Penaeid prawns Penaeus monodon (2.4

Penaeid prawns Penaeus monodon (2.43±0.21 g) and Penaeus indicus (1.98±0.17 g) were collected from local
Aquaculture ponds and were acclimatized in Laboratory in large cement Tanks (2×1.5×0.75 Mts). The cement
tanks were provided soil collected from Aquaculture ponds in order to provide earthen pond environment. The
cement tanks were filled with water drawn from nearby Aquaculture ponds. The Hydro biological parameters
including salinity (15±1 ppt), Temperature (28±10C), pH (8.2±0.1), Dissolved oxygen (DO) (6.0±0.2 ppm) were
maintained constantly throughout the experimentation. All the experimental tanks were continuously aerated
with the help of Air compressors. 20% water exchange was done on everyday on the night after the feeding was
over. The experimental Tanks were kept in 12:12 L: D cycle to nullity the effects if any. In the present
investigation Three Tanks were selected i.e First Tank was treated as control and the animals were fed with
commercial diet. The Second Tank was considered as probiotic treated Tank (PB-I), and the animals were fed
with Bacillus subtilis-supplemented diet, whereas Third Tank was treated as probiotic treated Tank (PB-II) and
the prawns were fed with Lactobacillus rhamnosus-supplemented diet. The Lactic acid Bacterium Lactobacillus
rhamnosus and Bacillus subtilis were collected from 1MTECH, Chandigarh. The probiotic bacteria L.
rhamnosus was cultured in Man-Rogora sharpe broth (MRS, Himedia) and Bacillus subtilis was cultured in
Bacillus broth (Himedia) and incubated under continuous agitation of 180 rpm at 370
c for 24 h. The Bacterial
cultures were centrifuged at 4000 rpm for 15 min at 40C and harvested. The collected bacteria were resuspended
in normal saline solution to 5×1013 CFU/ml of Bacillus subtilis and 3×105 CFU/ml of L.rhamnosus. The
probiotic experimental diets were over-dried at 350C per 1-2 h. The control commercial diet was sprayed with
sterile culture medium. Each Tank was stocked with 100 numbers of prawn’s i.e P. monodon or P. indicus,
thereby 300 numbers each were selected to conduct the experiments. The feeding trials were conducted for
60days. At the end of the feeding trial experiments, Growth parameters, microbial analysis and selected
antioxidant enzyme assays were performed to monitor the effect of probiotic treatments on the culture activity
of prawn P. monodon and P. indicus. For conduction of microbial analysis 6 prawns selected randomly from
each tank and the digestive tract was selected. Prawn digestive tracts were removed with Tweezers and scalpel
and homogenized with sterile saline solution. Dilutions were spread on the following culture media. MRS agar
(Lactic bacteria selective) and Bacillus agar (Selective for Bacillus bacteria) and incubated at 300C for 24 h.
Gram staining was performed with colonies grown in MRS and Bacillus selective agar (Shariff et al., 2001;
Nimrat et al., 2008). The colonies were identified based on Morphological and Biochemical characteristics
(Krieg & Holt, 1984). Antioxidant enzyme assays were also performed in the haemolymph of prawns.
Hemolymph was withdrawn from base of the third walking leg of the shrimp using a syringe containing 1.5 ml
of anticoagulant (Sodium citrate). Superoxide dismutase (SOD) activity was determined by the method of
Kakkar et al (1984). The assay mixture contained 0.1 ml of sample, 1.2 ml of sodium pyrophosphate buffer (pH
8.3, 0.052M), 0.1 ml of Phenazine methosulphate (186 µm), 0.3 ml of Nitro blue tetrazolium (300 µm), 0.2 ml
of NADH (750 µm). Reaction was initiated by the addition of NADH. After incubation at 300C for 90 sec, the
reaction mixture was stirred vigorously with 4.0 ml of n-butanol. The mixture was allowed to stand for 10 min,
centrifuged and butanol layer was separated. The color intensity of the chromogen in butanol layer was
measured at 560 nm against n-butanol and concentration of SOD was expressed as units/ml of hemolymph.
Absorbance values were compared with a standard curve generated from known SOD. Catalase was assayed
according to the method of Aebi (1974). The estimation was done spectrophotometrically following the decrease
in absorbance at 230 nm. The reaction mixture contained 0.01 M Phosphate buffer (pH 7.0), 2 mM H2O2 and 0.2
ml of enzyme extract. The specific activity of Catalase was expressed in terms of units/ml of hemolyph.
