Tất cả ấu trùng nữ hoàng trong giai đoạn tế bào mở trong mỗi
của năm "nữ hoàng" thuộc địa recevied 313 000 N.
bào tử bombi; đây là những "nữ hoàng tiêm".
Đồng thời, tất cả ấu trùng nữ hoàng trong các tế bào mở
giai đoạn trong mỗi năm "kiểm soát hoàng hậu" thuộc địa đã nhận được 12,5% (w / v) sucrose-giải pháp mà không N.
bào tử bombi. Các "nữ hoàng tiêm" và "nữ hoàng kiểm soát" được duy trì một cách riêng biệt trong quá trình
thử nghiệm. Sau khi xuất hiện tất cả các nữ hoàng có thể nuôi
ăn tự do cho một tuần trên 50% (w / v) sucrosesolution và phấn bột chuẩn bị trong cùng một cách
như bột phấn hoa được sử dụng trong chăn nuôi của các thuộc địa.
Sau khoảng thời gian một tuần đã trôi qua, các
hoàng hậu là đặt trong một hộp giao phối (lưới lồng,
40 cm x 50 cm x 50 cm) với nhiều gấp đôi
như nữ hoàng. Các chúa được đưa ra một giờ để giao phối.
B. terrestris queens người bạn đời trong khoảng 15 phút. Trong thời gian giao phối của các cặp vợ chồng đã được chuyển giao cho một
hộp giao phối. Sau khi giao phối, kiến chúa giao phối được
lưu giữ trong một tuần ở nhiệt độ phòng với 50%
(w / v) sucrose-giải pháp và phấn bột ăn tự do
trong một hộp bạn đời. Các nữ hoàng mà không giao phối được
chẩn đoán cho N. bombi kính hiển vi.
Một tuần sau khi giao phối quá trình ngủ đông
bắt đầu. Đầu tiên, tất cả các con kiến chúa được đánh dấu bằng một đĩa màu đánh số, được dán mắt vào ngực với keo côn trùng được sử dụng để đánh dấu các nữ hoàng ong mật.
Sau đó, các chúa được đặt riêng trong rỗng
hộp trận đấu. Một khoảng thời gian trước khi ngủ đông của 7 ngày
tại 12 ◦C trước lưu trữ tại 5 ◦C trong tủ lạnh được trang bị buộc phải lưu thông không khí trong lành cho
22 tuần.
Trọng lượng của những nữ hoàng lây bệnh và kiểm soát
được ghi nhận là sự bắt đầu của chế độ ngủ đông và sau khi
các tuần thứ 22 của hibernation.
Sau 12 và 22 tuần ngủ đông, tổng
titre protein huyết tương của mười lây bệnh và kiểm soát hoàng hậu đã được ghi lại. Huyết tương đã được khai thác
bằng cách chèn một kim mao mạch giữa 4 và
phân khúc bụng 5 vào trái tim. Thủ tục này đã giết chết nữ hoàng. Protein huyết tương đã được xác định bằng cách sử dụng photospectrometrically Bradford
phương pháp (protein tham khảo BSA và hấp thụ ở
595 nm).
Sau khi ngủ đông, những con kiến chúa được nhốt riêng rẽ trong hộp khởi động để bắt đầu ovipositing
và thuộc địa thành lập. Queens mà không bắt đầu
ovipositing trong vòng sáu tuần được coi là một
phi thuộc địa hoàng sáng lập. Các thuộc địa thành công
sáng lập hoàng hậu và bố mẹ của họ đã được chuyển
vào hộp ong bumble khi đứa con đầu tiên
xuất hiện. Vào cuối của thí nghiệm, khi các
con đực đầu tiên xuất hiện, cấy và kiểm soát
hoàng hậu và con cái của họ được chẩn đoán vi-scopically cho bào tử N. bombi.
đang được dịch, vui lòng đợi..
