8.5.2 Operating Parameters (F, T, D

8.5.2 Operating Parameters (F, T, Dφ, tG)
Flow rate (F) does not affect isocratic retention (k) or selectivity but is an
important factor affecting both average retention (k*) and selectivity (α) in
gradient elution (Figure 2.22). Increasing column temperatures (T) generally
reduces retention in RPC and can have some effects on selectivity.∆φis the
range of percentage of the strong solvent (%B) in gradient analysis (final %B
minus initial %B) and is typically defined during initial method development.
tGis gradient time, which in conjunction with ∆φdefines the gradient slope.
Increasing tGoften increases overall resolution of complex samples. Since both
T and tGcan be continuously varied, their combined change offers an exceptional opportunity for fine-tuning separations of complex samples as shown
case studies A and C.The use of software simulation programs such as DryLab
is highly recommended for efficient gradient optimization, since the predictions on the effects of gradient factors are not always intuitive.
8.5.3 Column Parameters (Bonded Phase Type, L, dp, dc,)
Selectivity of different bonded phases is a powerful factor in method development
1, 2, 8
(Figures 3.8 and 3.15). However, since column switching is not a
continuous variable process like fine-tuning mobile phase conditions, it is often
the last step to be implemented, when mobile phase adjustments do not yield
the requisite resolution. One should pick a column with different selectivity
(orthogonal) from the original column (Figure 2.24). Traditionally, C8, cyano,
and phenyl give the most dissimilar selectivity (Figure 3.8). Recently developed polar-embedded phases are also excellent choices (Figure 3.15). As it is
difficult to predict which one column will yield the best separation of a given
mixture, the practical approach is to try different columns under the optimized
mobile phase conditions or to optimize the mobile phase for the most promising candidate column. A six-column automatic column selector can be used
to facilitate this column selection process. Column dimension (L, dp,dc) can
also be optimized to enhance efficiency, speed, or sensitivity. The use of software simulation is particularly useful to find the optimum column dimension
for a separation, as shown in the case study in Section 8.8.1.
8.5.4 Detector Setting and Sample Amount
Finally, detector setting and sample loading (sample concentration and injection volume) are finalized. The goal is to maximize sensitivity (increase signalto-noise) while maintaining method linearity and peak shapes. Sensitivity is
important for impurity methods and for trace analysis. For large-volume injections (i.e.,>20µL), the sample solvent strength should be equal to or weaker

Kết quả (Việt) 1:

8.5.2 hoạt động tham số (F, T, Dφ, đội đặc nhiệm)Tốc độ dòng chảy (F) không ảnh hưởng đến isocratic lưu giữ (k) hay chọn lọc, nhưng là mộtyếu tố quan trọng ảnh hưởng đến trung bình lưu giữ (k *) và chọn lọc (α) tronggradient elution (hình 2,22). Tăng nhiệt độ cột (T) nói chunglàm giảm lưu giữ trong RPC và có thể có một số hiệu ứng trên selectivity.∆φis cácphạm vi của các tỷ lệ phần trăm của dung môi mạnh (%B) phân tích gradient (%B cuối cùngtrừ ban đầu %B) và thường được xác định trong quá trình phát triển phương pháp ban đầu.tGis thời gian gradient, mà kết hợp tại với ∆φdefines dốc gradient.Tăng tGoften làm tăng độ phân giải tổng thể của các mẫu phức tạp. Kể từ khi cả haiT và tGcan được liên tục thay đổi, thay đổi kết hợp của họ cung cấp một cơ hội tuyệt vời cho điều chỉnh đứt các mẫu phức tạp như được hiển thịnghiên cứu trường hợp A và C.The sử dụng phần mềm mô phỏng chương trình như DryLabcao được đề nghị cho hiệu quả tối ưu hóa gradient, kể từ khi các dự đoán về những tác động của yếu tố gradient không luôn luôn trực quan.8.5.3 cột tham số (loại kho ngoại quan giai đoạn, L, dp, dc)Chọn lọc các giai đoạn khác nhau của kho ngoại quan là một yếu tố mạnh mẽ trong phương pháp phát triển1, 2, 8(Số liệu 3.8 và 3,15). Tuy nhiên, kể từ cột chuyển đổi không phải là mộtquá trình biến đổi liên tục như điều chỉnh điều kiện di động giai đoạn, nó thường làbước cuối cùng sẽ được thực hiện, khi điện thoại di động giai đoạn điều chỉnh không mang lạiđộ phân giải cần thiết. Ai nên chọn một cột với chọn lọc khác nhau(vuông góc) từ gốc cột (hình 2,24). Theo truyền thống, C8, cyano,và phênyl cho chọn lọc nhất không giống nhau (hình 3.8). Mới phát triển giai đoạn cực nhúng cũng là sự lựa chọn tuyệt vời (con số 3.15). Vì nó làrất khó để dự đoán mà một cột sẽ mang lại sự tách biệt tốt nhất của một nhất địnhhỗn hợp, phương pháp tiếp cận thực tế là cố cột khác nhau dưới các tối ưu hóađiện thoại di động giai đoạn điều kiện hoặc để tối ưu hóa giai đoạn di động cho các cột ứng cử viên hứa hẹn nhất. Một sáu-cột tự động cột chọn có thể được sử dụngđể tạo thuận lợi cho quá trình lựa chọn cột này. Kích thước cột (L, dp, dc) có thểcũng được tối ưu hóa để tăng cường hiệu quả, tốc độ, độ nhạy cảm. Sử dụng phần mềm mô phỏng là đặc biệt hữu ích để tìm kích thước cột tối ưumột tách, như thể hiện trong trường hợp nghiên cứu trong phần 8.8.1.8.5.4 thiết lập detector và số lượng mẫuCuối cùng, thiết lập máy dò và tải mẫu (mẫu tập trung và tiêm khối lượng) được hoàn thành. Mục đích là để tối đa hóa sự nhạy cảm (signalto tăng tiếng ồn) trong khi duy trì hình dạng linearity và cao điểm của phương pháp. Độ nhạy làquan trọng cho tạp chất phương pháp và phân tích dấu vết. Đối với khối lượng lớn tiêm (tức là, > 20µL), mẫu dung môi mạnh nên bằng hoặc yếu

