AccuDiag™Toxocara IgGELISA Kit 8206

AccuDiag™

Toxocara IgG
ELISA Kit

8206-35

See external Label 96 Tests

Toxocara IgG ELISA
Test



Method Enzyme Linked
Immunosorbent Assay


Principle Sandwich Complex

Detection Range Qualitative Positive;
Negative Control


Sample 5 µL serum/plasma
Total Time ~ 20 min.
Shelf Life 12 Months from the
manufacturing date

Specificity 93.3%
Sensitivity 87.5%

INTENDED USE

For the qualitative screening of serum IgG antibodies to Toxocara using an Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) technique.


TEST PRINCIPLE

The micro test wells are coated with an excretory/secretory antigen from the Toxocara larvae. During the first incubation with the diluted patients’ sera, any antibodies which are reactive with the antigen will bind to the coated wells. After washing to remove the rest of the sample, the Enzyme Conjugate is added. If antibodies have been bound to the wells, the Enzyme Conjugate will then bind to these antibodies. After another series of washes, a chromogen (tetramethylbenzidine or TMB) is added. If the Enzyme Conjugate is present, the peroxidase will catalyze a reaction that consumes the peroxide and turns the chromogen from clear to blue. Addition of the Stop Solution ends the reaction and turns the blue color to a bright yellow color. The reaction may then be read visually or with an ELISA reader.

SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION

Serum or plasma may be stored at 2-8 ºC for up to five days. Sample may be frozen below -20 ºC for extended periods. Freezing whole blood samples is not advised. Do not heat inactivate samples and avoid repeated freezing and thawing of samples.

MATERIALS AND COMPONENTS

Materials provided with the test kits

1. Test Strip: Microwells containing Toxocara antigens – 96 test wells in a test strip holder.

2. Enzyme Conjugate: One (1) bottle containing 11 ml of Protein A conjugated to peroxidase.

3. Positive Control: One (1) vial containing 2 ml of diluted positive rabbit serum.

4. Negative Control: One (1) vial containing 2 ml of diluted negative human serum.

5. TMB: One (1) bottle containing 11 ml of the chromogen tetramethylbenzidine (TMB).

6. Wash Concentrate (20X): One (1) bottle containing 25 ml of concentrated buffer and surfactant.

7. Dilution Buffer: Two (2) bottles containing 30 ml of buffered protein solution.

8. Stop Solution: One (1) bottle containing 11 ml of 1 M phosphoric acid.


SUMMARY AND EXPLANATION

Toxocariasis is the infection caused by roundworm of the genus Toxocara (usually T. canis, rarely T. cati) and is acquired by ingesting soil contaminated with embryonated eggs from an animal’s feces. These eggs become embryonated after 2 to 5 weeks after being passed by the animal. Thus, human infection does not occur by contact with fresh feces. In addition, infected humans cannot pass the infection to other humans. 6

The disease manifests itself as visceral larval migrans (VLM) and ocular larval migrans (OLM). Signs and symptoms of VLM may vary from an asymptomatic state with mild eosinophilia to a severe and potentially fatal disorder. Patients with OLM also vary widely in presentation, from acute lesions in the eye to asymptomatic infections. Toxocara larva migrans is believed to be the second most common helminth infection in developed countries.1,2

There is no definitive method to diagnose Toxocara infections, thus true sensitivity and specificity of serologic tests cannot be accurately determined. The diagnosis is further complicated by the fact that the antibody response varies depending on worm burden and location. However, numerous studies have shown that immunoassays using a purified excretory antigen from the larval stage, as in this ELISA, have shown dramatically improved sensitivities and specificities when compared to assays using crude antigens.1-6








DAI CODE #35



Materials required but not provided
9. Micropipette
10. Squeeze bottle for washing strips (narrow tip is recommended)

11. Reagent grade (DI) water
12. Graduated Cylinder
13. Sample Dilution Tubes

14. Absorbent paper

Suggested Materials

ELISA plate reader with a 450 nm and a 620-650 nm filter (optional if results are read visually)

Preparation

• Before use, bring all reagents and samples to room temperature (15-25 °C) and mix.

• (20X) Wash Concentrate may precipitate during refrigerated storage, but will go back into solution when brought to room temperature and mixed.

