TOXICOLOGICAL STUDIESSingle Dose (A

TOXICOLOGICAL STUDIES
Single Dose (Acute) Toxicity

The acute oral toxicity of a grape seed extract containing 89.3% proanthocyanidins was determined using groups of 5 male and 5 female F344/DuCrj rats.22 The extract was dissolved in purified water, and the animals were dosed by gavage with 0, 2, or 4 g/kg of the extract at a rate of 10 ml/kg bw. None of the animals died, and the LD50 of the grape seed extract was >4 g/kg.
Vitis Vinifera (Grape) Seed/(Grape) Skin Extract
The acute oral toxicity of a mixed grape seed and grape skin extract containing 76% total polyphenols was determined in a litmus test using female Wistar rats.21 Three rats were given a single oral dose by gavage of 5 g/kg in saline at a rate of 10 ml/kg. Three negative control rats were dosed with saline only. There were no signs of toxicity for up to 14 days after dos- ing, and no gross lesions were observed at necropsy. The LD50 of the mixed grape seed/skin extract was >5 g/kg.
In Vitro
Anti-Oxidant Activity
Vitis Vinifera (Grape) Shoot Extract
The anti-oxidant activity of Vitis vinifera shoot extract was evaluated on normal human keratinocytes by using a fluorescent probe.23 Oxidative stress was induced in the keratinocytes by exposure to hydrogen peroxide for 24 h. Vitamins C and E were used as positive controls. Total reactive oxygen species (ROS), evaluated by measuring the fluorescence after exposure to hydrogen peroxide, were statistically significantly decreased in the cultures exposed to Vitis vinifera shoot extract, vitamin C, and vitamin E when compared to untreated control cultures; the extract produced a 39% decrease, while vitamins C and E both produced a 29% decrease.
Effect on Dermal and Epidermal Structure
Vitis Vinifera (Grape) Seed Extract
The effect of a mixture that contained grape seed extract on the epidermis and dermis was examined in vitro using a recon- structed three-dimensional skin equivalent model.24 The final test concentration of grape seed extract was 2.5 μg/ml. In the epidermis, the mixture containing grape seed extract stimulated keratinocyte proliferation, with a statistically significantly in- crease (5-fold) in Ki67-positive keratinocytes compared to untreated controls. In the dermis, the mixture stimulated fibrillin- 1 and elastin and increased the amount of collagen type 1. At the dermal-epidermal junction, laminim 5 was slightly increased.

Inhibitory Activity
Vitis Vinifera (Grape) Seed Extract
A tyrosinase inhibition assay was performed in which 10, 30, or 50 μg/ml grape seed extract containing 89.3% proanthocyan- idins (but no resveratrol or other phenolic compounds) were added to 1250 units of mushroom tyrosinase.25 The grape seed extract inhibited mushroom tyrosinase activity, and the ID50 was 35 μg/ml. (This was similar to the ID50 value for kojic acid).
The researchers also examined the effect of grape seed extract on melanogenesis using B16 mouse melanoma cells. Grape seed extract containing 42.5% proanthocyanidins was evaluated at a dose of 25 μg/ml and grape seed extract containing 54.4% proanthocyanidins was evaluated at doses of 25 and 50 μg/ml. Both grape seed extracts (which did not contain resver- atrol or other phenolic compounds) inhibited melanogenesis in cultured B16 mouse melanoma cells. These extracts did not inhibit cell growth.
Repeated Dose Toxicity
Oral
Vitis Vinifera (Grape) Seed Extract
Groups of 20 female SKH-1 hairless mice were fed a diet 0, 0.2, and 0.5% grape seed extract containing 89.3% proantho- cyanidins for 3 wks.26 No significant difference in body weights or other signs of toxicity were observed. No gross differ- ences were observed in the organs of treated and untreated mice.
Groups of 10 male and 10 female F344/DuCrj rats were fed a diet that contained 0, 0.02, 0.2, or 2% grape seed extract con- taining 89.3% proanthocyanidins for 90 days.22 There was no mortality in any of the groups, and there were no clinical signs of toxicity. A few statistically significant changes in organ weights were noted, primarily in the 0.2% group; these slight changes were not dose-dependent. No treatment-related microscopic changes were observed.
A 90-day dietary study was performed in which group of 20 male and 20 female Sprague-Dawley rats were fed a diet con- taining 0, 0.62, 1.25, or 2.50% of a grape seed extract (genus and species not stated) that was composed of approximately 90.5% total phenols.27 (The mean test article intake was 434, 860, and 1788 mg/kg bw/day for males and 540, 1052, and 2167 mg/kg bw/day for females.) All animals survived until study termination. The only notable observation was a mild head-tilt in 6 of 20 female rats in the 2.5% group; the researchers remarked that it was doubtful this observation was treat- ment-related. There was a small but statistically significant increase in feed consumption by males of the 2.5% group from day 7 until study termination; similar increases were observed for males of the 1.25% grou

