Enzyrn EnshreeroT by Microbial Cell

Enzyrn EnshreeroT by Microbial Cell Surfeits 1)41°Y 609
A



Figure 3 Procedures for fluorescent detection of proteinfligand interaction. (A) Fluorophore-coupted ligautl. (R) Fluoropluire-coupled antibody (C) Quarternary complexes generated by consecutive rounds of incubation with Irgand. primary antibody. biotinylated second antibody, and sueptavidin, R-phycoerythrin con¬jugate. (D) Labeling with steptavidin-coated magnetic Scads.
population with the ligand protein followed by incubation with fluorescence-labeled anti-epitope antibody. Cell labeling can also be achieved by apphea¬don of consecutive rounds of incubation with ligand protein, anti-cpitope antibody, biotinylated second antibody followed by incubation with strep¬tavidin, 12.phycoerythrin conjugate, All these compounds for indirect fluo¬rescent labeling are commercially available. ky using a polyclonal second antibody that is biotinylated at multiple sites in conjunction with a strepta¬vidin, If.phycocrythrin conjugate, which contains 35 or more nuorophores depending on the organism of origin (SS), a dramatic signal amplification can be achieved because numerous fluorophores are bound per cell surface exposed protein variant. As a consequence, less than 1000 surface displayed protein molecules per microbial cell are sufficient to achieve a suitable signal-to-noise ratio for detecting ligand-binding cells (35). To demonstrate the feasibility of indirect cell labeling and FACS for isolation of rare hinders, Wentzel et al. (35) have recently described a model experiment where 100 E. colt cells displaying a particular epitope sequence were mixed with le control cells. Epitope displaying E. colt variants could be isolated from the

Kết quả (Việt) 1:

Enzyrn EnshreeroT bởi tế bào vi khuẩn Surfeits 1) 41 ° Y 609A Hình 3 các thủ tục để phát hiện huỳnh quang proteinfligand tương tác. (A) Fluorophore-coupted ligautl. (R) Fluoropluire kết hợp kháng thể Quarternary (C) tổ hợp được tạo ra bởi các quả đạn liên tục ấp với Irgand. kháng thể chính. kháng thể thứ hai biotinylated, và sueptavidin, R-phycoerythrin con¬jugate. (D) ghi nhãn với steptavidin bọc tiền My từ tính.dân số với các ligand protein tiếp theo ủ bệnh với kháng thể huỳnh quang có nhãn anti-epitope. Tế bào ghi nhãn cũng có thể đạt được bởi apphea¬don liên tiếp vòng ấp với các ligand protein, kháng thể anti-cpitope, kháng thể thứ hai biotinylated tiếp theo ủ bệnh strep¬tavidin, Quận 12. phycoerythrin liên hợp, tất cả các hợp chất này cho gián tiếp fluo¬rescent ghi nhãn thương mại sẵn có. kỳ bằng cách sử dụng một kháng thể thứ hai polyclonal là biotinylated tại nhiều trang web cùng với một strepta¬vidin, If.phycocrythrin liên hợp, trong đó có 35 cấp nuorophores, tùy thuộc vào các sinh vật xứ (SS), khuếch đại tín hiệu mạnh mẽ có thể đạt được bởi vì rất nhiều fluorophores đang bị ràng buộc cho mỗi tế bào bề mặt tiếp xúc với protein biến thể. Kết quả là, ít hơn 1000 các phân tử protein được hiển thị trên bề mặt mỗi tế bào vi khuẩn là đủ để đạt được một tỷ lệ tín hiệu-to-noise phù hợp để phát hiện các ligand-ràng buộc các tế bào (35). Để chứng minh tính khả thi của các tế bào gián tiếp ghi nhãn và FACS cho sự cô lập của hiếm gây cản trở, Wentzel et al. (35) gần đây đã mô tả một thử nghiệm mô hình nơi tế bào E. colt 100 Hiển thị một trình tự cụ thể epitope đã được trộn lẫn với le kiểm soát các tế bào. Epitope Hiển thị E. colt biến thể có thể được phân lập từ các

Kết quả (Việt) 2:

Enzyrn EnshreeroT bởi vi khuẩn di Surfeits 1) 41 ° Y 609
Một



hình 3 Thủ tục phát hiện huỳnh quang của sự tương tác proteinfligand. (A) huỳnh quang-coupted ligautl. (R) Fluoropluire-coupled kháng thể (C) hợp Kỷ Đệ Tứ tạo ra bởi viên đạn liên tiếp ủ với Irgand. kháng thể chính. kháng thể biotinylated thứ hai, và sueptavidin, R-phycoerythrin con¬jugate. (D) Dán nhãn với tiền my từ steptavidin tráng.
Dân số với các protein ligand sau ủ với gắn huỳnh quang chống epitope kháng thể. Ghi nhãn di động cũng có thể đạt được bằng cách apphea¬don của viên đạn liên tiếp ủ với protein ligand, chống cpitope kháng thể, kháng thể thứ hai biotinylated sau ủ với strep¬tavidin, 12.phycoerythrin liên hợp, tất cả các hợp chất này đối với ghi nhãn fluo¬rescent gián tiếp là thương mại có sẵn. ky sử dụng một kháng thể thứ hai đa giá được biotinylated ở nhiều địa điểm cùng với một strepta¬vidin, If.phycocrythrin liên hợp, trong đó có 35 hoặc nhiều hơn nuorophores tùy thuộc vào các sinh vật có nguồn gốc (SS), một khuếch đại tín hiệu mạnh mẽ có thể đạt được bởi vì nhiều fluorophore đang bị ràng buộc mỗi bề mặt tế bào biến protein tiếp xúc. Như một hệ quả, ít hơn 1000 mặt hiển thị các phân tử protein mỗi tế bào vi khuẩn là đủ để đạt được một phù hợp tín hiệu-to-noise ratio để phát hiện các tế bào ligand-binding (35). Để chứng minh tính khả thi của nhãn hàng di động gián tiếp và FACS để phân lập các cản trở hiếm, Wentzel et al. (35) gần đây đã mô tả một thí nghiệm mô hình trong đó 100 E. tế bào colt hiển thị một chuỗi epitope đặc biệt đã được pha trộn với các tế bào le kiểm soát. Epitope hiển thị các biến thể E. colt có thể được phân lập từ