Ensure that (20X) Wash Concentrate is completely in solution before diluting to working concentration. To dilute (20X) wash concentrate to working dilution, remove cap and add contents of one bottle of Wash Concentrate to a squeeze bottle containing 475 ml of DI water. Swirl to mix. Squeeze bottle should have a narrow tip to optimize washing

Kết quả (Việt) 1:

AccuDiag™Toxocara IgGELISA Kit 8206-35 Xem bên ngoài hãng 96 xét nghiệm Toxocara IgG ELISA Thử nghiệm Phương pháp enzym liên kết Immunosorbent khảo nghiệm Nguyên tắc Sandwich phức tạp Tầm phát hiện tích cực về chất lượng; Tiêu cực điều khiển Mẫu 5 ml huyết thanh/plasma Tổng thời gian ~ 20 phút. Thời hạn sử dụng 12 tháng kể từ các ngày sản xuất Đặc trưng 93,3% Độ nhạy Rađio 87.5% MỤC ĐÍCH SỬ DỤNGĐối với việc kiểm tra chất lượng kháng thể kháng IgG huyết thanh Toxocara sử dụng một kỹ thuật Enzyme-Linked Immunosorbent khảo nghiệm (ELISA). NGUYÊN TẮC KIỂM TRAWells vi thử nghiệm được phủ một lớp một kháng nguyên điêù/tiết từ ấu trùng Toxocara. Trong thời gian ủ bệnh đầu tiên với huyết thanh của bệnh nhân loãng, bất kỳ kháng thể có phản ứng với các kháng nguyên sẽ bám vào các giếng tráng. Sau khi rửa để loại bỏ phần còn lại của các mẫu, liên hợp Enzyme được thêm vào. Nếu kháng thể đã được ràng buộc để các giếng, Enzyme liên hợp sẽ sau đó liên kết với các kháng thể. Sau khi một loạt các bồn rửa, một chromogen (tetramethylbenzidine hoặc TMB) được thêm vào. Nếu liên hợp enzym là hiện nay, peroxidase sẽ xúc tác phản ứng rằng tiêu thụ peroxide và lần lượt chromogen từ rõ ràng với màu xanh. Bổ sung các giải pháp ngăn chặn kết thúc phản ứng và biến màu xanh với một màu vàng tươi sáng. Phản ứng này sau đó có thể được đọc trực quan, hoặc với một đầu đọc ELISA.BỘ SƯU TẬP MẪU VÀ CHUẨN BỊHuyết thanh hay plasma có thể được lưu trữ tại 2-8 ºC cho lên đến 5 ngày. Mẫu có thể được đông lạnh dưới-20 ºC cho thời gian dài. Đông máu toàn bộ mẫu không nên. Không nóng bất hoạt các mẫu và tránh lặp đi lặp lại đóng băng và tan băng các mẫu.VẬT LIỆU VÀ LINH KIỆNTài liệu cung cấp cho các bộ dụng cụ thử nghiệm1. kiểm tra Strip: Các Microwells có chứa kháng nguyên Toxocara-thử nghiệm 96 giếng trong thử nghiệm một dải chủ.2. enzym liên hợp: Một (1) chai chứa 11 ml của Protein A chia cho peroxidase.3. tích cực kiểm soát: Một (1) lọ chứa 2 ml trong huyết thanh thỏ tích cực pha loãng.4. tiêu cực điều khiển: Một (1) lọ chứa 2 ml pha loãng huyết thanh tiêu cực của con người.5. TMB: Một (1) chai chứa 11 ml chromogen tetramethylbenzidine (TMB).6. rửa tập trung (20 X): một (1) chai chứa 25 ml của tập trung vùng đệm và surfactant.7. pha loãng đệm: Hai (2) chai chứa 30 ml của giải pháp buffered protein.8. dừng giải pháp: Một (1) chai chứa 11 ml axit photphoric 1 M. TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCHToxocariasis là nhiễm trùng do giun đũa chi Toxocara (thường T. canis, hiếm khi T. cati) và được mua lại bởi ingesting đất bị ô nhiễm với embryonated trứng từ phân động vật. Những quả trứng trở thành embryonated sau 2-5 tuần sau khi được thông qua bởi các động vật. Vì vậy, con người nhiễm không xảy ra bằng cách liên hệ với tươi phân. Ngoài ra, con người bị nhiễm bệnh không thể vượt qua sự lây nhiễm cho người khác. 6Bệnh biểu hiện bản thân như nội tạng ấu migrans (VLM) và migrans ấu mắt (OLM). Dấu hiệu và triệu chứng của VLM có thể khác nhau từ một trạng thái không có triệu chứng nhẹ eosinophilia một rối loạn nghiêm trọng và có khả năng gây tử vong. Bệnh nhân với OLM cũng khác nhau trong trình bày, từ các tổn thương viêm trong mắt không có triệu chứng nhiễm trùng. Ấu trùng Toxocara migrans được cho là nhiễm trùng helminth thứ hai phổ biến nhất trong phát triển countries.1,2Không có phương pháp dứt khoát để chẩn đoán nhiễm trùng Toxocara, do đó đúng độ nhạy và đặc trưng của serologic thử nghiệm không thể xác định chính xác. Chẩn đoán thêm phức tạp hơn bởi thực tế là phản ứng kháng thể khác nhau tùy thuộc vào sâu gánh nặng và vị trí. Tuy nhiên, nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng immunoassays cách sử dụng một kháng nguyên điêù tinh khiết từ giai đoạn ấu trùng, như trong này ELISA, đã chỉ ra nhạy cảm được cải thiện đáng kể và specificities khi so sánh với thử nghiệm bằng cách sử dụng dầu thô antigens.1-6ĐẠI MÃ #35 Vật liệu cần thiết nhưng không được cung cấp9. micropipette10. siết chặt chai rửa dải (hẹp tip khuyến cáo)11. thuốc thử lớp (DI) nước12. tốt nghiệp xi lanh13. mẫu pha loãng ống14. thấm hút giấyTài liệu đề nghịELISA mảng người đọc với một 450 nm và một 620-650 nm lọc (tùy chọn nếu kết quả đọc trực quan)Chuẩn bị• Trước khi sử dụng, mang lại cho tất cả các thuốc thử và các mẫu để phòng nhiệt độ (15-25 ° C) và pha trộn.• (20 X) rửa tập trung có thể kết tủa trong quá trình làm lạnh lí, nhưng sẽ trở lại vào giải pháp khi đưa đến nhiệt độ phòng và pha trộn.Đảm bảo rằng (20 X) rửa tập trung là hoàn toàn trong dung dịch trước khi pha loãng đến nồng độ làm việc. Để pha loãng (20 X) rửa tập trung để làm việc pha loãng, loại bỏ nắp và thêm nội dung của một chai rửa tập trung vào một chai bóp chứa 475 ml DI nước. Xoắn để trộn. Bóp chai nên có một tip hẹp để tối ưu hóa rửa

