at a controlled temperature. The pr

at a controlled temperature. The procedure for creat- ing drill hole defects was approved by the animal ethi- cal committee, Kovai Medical College and Hospital, Coimbatore, India. Rats were divided into three groups (n = 6 in each group): (1) control, (2) Zn-CS/β-GP, and
(3) Zn-CS/β-GP/nHAp. The rats were anesthetized with 10% ketamine and 2% xylazine (1:1, 0.1 mL/100 g body weight, i.m.) and subjected to perforation of the right tibia by using a dental drill (diameter, 3 mm) under con- stant saline irrigation (0.9% NaCl). The defects were entirely filled with each of the hydrogels in the respec- tive experimental groups. The defects in control animals were left unfilled. After 14 days, the animals were sac- rificed under Cell morphology evaluation
Zn-CS/β-GP and Zn-CS/β-GP/nHAp hydrogels were UV-treated for 2 h. Approximately 2 × 105 mMSCs were different time periods. The cells were then washed with cold phosphate-buffered saline (PBS), and whole cell lysates were prepared. Twenty micrograms of proteins was resolved using 12% sodium dodecyl sulfate–poly- acrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and trans- ferred to polyvinylidene difluoride (PVDF) membranes by electroblotting. The membranes were blocked with 5% non-fat milk powder (BioRad) and incubated over- night with a primary antibody at 4°C. The membranes were probed with secondary antibodies conjugated with horseradish peroxidase (HRP). Finally, the bands were visualized by adding Super Signal West Dura Extended Duration Substrate (Thermo Scientific) according to the manufacturer’s instructions. The images obtained were used for quantification with the ImageJ software, as described previously [52]. Mouse monoclonal Runx2 (1:1,000) antibodies, Cdk2 (1:1,000) antibodies, and sec- ondary antibodies conjugated with HRP were obtained from Santa Cruz Biotechnology. Cdk2 antibodies served as internal loading controls

Kết quả (Việt) 2:

ở nhiệt độ được kiểm soát. Các thủ tục cho các khuyết tật lỗ ing khoan creat- được sự chấp thuận của động vật ethi- cal ủy ban, trường Đại học Y Kovai và Bệnh viện, Coimbatore, Ấn Độ. Chuột được chia thành ba nhóm (n = 6 trong mỗi nhóm): (1) điều khiển, (2) Zn-CS / β-GP, và
(3) Zn-CS / β-GP / nhập. Chuột được gây mê với 10% ketamine và 2% xylazine (1: 1, 0,1 ml / 100 g trọng lượng cơ thể, im) và bị thủng xương chày ngay bằng cách sử dụng một máy khoan răng (đường kính 3 mm) dưới STANT con- tưới nước muối (0,9% NaCl). Các khiếm khuyết đã được hoàn toàn đầy mỗi hydrogel trong nhóm thực nghiệm chính kịp thời respec-. Các khiếm khuyết ở động vật kiểm soát được không ghi. Sau 14 ngày, các con vật được sac- rificed được đánh giá hình thái di
Zn-CS / β-GP và Zn-CS / β-GP / nhap hydrogel được UV-điều trị cho 2 h. Khoảng 2 × 105 mMSCs là khoảng thời gian khác nhau. Sau đó các tế bào đã được rửa sạch bằng nước muối lạnh đệm phosphat (PBS), và lysates toàn bộ tế bào đã được chuẩn bị. Hai mươi microgram protein đã được giải quyết bằng 12% sodium dodecyl sulfate-poly acrylamide gel (SDS-PAGE) và chuyển tiếp ferred để polyvinylidene difluoride (PVDF) màng bởi electroblotting. Các màng đã bị chặn với 5% mỡ sữa bột (BioRad) và ủ qua đêm với một kháng thể chính ở 4 ° C. Các màng đã được thăm dò với kháng thể thứ cấp liên hợp với cải ngựa peroxidase (HRP). Cuối cùng, ban nhạc đã được hình dung bằng cách thêm siêu Signal Tây Dura Mở rộng Thời gian Substrate (Thermo Scientific) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Các hình ảnh thu được được sử dụng để định lượng với phần mềm ImageJ, như mô tả trước đây [52]. Chuột đơn dòng Runx2 (1: 1000) kháng thể, CDK2 (1: 1000) kháng thể và kháng thể ở bậc trung giây- liên hợp với HRP được lấy từ Santa Cruz Công nghệ sinh học. Kháng thể CDK2 phục vụ như kiểm soát tải nội