This novel nanocarrier was deployed

This novel nanocarrier was deployed to study its effect on the
bioavailability of drug, and therefore pharmacokinetic profiling of
drug was inevitably determined (Paolino et al., 2010). Three groups
of three animals were employed in this study. This background
mouse strain was administered Plain GEM, GEM loaded-CTS/PEG
and CTS/PEG-AA NPs a dose equivalent of 6 mg/kg body through
lateral tail vein. Blood samples (200 ll) were collected at different
times of the study from the retro-orbital plexus and collected plasma
(5000 g, 12 min) was frozen down. Glacial acetic acid (50 ll)
was added to plasma samples to decrease hydrogen bonding between
nucleosides and proteins. Acetonitrile (1 ml) (HPLC grade)
was added to plasma samples, which were then vortex-mixed
and centrifuged at 900 g for 15 min at 4 C. The supernatant
was removed and collected in a glass tube and acetonitrile (1 ml)
was added to the pellet. Three cycles of vortex mixing and centrifugation
procedure were performed. The supernatants were
pooled, evaporated to dryness under nitrogen flux at 42 C
(thermostated water bath) and stored at 80 C. Before RP-HPLC
analysis, the residue was re-suspended in water (1 ml, HPLC
grade), incubated for 5 min at 37 C and then centrifuged at
12,000 g for 15 min at 20 C. The supernatant was removed,
filtered through a 0.22lmpore size Anotop 10 syringe filter
(Whatman, SpBiodistribution studies were carried out on tumor bearing
female Balb/c mice. Modified orthotopic model of lung tumor
was developed on mice as earlier reported (Garbuzenko et al.,
2010). Briefly, A549 cells transfected with luciferase (5–8 106
)
were resuspended in 0.1 mL of RPMI medium containing 20%
FBS, mixed with 5 lM EDTA and administered intratracheally to
the murine lung through a catheter. It was shown that a slight disruption
of the pulmonary epithelium or the surfactant layer by coadministration
of EDTA allowed significantly better tumor engraftment.
Four weeks after the instillation of tumor cells, mice were
used for biodistribution study. Biodistribution of the drug was
determined, with slight modifications as earlier reported (Yoo
and Park, 2004), to study the distribution of drug in different organs.
Twenty-seven healthy Balb/c mice were selected and divided
into three groups of nine mice each group for Free GEM, GEM
loaded-CTS/PEG and CTS/PEG-AA NPs. Plain GEM, GEM loadedCTS/PEG
and CTS/PEG-AA NPs were administered through tail vein
in a dose equivalent to 18 mg/kg body weight. Three animals from
each group were sacrificed at 2, 12, and 24 h, and various organ
masses such as hearts, livers, spleens and kidneys were collected
and washed with saline; and weighed prior to homogenization in
saline. Tissue samples were cooled on ice after homogenization
procedure; the homogenate was then centrifuged at 19,000 g
for 12 min. Methanol and acetonitrile were added to the supernatant
(1:1) to precipitate unwanted proteins; samples were centrifuged
(19,000 g, 10 min) as described above. The aliquots were
assayed for GEM levels using RP-HPLC to estimate the total amount
of GEM was performed using RP-HPLC method according to the
method mentioned in Section 2.3.
2ringfield Mill, UK) and placed in 4 ml HPLC glass
vials for analytical determination. Detection of Gemcitabine in
serum was carried out using a RBiodistribution studies were carried out on tumor bearing
female Balb/c mice. Modified orthotopic model of lung tumor
was developed on mice as earlier reported (Garbuzenko et al.,
2010). Briefly, A549 cells transfected with luciferase (5–8 106
)
were resuspended in 0.1 mL of RPMI medium containing 20%
FBS, mixed with 5 lM EDTA and administered intratracheally to
the murine lung through a catheter. It was shown that a slight disruption
of the pulmonary epithelium or the surfactant layer by coadministration
of EDTA allowed significantly better tumor engraftment.
Four weeks after the instillation of tumor cells, mice were
used for biodistribution study. Biodistribution of the drug was
determined, with slight modifications as earlier reported (Yoo
and Park, 2004), to study the distribution of drug in different organs.
Twenty-seven healthy Balb/c mice were selected and divided
into three groups of nine mice each group for Free GEM, GEM
loaded-CTS/PEG and CTS/PEG-AA NPs. Plain GEM, GEM loadedCTS/PEG
and CTS/PEG-AA NPs were administered through tail vein
in a dose equivalent to 18 mg/kg body weight. Three animals from
each group were sacrificed at 2, 12, and 24 h, and various organ
masses such as hearts, livers, spleens and kidneys were collected
and washed with saline; and weighed prior to homogenization in
saline. Tissue samples were cooled on ice after homogenization
procedure; the homogenate was then centrifuged at 19P-HPLC method as mentioned in
Section 2.3, and other Pharmacokinetic parameters from drug
serum level were determined by Kinetica software version 5.
2.6.2.

Kết quả (Việt) 1:

Nanocarrier cuốn tiểu thuyết này đã được triển khai để nghiên cứu hiệu ứng của nó trên cáckhả dụng sinh học của thuốc, và do đó pharmacokinetic profiling củama túy là xác định chắc chắn (Paolino et al., 2010). Ba nhómba loài động vật được sử dụng trong nghiên cứu này. Nền tảng nàychuột căng được quản lý đồng bằng đá quý, đá quý nạp-CTS/PEGvà CTS/PEG-AA NPs một liều lượng tương đương với 6 mg/kg cơ thể thông quacác tĩnh mạch bên đuôi. Máu mẫu (200 ll) được thu thập tại khác nhauthời gian học từ các đám rối retro-quỹ đạo và thu thập huyết tương(5000 g, 12 phút) đã được đông lạnh xuống. Axit axetic băng (50 ll)đã được thêm vào các mẫu huyết tương giảm hydro kết giữanucleosides và protein. Acetonitrile (1 ml) (HPLC grade)đã được thêm vào các mẫu plasma, mà sau đó trộn lẫn vortexvà ly 900 g cho 15 phút ở 4 C. Supernatantđã được gỡ bỏ và được thu thập trong một ống kính và acetonitrile (1 ml)đã được thêm vào miếng. Ba chu kỳ của cơn lốc cách trộn và sốthủ tục đã được thực hiện. Các supernatants đãtòi, bốc hơi để khô dưới thông lượng nitơ tại 42 C(thermostated water bath) và được lưu trữ tại 80 C. Trước khi RP-HPLCphân tích, dư được tái treo trong nước (1 ml, HPLClớp), ủ cho 5 phút ở 37 C và sau đó ly tại12.000 g cho 15 phút ở 20 C. Supernatant đã được gỡ bỏ,lọc qua một 0.22lmpore bộ lọc ống tiêm kích thước Anotop 10(Tráng nhựa Whatman, SpBiodistribution nghiên cứu đã được thực hiện trên khối u mangtỷ Balb/c con chuột. Orthotopic sửa đổi mô hình của khối u phổiđược phát triển trên chuột như trước đó được báo cáo (Garbuzenko et al.,Năm 2010). một thời gian ngắn, các tế bào A549 transfected với luciferase (5-8 106)đã được resuspended trong 0.1 mL RPMI vừa có chứa 20%FBS, trộn với 5 lM EDTA và quản lý intratracheally đểphổi chuột thông qua một ống thông. Nó đã được chỉ ra rằng một sự phá vỡ nhỏbiểu mô phổi hoặc lớp chất bởi coadministrationcủa EDTA cho phép tốt hơn đáng kể khối u engraftment.Bốn tuần sau khi instillation của tế bào khối u, những con chuộtsử dụng cho biodistribution học. Biodistribution của thuốc làxác định, với một chút sửa đổi trước đó như báo cáo (Yoovà Park, 2004), để nghiên cứu sự phân bố của thuốc trong các cơ quan khác nhau.Hai mươi bảy khỏe mạnh Balb/c con chuột đã được lựa chọn và chiathành ba nhóm chín con chuột mỗi nhóm cho miễn phí đá quý, đá quýnạp-CTS/PEG và CTS/PEG-AA NPs. đồng bằng đá quý, đá QUÝ loadedCTS/PEGvà NPs CTS/PEG-AA được quản lý thông qua các tĩnh mạch đuôitrong một liều lượng tương đương với 18 mg/kg trọng lượng cơ thể. Ba con vật từmỗi nhóm đã hy sinh tại 2, 12, và 24 h và cơ quan khác nhaukhối lượng như trái tim, gan, lá lách và thận được thu thậpvà rửa sạch với nước muối; và nặng trước homogenization ởdung dịch muối. Mẫu mô được làm mát bằng trên băng sau homogenizationthủ tục; homogenate được sau đó ly 19.000 gcho 12 phút Methanol và acetonitrile