Kết quả (Việt) 2:

AccuDiag ™

Toxocara IgG
ELISA Kit

8206-35

Xem Label bên ngoài 96 xét nghiệm

Toxocara IgG ELISA
thử nghiệm



phương pháp Enzyme Linked
immunosorbent assay


Nguyên tắc Sandwich Complex

Detection Phạm vi tính tích cực;
Negative kiểm soát


mẫu 5 ml huyết thanh / plasma
Tổng thời ~ 20 phút.
Thời hạn sử dụng 12 tháng từ các
ngày sản xuất

đặc 93,3%
nhạy 87,5%

dÙNG sỬ dỤNG

Đối với việc kiểm tra chất lượng của các kháng thể IgG huyết thanh để Toxocara sử dụng một enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kỹ thuật.


nGHIỆM NGUYÊN TẮC

các giếng kiểm tra vi được phủ bằng một kháng nguyên tiết / bài tiết từ Toxocara ấu trùng. Trong thời gian ủ bệnh đầu tiên với huyết thanh bệnh nhân loãng ', bất kỳ các kháng thể mà là phản ứng với kháng nguyên sẽ liên kết với các giếng tráng. Sau khi rửa để loại bỏ phần còn lại của mẫu, các enzyme liên hợp được thêm vào. Nếu các kháng thể đã bị ràng buộc vào các giếng, các enzyme liên hợp sau đó sẽ liên kết với các kháng thể này. Sau một loạt các lần giặt, một nhiễm sắc (tetramethylbenzidine hoặc TMB) được thêm vào. Nếu các enzyme liên hợp là hiện nay, peroxidase sẽ xúc tác cho một phản ứng mà tiêu thụ các peroxide và biến nhiễm sắc từ trong thành màu xanh. Ngoài các giải pháp Dừng kết thúc phản ứng và biến màu xanh sang màu vàng tươi. Phản ứng sau đó có thể được đọc bằng mắt hoặc với một ELISA reader.

THU MẪU VÀ CHUẨN BỊ

huyết thanh hoặc huyết tương có thể được bảo quản ở 2-8 độ C cho đến năm ngày. Mẫu có thể được đông lạnh dưới -20 độ C trong thời gian dài. Freezing mẫu máu toàn không đúng đắn. Không làm nóng bất hoạt mẫu và tránh đông lặp đi lặp lại và tan băng mẫu.