Absorbance values were compared with a standard curve generated from know CAT. At the end of the 60 day
feeding trial experiment, Growth parameters, Food conversion ratio (FCR), Specific growth rates (SGR),
percent survival and Normalized Biomass index (NCBI) were calculated as follows:

Kết quả (Việt) 1:

Penaeid tôm sú Penaeus (2.43±0.21 g) và Penaeus indicus (1.98±0.17 g) đã được thu thập từ các địa phươngAo nuôi trồng thủy sản và đã được di thực trong phòng thí nghiệm trong các bồn chứa lớn xi măng (2 × 1.5 × 0.75 Mts). Xi măngxe tăng cung cấp đất thu thập từ ao nuôi trồng thủy sản để cung cấp môi trường đất ao. CácXi măng tăng đã được lấp đầy với nước được rút ra từ ao nuôi trồng thủy sản ở gần đó. Các thông số điện sinh họcbao gồm cả mặn (15±1 ppt), đã nhiệt độ (28±10C), vn (8.2±0.1), oxy tan (DO) (6.0±0.2/phút)duy trì liên tục trong suốt thử nghiệm. Tất cả các thùng nhiên liệu thực nghiệm đã liên tục có gavới sự trợ giúp của máy nén khí. 20% nước trao đổi đã được thực hiện vào mỗi ngày vào ban đêm sau khi ănkết thúc rồi. Thử nghiệm xe tăng được giữ trong 12:12 L: D chu kỳ nullity các hiệu ứng nếu có. Trong hiện tạiđiều tra 3 phụ là tức là lựa chọn đầu tiên xe tăng đã được điều trị như điều khiển và các loài động vật được cho ăn vớichế độ ăn uống thương mại. Chiếc xe tăng thứ hai được coi là như probiotic coi xe tăng (PB-tôi), và các loài động vật được cho ănvới Bacillus subtilis bổ sung chế độ ăn uống, trong khi xe tăng thứ ba được coi là probiotic điều trị tăng (PB-II) vàtôm được cho ăn với Lactobacillus rhamnosus bổ sung chế độ ăn uống. Axit Lactic vi khuẩn Lactobacillusrhamnosus và Bacillus subtilis được thu thập từ 1MTECH, Chandigarh. Vi khuẩn probiotic L.rhamnosus đã được nuôi cấy trong Man-Rogora sharpe canh (MRS, Himedia) và Bacillus subtilis được nuôi cấy trongTrực khuẩn canh (Himedia) và ủ theo kích động liên tục của 180 vòng/phút tại 370c trong 24 h. Vi khuẩnvăn hóa ly 4000 rpm cho 15 phút ở 40C và thu hoạch. Các vi khuẩn được thu thập được resuspendedbình thường giải pháp mặn cho 5 × 1013 CFU/ml Bacillus subtilis và 3 × 105 CFU/ml L.rhamnosus. Cácchế độ ăn uống thực nghiệm probiotic quá được sấy khô ở 350 C 1-2 h. Chế độ ăn uống kiểm soát thương mại đã được phun vớivô trùng các phương tiện truyền thông văn hóa. Mỗi chiếc xe tăng được thả với các con số 100 tức là P. của tôm sú hoặc P. indicus,bằng cách đó 300 số điện thoại đã được lựa chọn để tiến hành các thí nghiệm. Cho ăn thử nghiệm đã được tiến hành cho60days. Ở phần cuối của phiên tòa cho ăn các thử nghiệm, các thông số tốc độ tăng trưởng, vi khuẩn phân tích và lựa chọnchất chống oxy hóa enzyme thử nghiệm đã được thực hiện để theo dõi hiệu quả của probiotic điều trị về hoạt động văn hóatôm P. sú và P. indicus. Cho truyền dẫn của vi sinh vật phân tích 6 tôm lựa chọn ngẫu nhiên từmỗi chiếc xe tăng và đường tiêu hóa được lựa chọn. Tôm tiêu hóa những vùng đã được gỡ bỏ với kẹp và daovà homogenized với giải pháp mặn vô trùng. Dilutions đã được lan truyền trên phương tiện truyền thông văn hóa sau. MRS agar(Vi khuẩn lactic chọn lọc) và trực khuẩn agar (sở quân cho vi khuẩn Bacillus) và ủ ở 300C trong 24 h.Nhuộm gram được thực hiện với các thuộc