấp hơn và một mức độ cao của sự biến tính protein, và trong tình trạng này, làm tăng mất nước được quan sát thấy. Mặc dù không có động vật đồng hợp tử đã được tìm thấy, tác động của các gen trong PSS chất lượng thịt lợn đã được phát hiện, ngay cả trong dân segregant thử nghiệm này, khẳng định rằng gen này là một trong những quan trọng nhất trong chăn nuôi heo. Một điểm quan trọng cần xem xét trong việc phát triển một chiến lược cho việc sử dụng PSS đột biến trong các đàn thương mại là tác hại của nó đến chất lượng thịt, xác nhận bởi các điều tra hiện nay, đó là liên kết tiêu cực để chuyển hóa thức ăn và nạc. Phần lợi nhuận tăng được tạo ra bởi động vật nạc và tăng trưởng nhanh có thể bị mất nếu một thịt kém chất lượng được sản xuất, vì vậy quyết định như thế nào đột biến PSS sẽ được sử dụng trong một chương trình lựa chọn có liên quan đến các mục tiêu của các chương trình và các điều kiện quản lý được cung cấp cho lợn không chỉ ở các trang trại nhưng đặc biệt trong quá trình vận chuyển và giết mổ. THAM KHẢO BENEVENUTO Junior, AA, 2001. Avaliação de rendimento de carcaça e de qualidade da carne de suínos Comerciais, de raça Nativa e cruzados. Dissertação de mestrado, 93 págs., Dep. de Tecnologia de Alimentos, UFV. Fujii, J., Otsu, K., ZORZATO, F., et al., 1991. Xác định các đột biến ở các ryanodine thụ lợn kết hợp với tăng thân nhiệt ác tính. Khoa học 253: 448- 451. O'BRIEN, PT, Shen, H., Cory, CR, et al, 1993. Sử dụng một thử nghiệm DNA dựa trên cho các đột biến liên quan với hội chứng căng thẳng ở lợn (tăng thân nhiệt ác tính) trong 10.000 sinh sản. heo. JAVMA, Vol. 203, Quốc lộ 6.
đang được dịch, vui lòng đợi..