Sequencing of Amplified DNA Fragmen

Sequencing of Amplified DNA Fragments. The designed primers were used to amplify and
sequence DNA fragments from pooled porcine genomic DNA. The two DNA pools consisted
of either 20 Ehuralien or 20 Landrace samples. For each mix the DNA was prepared from
blood samples. Once DNA fragments had been cleanly amplified, the fragments were
sequenced using an ABI 377 automated sequencer located at the Guelph Molecular
Supercentre, University of Guelph. The sequences obtained from the Ehuralien and Landrace
pooled DNA samples were compared for any polymorphisms and intron/exon borders were
determined.
Genotyping of Animals. Within exon 11 a single nucleotide polymorphism (a T/C
substitution) was identified. The PCR-RFLP technique was determined to be the most effective
method of genotyping animals for the polymorphism. The restriction enzyme Rsa1 was
identified to be able to cleave the DNA if a cytosine base is present in place of thymine, as
shown in Figure 1. Restriction digestions were carried out at 37 oC for 3 hours.
Animal Population. The animal population was developed by the Roslin Institute, Scotland,
and consisted of a Meishan x Large White three generation crossbreeding population with 30 grandparent animals of which 16 were pure Meishan and 14 were pure Large White. The 30
grandparent pigs and 220 F2 sows were used for genotyping and the results analyzed for
association with phenotypic data regarding prolificacy traits previously recorded. Statistical
analysis was completed using the genotyping data from 178 animals from the Roslin
population for which ovulation rate data was recorded.

Kết quả (Việt) 1:

Xác định trình tự DNA khuếch đại mảnh. Chất nền, mồi được thiết kế được sử dụng để khuyếch đại vàtrình tự DNA mảnh vỡ từ những DNA porcine gen. Hai hồ bơi DNA bao gồm20 Ehuralien hoặc 20 Landrace mẫu. Cho mỗi kết hợp DNA đã được chuẩn bị từmẫu máu. Khi DNA mảnh vỡ đã được khuếch đại sạch, các mảnh vỡ đãtrình tự bằng cách sử dụng một sequencer ABI 377 tự động nằm ở phân tử GuelphSupercentre, đại học Guelph. Trình tự thu được từ Ehuralien và Landracenhững mẫu DNA đã được so sánh cho bất kỳ polymorphisms và intron/exon biên giới đãxác định.Gen của động vật. Trong exon 11 một đa hình nucleotide duy nhất (một T/Cthay thế) đã được xác định. Kỹ thuật PCR RFLP được xác định là hiệu quả nhấtphương pháp của gen động vật cho đa hình. Enzyme giới hạn Rsa1 làxác định để có thể tách các DNA nếu một cơ sở cytosine có mặt tại chỗ của thymine, nhưHiển thị trong hình 1. Hạn chế digestions đã được thực hiện tại 37 oC cho 3 giờ.Dân số động vật. Dân số động vật đã được phát triển bởi viện Roslin, Scotland,và bao gồm một Meishan x trắng lớn ba thế hệ lai dân với 30 ông bà động vật mà 16 đã là tinh khiết Meishan và 14 đã lớn màu trắng tinh khiết. 30ông bà con lợn và 220 F2 lợn nái đã được sử dụng cho gen và các kết quả phân tích choHiệp hội với các dữ liệu kiểu hình về những đặc điểm prolificacy trước đó được ghi lại. Thống kêphân tích đã được hoàn thành bằng cách sử dụng dữ liệu gen từ 178 động vật từ Roslindân số cho rụng trứng mà tỷ lệ dữ liệu đã được ghi lại.

Kết quả (Việt) 2:

Giải mã bộ gen DNA Amplified Fragments. Các mồi thiết kế đã được sử dụng để khuếch đại và
các mảnh DNA chuỗi từ gộp DNA của bộ gen lợn. Hai hồ DNA bao gồm
của cả 20 Ehuralien hoặc 20 mẫu Landrace. Đối với mỗi trộn DNA đã được chuẩn bị từ
mẫu máu. Một khi các mảnh DNA đã được khuếch đại sạch sẽ, các mảnh vỡ đã được
lập trình tự sử dụng một ABI 377 sequencer tự động đặt tại Guelph Molecular
Supercentre, Đại học Guelph. Các trình tự thu được từ các Ehuralien và Landrace
gộp các mẫu DNA được so sánh với bất kỳ đa hình và biên giới intron / exon được
xác định.
định kiểu gen của động vật. Trong vòng 11 exon một đa hình đơn nucleotide (T / C
thay thế) đã được xác định. Kỹ thuật PCR-RFLP đã được xác định là có hiệu quả nhất
phương pháp kiểu gen động vật cho đa hình. Các enzyme hạn chế Rsa1 được
xác định để có thể tách những DNA nếu một cơ sở cytosine có mặt ở vị trí của thymine, như
thể hiện trong hình 1. Hạn chế phá mẫu được thực hiện ở 37 oC trong 3 giờ.
Animal Dân số. Các quần thể động vật được phát triển bởi Viện Roslin, Scotland,
và bao gồm một Meishan x Large White ba thế hệ dân lai với 30 con ông bà trong đó 16 là tinh khiết Mi Sơn và 14 tinh khiết Large White. 30
lợn nái ông bà và 220 F2 đã được sử dụng cho kiểu gen và các kết quả phân tích cho
kết hợp với dữ liệu kiểu hình liên quan đến đặc điểm sự sản xuất nhiều ghi nhận trước đây. Thống kê
phân tích được hoàn thành bằng cách sử dụng dữ liệu từ 178 kiểu gen động vật từ Roslin
dân mà số liệu tỷ lệ rụng trứng đã được ghi lại.