địa phát triển ở MRS và trực khuẩn chọn lọc agar (Shariff et al., 2001;Nimrat et al., năm 2008). Các thuộc địa đã được xác định dựa trên đặc điểm Morphological và sinh hóa(Krieg & Holt, 1984). Chất chống oxy hóa enzyme thử nghiệm đã được thực hiện cũng trong Hemolymph tôm.Hemolymph được rút khỏi các căn cứ của đi bộ chân thứ ba của tôm bằng cách sử dụng một ống tiêm có chứa 1.5 mlcủa anticoagulant (Sodium citrate). Superoxide dismutase (SOD) hoạt động đã được xác định bằng phương phápKakkar et al (1984). Hỗn hợp khảo nghiệm chứa 0.1 ml mẫu, 1.2 ml của natri đihiđropyrophotphat đệm (pH8.3, 0.052M), 0.1 ml Phenazine methosulphate (186 μm), cách 0.3 ml Nitro xanh tetrazolium (300 μm), cách 0.2 mlcủa NADH (750 μm). Phản ứng được bắt đầu bằng cách bổ sung NADH. Sau khi ủ ở 300C trong 90 giây, cácphản ứng hỗn hợp khuấy mạnh mẽ với 4.0 ml n-butanol. Hỗn hợp được cho phép để đứng trong 10 phút,ly và butanol lớp được tách ra. Cường độ màu sắc của chromogen trong lớp butanolđo tại 560 nm với n-butanol và nồng độ SOD được biểu thị dưới dạng đơn vị/ml hemolymph.Hấp thu giá trị đã được so sánh với một đường cong chuẩn được tạo ra từ SOD nổi tiếng. Catalase assayedtheo phương pháp Aebi (1974). Dự toán đã được thực hiện spectrophotometrically sau giảmtrong hấp thu tại 230 nm. Phản ứng hỗn hợp chứa 0,01 M phosphat đệm (pH 7,0), 2 mM H2O2 và 0,2ml của enzyme giải nén. Các hoạt động cụ thể của Catalase được thể hiện trong điều khoản của các đơn vị/ml hemolyph.Hấp thu giá trị đã được so sánh với một đường cong chuẩn được tạo ra từ biết mèo. Cuối 60 ngàycho ăn thử nghiệm, tham số tăng trưởng, tỷ lệ chuyển đổi thực phẩm (tốn), cụ thể tăng trưởng tỷ giá (SGR),phần trăm sự sống còn và chuẩn hoá sinh khối index (NCBI) được tính như sau:

Kết quả (Việt) 2:

Tôm he Penaeus monodon (2,43 ± 0,21 g) và Penaeus indicus (1,98 ± 0,17 g) được thu thập từ các địa phương
ao nuôi trồng thủy sản và đã được di thực trong phòng thí nghiệm ở Tanks xi măng lớn (2 × 1,5 × 0,75 Mts). Xi măng
xe tăng được cung cấp đất thu thập từ các ao nuôi trồng thủy sản để cung cấp môi trường ao đất. Các
bể xi măng đã được lấp đầy với nước lấy từ ao nuôi trồng thủy sản gần đó. Các thông số Hydro sinh học
bao gồm độ mặn (15 ± 1 ppt), nhiệt độ (28 ± 10C), pH (8,2 ± 0,1), oxy hòa tan (DO) (6,0 ± 0,2 ppm) được
duy trì liên tục trong suốt thí nghiệm. Tất cả các xe tăng thử nghiệm đã được ngậm khí liên tục
với sự giúp đỡ của máy nén khí. 20% lượng nước trao đổi đã được thực hiện trên hàng ngày vào đêm sau khi ăn đã
qua. Các xe tăng thử nghiệm đã được lưu giữ trong 12:12 L: chu kỳ D để vô hiệu các hiệu ứng nếu có. Trong hiện
điều tra Ba Bể đã được lựa chọn ví dụ đầu tiên xe tăng đã được điều trị như kiểm soát và các động vật được cho ăn với
chế độ ăn uống hàng thương mại. Các xe tăng thứ hai được coi là probiotic điều trị Bồn (PB-I), và các động vật được cho ăn
với chế độ ăn uống Bacillus subtilis-sung, trong khi xe tăng thứ ba được coi là probiotic điều trị Bồn (PB-II) và
tôm được cho ăn với Lactobacillus rhamnosus- chế độ ăn uống bổ sung. Các lactic axit khuẩn Lactobacillus
rhamnosus và Bacillus subtilis đã được thu thập từ 1MTECH, Chandigarh. Các vi khuẩn probiotic L.
