Mẫu lọc được tiêm để phân tích HPLC theo phương pháp phát triển
và xác nhận trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi [13]. Thiết bị sử dụng bao gồm một Surveyor
hệ thống Thermo Electron bao gồm khử khí chân không, bơm Surveyor Thêm LCPMPP,
Surveyor Thêm ASP tự động lấy mẫu, "mảng diode" dò với tế bào dòng chảy 5 cm và ChromNOUR, TRANDAFIR và Ionica
354 St. CERC. Thánh CICBIA 2010 11 (3)
Quest 4.2 phần mềm. Các quyết định đã được thực hiện trong điều kiện isocratic, ở 20 ° C,
bằng cách sử dụng một giai đoạn di động làm bằng 88% dung dịch photphat (KH2PO4 0,02 mol / L),
điều chỉnh pH 4,3 với 5% axit photphoric, được lọc qua một màng polyamide
(0,2 mm ) và 12% acetonitrile. Khối lượng tiêm là 5 ml và tốc độ dòng chảy của
pha động là 1 / mL min.
Caffeine trong mẫu loại khí và lọc được tách ra bởi giai đoạn đảo ngược
sắc ký trên một id 250 × 4,6 mm, 5 micron hạt cột DS HYPERSIL C18,
phát hiện bởi độ hấp thụ ở bước sóng 217 nm và định lượng với một hiệu chuẩn
đồ thị. Caffeine được xác định bằng cách so sánh thời gian lưu và dữ liệu quang phổ với
những tiêu chuẩn xác thực. Tất cả các phân tích được lặp đi lặp lại ba lần. Đỉnh cao tương đối
khu vực đã được xác định cho ba lần lặp lại của mỗi mẫu pha loãng
đang được dịch, vui lòng đợi..