Kết quả (Việt) 2:

ĐỘC HỌC
Độc Liều lượng (cấp tính) Độc tính

Các độc tính đường miệng cấp tính của chiết xuất hạt nho có chứa 89,3% proanthocyanidins được xác định bằng các nhóm 5 nam và 5 nữ F344 / DuCrj rats.22 Các chiết xuất được hòa tan trong nước tinh khiết, và các loài động vật đã được định lượng bởi bằng ống với 0, 2, hoặc 4 g / kg của các chiết xuất với tốc độ 10 ml / kg bw. Không ai trong số các động vật chết, và LD50 của chiết xuất hạt nho là> 4 g / kg.
Vitis Vinifera (nho) Seed / (nho) Skin Extract
Các độc tính đường miệng cấp tính của một da chiết xuất hạt nho hỗn hợp và nho có chứa tổng cộng 76% polyphenol đã được xác định trong một phép thử sử dụng nữ Wistar rats.21 Ba con chuột được cho uống một liều duy nhất bằng cách cho ăn bằng ống 5 g / kg trong dung dịch muối với tốc độ 10 ml / kg. Ba con chuột chứng âm được định lượng chỉ với dung dịch muối. Không có dấu hiệu ngộ độc cho đến 14 ngày sau khi dos- ing, và không có tổn thương tổng đã được quan sát thấy ở mổ tử thi. Các LD50 của hạt nho / da chiết xuất hỗn hợp là> 5 g / kg.
Trong Vitro
Chống oxy hóa Hoạt động
Vitis Vinifera (nho) Bắn Trích xuất
các hoạt động chống oxy hóa của Vitis trích Vinifera chụp được đánh giá trên tế bào sừng của con người bình thường bằng cách sử dụng một huỳnh quang probe.23 oxy hóa căng thẳng đã gây ra trong các tế bào sừng do tiếp xúc với hydrogen peroxide trong 24 h. Vitamin C và E đã được sử dụng như là chứng dương. Tổng số các loài phản ứng oxy (ROS), được đánh giá bằng cách đo huỳnh quang sau khi tiếp xúc với hydrogen peroxide, đã thống kê giảm đáng kể trong các nền văn hóa tiếp xúc với Vitis Vinifera trích chụp, vitamin C và vitamin E khi so sánh với các nền văn hóa chứng không điều trị; chiết xuất giảm 39%, trong khi các vitamin C và E cả sản xuất giảm 29%.
Tác dụng trên Dermal và biểu bì cấu
Vitis Vinifera (nho) Seed Extract
Hiệu quả của một hỗn hợp có chứa chiết xuất hạt nho trên biểu bì và hạ bì đã được kiểm tra trong ống nghiệm bằng cách sử dụng tái thiết structed ba chiều da model.24 tương đương nồng độ thử nghiệm cuối cùng của chiết xuất hạt nho là 2,5 mg / ml. Trong lớp biểu bì, hỗn hợp có chứa chiết xuất hạt nho kích thích tăng sinh keratinocyte, với nếp gấp thống kê trong- đáng kể (gấp 5 lần) trong keratinocytes Ki67 dương so với đối chứng không được điều trị. Trong lớp hạ bì, hỗn hợp kích thích fibrillin- 1 và elastin và tăng lượng collagen type 1. Tại giao lộ da-biểu bì, laminim 5 đã tăng nhẹ.