Kết quả (Việt) 2:

8.5.2 Các thông số vận hành (F, T, Dφ, TG)
Lưu lượng (F) không ảnh hưởng đến lưu isocratic (k) hoặc chọn lọc nhưng là một
yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến cả hai giữ trung bình (k *) và chọn lọc (α) trong
rửa giải Gradient (Hình 2.22). Nhiệt độ tăng cột (T) thường
làm giảm lưu trong RPC và có thể có một số tác dụng trên selectivity.Δφis các
loạt các tỷ lệ phần trăm của dung môi mạnh (% B) trong phân tích gradient (thức% B
trừ đi ban đầu% B) và thường được xác định trong quá phát triển ban đầu phương pháp.
Hiện tGis gradient, trong đó kết hợp với Δφdefines dốc gradient.
tăng tGoften tăng độ phân giải chung của các mẫu phức tạp. Kể từ khi cả hai
T và tGcan được liên tục thay đổi, thay đổi kết hợp của họ cung cấp một cơ hội đặc biệt cho ly tinh chỉnh các mẫu phức tạp như
các nghiên cứu trường hợp A và C.The sử dụng các chương trình phần mềm mô phỏng như DryLab
được khuyến cáo để tối ưu hóa gradient hiệu quả, vì những dự đoán về tác động của các yếu tố gradient là không phải luôn luôn trực quan.
8.5.3 Cột Parameters (Bonded Loại pha, L, dp, dc,)
Tính chọn lọc của giai đoạn ngoại quan khác nhau là một yếu tố mạnh mẽ trong phát triển phương pháp
1, 2, 8
(Hình 3.8 và 3,15). Tuy nhiên, kể từ khi chuyển đổi cột không phải là một
quá trình thay đổi liên tục như điều kiện pha động tinh chỉnh, nó thường là
bước cuối cùng sẽ được thực hiện, khi điều chỉnh pha động không mang lại
độ phân giải cần thiết. Người ta phải chọn một cột có chọn lọc khác nhau
(trực giao) từ cột gốc (Hình 2.24). Theo truyền thống, C8, cyano,
và phenyl cung cấp cho chọn lọc khác nhau nhất (Hình 3.8). Giai đoạn cực nhúng phát triển gần đây cũng là sự lựa chọn tuyệt vời (Hình 3.15). Vì nó là
khó khăn để dự đoán một cột sẽ mang lại sự tách biệt nhất của một ban
hỗn hợp, các phương pháp tiếp cận thực tế là để thử các cột khác nhau dưới sự tối ưu hóa
điều kiện pha động hoặc để tối ưu hóa các pha động cho cột ứng cử viên hứa hẹn nhất. Một cột tự động chọn sáu cột có thể được sử dụng
để tạo thuận lợi cho quá trình lựa chọn cột này. Chiều Cột (L, dp, dc) có thể
cũng được tối ưu hóa để nâng cao hiệu quả, tốc độ, hoặc nhạy cảm. Việc sử dụng các phần mềm mô phỏng đặc biệt hữu ích để tìm kích thước cột tối ưu
cho một tách, như thể hiện trong nghiên cứu trường hợp tại mục 8.8.1.
8.5.4 Detector Thiết lập và Mẫu Số tiền
Cuối cùng, thiết lập phát hiện và tải mẫu (nồng độ mẫu và tiêm tích) được hoàn thành. Mục đích là để tối đa hóa độ nhạy (tăng signalto-noise) trong khi duy trì phương pháp tuyến tính và đỉnh hình dạng. Nhạy cảm là
quan trọng đối với các phương pháp tạp chất và phân tích dấu vết. Đối với thuốc tiêm với quy mô lớn (tức là> 20μL), các mẫu sức mạnh dung môi nên được bằng hoặc yếu