VẬT LIỆU VÀ LINH

liệu được cung cấp với các bộ dụng cụ kiểm tra

1. Kiểm tra Strip: Microwells có chứa kháng nguyên Toxocara - 96 giếng thử nghiệm trong một ngăn chứa kiểm tra dải.

2. Enzyme liên hợp: Một (1) lọ chứa 11 ml Protein Một liên hợp với peroxidase.

3. Kiểm soát tích cực:. Một (1) lọ có chứa 2 ml pha loãng huyết thanh thỏ dương

4. Kiểm soát tiêu cực:. Một (1) lọ có chứa 2 ml pha loãng huyết thanh âm tính nhân

5. TMB: Một (1) lọ chứa 11 ml tetramethylbenzidine nhiễm sắc (TMB).

6. Rửa Concentrate (20X):. Một (1) lọ chứa 25 ml đệm tập trung và hoạt động bề mặt

7. Pha loãng Buffer: Hai (2) lọ chứa 30 ml dung dịch protein đệm.

8. Stop Giải pháp:. Một (1) lọ chứa 11 ml 1 M axit photphoric


TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH

Toxocariasis là nhiễm trùng gây ra bởi giun tròn của chi Toxocara (thường là T. canis, hiếm khi T. cati) và được mua lại bằng cách nuốt đất bị nhiễm phôi trứng từ phân của động vật. Những quả trứng trở thành phôi sau 2-5 tuần sau khi được thông qua bởi các động vật. Như vậy, người nhiễm không xảy ra do tiếp xúc với phân tươi. Ngoài ra, con người bị nhiễm bệnh không thể truyền bệnh sang người khác. 6

Bệnh biểu hiện như migrans tạng ấu trùng (VLM) và migrans ấu trùng ở mắt (OLM). Các dấu hiệu và triệu chứng của VLM có thể thay đổi từ một trạng thái không triệu chứng với bạch cầu ưa eosin nhẹ đến một rối loạn nghiêm trọng và có khả năng gây tử vong. Bệnh nhân với OLM cũng rất khác nhau trong bài trình bày, từ những tổn thương nghiêm trọng ở mắt bị nhiễm trùng không có triệu chứng. Migrans Toxocara ấu trùng được cho là nhiễm giun sán phổ biến thứ hai trong phát triển countries.1,2

Không có phương pháp dứt khoát để chẩn đoán nhiễm trùng Toxocara, nhạy cảm như vậy, đúng sự thật và độ đặc hiệu của xét nghiệm huyết thanh học không thể được xác định một cách chính xác. Việc chẩn đoán phức tạp hơn bởi thực tế rằng phản ứng kháng thể khác nhau tùy thuộc vào gánh nặng sâu và vị trí. Tuy nhiên, nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng xét nghiệm miễn dịch bằng cách sử dụng kháng nguyên bài tiết tinh khiết từ các giai đoạn ấu trùng, như trong ELISA này, đã cho thấy sự nhạy cảm được cải thiện đáng kể và độ đặc hiệu khi so sánh với các thử nghiệm sử dụng antigens.1-6 thô








ĐẠI MÃ # 35



Vật liệu cần thiết, nhưng không cung cấp
9. Micropipette
10. Bóp chai cho dải rửa (tip hẹp được đề nghị)

11. Cấp thuốc thử (DI) nước
12. Tốt nghiệp xi lanh
13. Mẫu pha loãng ống

14. Giấy thấm

đề nghị liệu

ELISA đọc tấm với 450 nm và một bộ lọc 620-650 nm (tùy chọn nếu kết quả này được đọc bằng mắt)

Chuẩn bị

• Trước khi sử dụng, mang lại cho tất cả các thuốc thử và mẫu đến nhiệt độ phòng (15-25 ° C) và trộn.

• (20X) Rửa Concentrate có thể thúc đẩy quá trình bảo quản trong tủ lạnh, nhưng sẽ trở thành giải pháp khi đưa về nhiệt độ phòng và hỗn hợp.

Đảm bảo rằng (20X) Rửa Concentrate là hoàn toàn trong dung dịch trước khi pha loãng với nồng độ làm việc. Để pha loãng (20X) rửa đậm đặc đến độ pha loãng làm việc, loại bỏ nắp và thêm nội dung của một chai Rửa Tập trung vào một chai bóp có chứa 475 ml nước DI. Lắc để trộn. Bóp chai nên có một đầu hẹp để tối ưu hóa rửa