Ức chế Hoạt động
Vitis Vinifera (nho) Seed Extract
Một thử nghiệm ức chế tyrosinase đã được thực hiện trong mà 10, 30, hoặc 50 mg / ml chiết xuất hạt nho có chứa 89,3% idins proanthocyan- (nhưng không có resveratrol hoặc các hợp chất phenolic khác) đã được bổ sung cho 1250 đơn vị của nấm tyrosinase.25 các hạt nho chiết xuất ức chế hoạt động nấm tyrosinase, và ID50 là 35 microgam / ml. (Điều này cũng tương tự như giá trị ID50 cho kojic acid).
Các nhà nghiên cứu cũng kiểm tra tác dụng của chiết xuất hạt nho vào việc sử dụng các tế bào hắc tố B16 chuột melanogenesis. Chiết xuất hạt nho có chứa 42,5% proanthocyanidins được đánh giá ở một liều 25 mg / ml và hạt nho chiết xuất có chứa 54,4% proanthocyanidins được đánh giá ở liều 25 và 50 mg / ml. Cả hai chiết xuất từ hạt nho (mà không chứa atrol resver- hoặc các hợp chất phenolic khác) ức chế melanogenesis trong các tế bào khối u ác tính chuột B16 nuôi. Các chất chiết xuất không ức chế tăng trưởng tế bào.
Liều Độc tính Lặp
Oral
Extract Vitis Vinifera (nho) Seed
nhóm 20 nữ SKH-1 chuột không lông được cho ăn một chế độ ăn uống 0, 0,2, và chiết xuất từ 0,5% hạt nho có chứa 89,3% cyanidins proantho- cho 3 wks.26 Không có sự khác biệt đáng kể về trọng lượng cơ thể hoặc những dấu hiệu khác của nhiễm độc đã được quan sát. Không có tổng điểm khác biệt đã được quan sát trong các cơ quan của những con chuột được điều trị và không được điều trị.
Các nhóm 10 nam và 10 nữ F344 / DuCrj chuột được cho ăn một chế độ ăn uống có chứa 0, 0.02, 0.2, hoặc 2% chiết xuất từ hạt nho con- TaiNing 89,3% proanthocyanidins 90 days.22 không có tử vong trong bất kỳ của nhóm, và không có dấu hiệu lâm sàng của nhiễm độc. Một vài thay đổi đáng kể về mặt thống kê về khối lượng cơ quan đã được ghi nhận, chủ yếu ở nhóm 0,2%; những thay đổi nhỏ đã không được liều phụ thuộc. Không có thay đổi vi xử lý liên quan đã được quan sát.
Một nghiên cứu chế độ ăn uống 90 ngày đã được thực hiện trong đó nhóm 20 nam và 20 nữ chuột Sprague-Dawley được cho ăn một chế độ ăn uống con- TaiNing 0, 0,62, 1,25, hay 2.50% của một hạt nho trích xuất (chi và các loài không nêu) đã được bao gồm khoảng 90,5% tổng phenols.27 (Trung bình lượng bài kiểm tra là 434, 860, và 1788 mg / kg bw / ngày đối với nam và 540, 1052, và 2167 mg / kg bw / ngày đối với nữ). Tất cả các loài động vật sống sót cho đến khi chấm dứt nghiên cứu. Các quan sát đáng chú ý duy nhất là một cái đầu nghiêng nhẹ ở 6 trong số 20 con chuột nữ trong nhóm 2,5%; các nhà nghiên cứu nhận xét rằng đó là nghi ngờ quan sát này đã điều trị liên quan đến. Có sự gia tăng nhỏ nhưng đáng kể về mặt thống kê ở mức tiêu thụ thức ăn của nam giới trong nhóm 2,5% từ ngày 7 đến khi chấm dứt nghiên cứu; tăng tương tự cũng được quan sát thấy đối với con đực của Grou 1,25%