rhamnosus được nuôi trong Man-Rogora sharpe nước dùng (MRS, Himedia) và Bacillus subtilis đã được nuôi cấy trong
Bacillus nước dùng (Himedia) và ủ được trộn liên tục 180 rpm ở 370
c 24 h. Các vi khuẩn
nuôi cấy được ly tâm ở 4000 rpm trong 15 phút ở 40C và thu hoạch. Các vi khuẩn thu thập được lơ lửng
trong dung dịch nước muối bình thường đến 5 × 1013 CFU / ml của vi khuẩn Bacillus subtilis và 3 × 105 CFU / ml L.rhamnosus. Các
khẩu phần thí nghiệm probiotic đã qua sấy khô ở 350C mỗi 1-2 h. Các chế độ ăn uống kiểm soát thương mại đã được phun với
môi trường nuôi cấy vô trùng. Mỗi xe tăng đã được thả với 100 số của ví dụ tôm của P. monodon hoặc P. indicus,
do đó 300 con số từng được chọn để tiến hành các thí nghiệm. Các thử nghiệm cho ăn đã được tiến hành cho
60days. Vào cuối của thí nghiệm cho ăn thử nghiệm, các thông số tăng trưởng, phân tích vi sinh vật và chọn
các xét nghiệm enzyme chống oxy hóa đã được thực hiện để theo dõi hiệu quả của phương pháp điều trị probiotic vào các hoạt động văn hóa
của tôm sú P. monodon và P. indicus. Ví dẫn của vi khuẩn phân tích 6 tôm được lựa chọn ngẫu nhiên từ
mỗi bể chứa và đường tiêu hóa đã được lựa chọn. Tôm tiêu hóa đã được gỡ bỏ với Nhíp và dao mổ
và đồng nhất với dung dịch muối vô trùng. Pha loãng đã được lan truyền trên các phương tiện truyền thông văn hóa sau đây. Thạch MRS
. (Vi khuẩn lactic có chọn lọc) và Bacillus agar (Selective cho vi khuẩn Bacillus) và ủ ở 300C trong 24 h
nhuộm Gram được thực hiện với các thuộc địa được trồng ở MRS và Bacillus thạch chọn lọc (Shariff et al, 2001;.
Nimrat et al,. 2008). Các thuộc địa được xác định dựa trên đặc điểm hình thái và sinh hóa
(Krieg & Holt, 1984). Xét nghiệm enzyme chống oxy hóa cũng đã được thực hiện trong huyết tương của tôm.
Hemolymph đã bị rút khỏi cơ sở của chân đi bộ thứ ba của tôm sử dụng một ống tiêm chứa 1,5 ml
của thuốc kháng đông (Sodium citrate). Superoxide dismutase (SOD) hoạt động được xác định bằng các phương pháp
Kakkar et al (1984). Hỗn hợp khảo nghiệm chứa 0,1 ml mẫu, 1,2 ml dung dịch đệm sodium pyrophosphate (pH
8.3, 0.052M), 0,1 ml Phenazine methosulphate (186 micron), 0,3 ml Nitro tetrazolium xanh (300 micron), 0,2 ml
của NADH (750 micron). Phản ứng được khởi xướng bởi sự bổ sung của NADH. Sau khi ủ ở 300C trong 90 giây, các
hỗn hợp phản ứng được khuấy mạnh mẽ với 4,0 ml n-butanol. Hỗn hợp được cho phép để yên trong 10 phút,
ly tâm và lớp butanol được tách ra. Cường độ màu sắc của nhiễm sắc trong lớp butanol được
đo ở 560 nm so với n-butanol và nồng độ của SOD được thể hiện bằng đơn vị / ml Hemolymph.
Giá trị hấp thụ được so sánh với một đường cong chuẩn được tạo ra từ SOD được biết đến. Catalase đã được khảo nghiệm
theo phương pháp của Aebi (1974). Việc lập dự toán đã được thực hiện spectrophotometrically sau sự sụt giảm
trong hấp thụ ở 230 nm. Hỗn hợp phản ứng chứa 0,01 M đệm Phosphate (pH 7.0), 2 mM H2O2 và 0,2
ml dung dịch chiết enzyme. Các hoạt động cụ thể của catalase đã được thể hiện qua các đơn vị / ml hemolyph.
Giá trị hấp thụ được so sánh với một đường cong chuẩn được tạo ra từ bí CAT. Vào cuối của 60 ngày
cho ăn thí nghiệm thử nghiệm, các thông số tăng trưởng, tỷ lệ chuyển đổi thức ăn (FCR), tốc độ tăng trưởng cụ thể (SGR),
sống sót phần trăm và chỉ số sinh khối bình thường hóa (NCBI) được tính như sau: