Để sử dụng hệ thống, hai thí nghiệm nấm men nhân bản phải được thực hiện. Việc đầu tiên
thí nghiệm nhân bản liên quan đến gen mà sản phẩm protein đang được nghiên cứu. Gen này
được ligated với gen cho một trong những cặp nhân tố phiên mã và xây dựng
đưa vào một vector men. Các nấm men tái tổ hợp được sản xuất ra không có khả năng
thể hiện các gen mục tiêu, bởi vì yếu tố phiên mã này được sửa đổi không thể tương tác với các
đối tác của nó (Hình 12.18b).
Trong thí nghiệm nhân bản thứ hai, một phiên bản hybrid của đối tác được thực hiện và nhân bản vô tính
thành men tế bào. Phục hồi các biểu hiện của các gen mục tiêu chỉ ra rằng hai
yếu tố phiên mã lai có thể tương tác. Việc hợp nhất được thiết kế theo một cách mà này
chỉ có thể xảy ra nếu sự tương tác xảy ra giữa các thành phần protein kiểm tra các
giống lai, không phải giữa các phân đoạn nhân tố phiên mã (Hình 12.18c). Cặp tương tác
protein thử nghiệm do đó được xác định. Các thí nghiệm nhân bản thứ hai có liên quan đến
một thư viện các thể tái tổ hợp đại diện cho các protein khác nhau, do đó một protein có thể được
thử nghiệm với nhiều người khác.
đang được dịch, vui lòng đợi..