đã được thêm vào supernatant(1:1) để kết tủa protein không mong muốn; mẫu được ly(19.000 g, 10 min) như mô tả ở trên. Các aliquots đãassayed cho đá quý cấp bằng cách sử dụng RP-HPLC để ước tính tổng số tiềnđá quý đã được thực hiện bằng cách sử dụng phương pháp RP HPLC theo cácphương pháp được đề cập trong phần 2.3.2ringfield Mill, Vương Quốc Anh) và được đặt trong 4 ml HPLC thủy tinhlọ để phân tích xác định. Các phát hiện của Gemcitabine tronghuyết thanh được thực hiện bằng cách sử dụng một RBiodistribution nghiên cứu được thực hiện trên khối u mangtỷ Balb/c con chuột. Orthotopic sửa đổi mô hình của khối u phổiđược phát triển trên chuột như trước đó được báo cáo (Garbuzenko et al.,Năm 2010). một thời gian ngắn, các tế bào A549 transfected với luciferase (5-8 106)đã được resuspended trong 0.1 mL RPMI vừa có chứa 20%FBS, trộn với 5 lM EDTA và quản lý intratracheally đểphổi chuột thông qua một ống thông. Nó đã được chỉ ra rằng một sự phá vỡ nhỏbiểu mô phổi hoặc lớp chất bởi coadministrationcủa EDTA cho phép tốt hơn đáng kể khối u engraftment.Bốn tuần sau khi instillation của tế bào khối u, những con chuộtsử dụng cho biodistribution học. Biodistribution của thuốc làxác định, với một chút sửa đổi trước đó như báo cáo (Yoovà Park, 2004), để nghiên cứu sự phân bố của thuốc trong các cơ quan khác nhau.Hai mươi bảy khỏe mạnh Balb/c con chuột đã được lựa chọn và chiathành ba nhóm chín con chuột mỗi nhóm cho miễn phí đá quý, đá quýnạp-CTS/PEG và CTS/PEG-AA NPs. đồng bằng đá quý, đá QUÝ loadedCTS/PEGvà NPs CTS/PEG-AA được quản lý thông qua các tĩnh mạch đuôitrong một liều lượng tương đương với 18 mg/kg trọng lượng cơ thể. Ba con vật từmỗi nhóm đã hy sinh tại 2, 12, và 24 h và cơ quan khác nhaukhối lượng như trái tim, gan, lá lách và thận được thu thậpvà rửa sạch với nước muối; và nặng trước homogenization ởdung dịch muối. Mẫu mô được làm mát bằng trên băng sau homogenizationthủ tục; homogenate được sau đó ly ở phương pháp HPLC 19P như đã đề cập trongPhần 2.3, và các thông số Pharmacokinetic từ ma túymức độ huyết thanh đã được xác định bởi Kinetica phần mềm phiên bản 5.2.6.2.

Kết quả (Việt) 2:

Nanocarrier cuốn tiểu thuyết này đã được triển khai để nghiên cứu ảnh hưởng của nó trên
sinh khả dụng của thuốc, và hồ sơ do dược động học của
thuốc đã được chắc chắn xác định (Paolino et al., 2010). Ba nhóm
ba con vật được sử dụng trong nghiên cứu này. Nền này
chuột căng thẳng đã được thực Plain GEM, GEM nạp-CTS / PEG
và CTS / PEG-AA NP tương đương liều 6 mg / kg cơ thể qua
tĩnh mạch đuôi bên. Các mẫu máu (200 ll) được thu thập tại khác nhau
lần của nghiên cứu từ các đám rối hố mắt và plasma thu
(5000 g, 12 phút) đã bị đóng băng xuống. Axit axetic (50 ll)
đã được thêm vào mẫu huyết tương giảm liên kết hydro giữa các
nucleoside và protein. Acetonitril (1 ml) (HPLC grade)
đã được thêm vào mẫu huyết tương, mà là sau đó xoáy trộn
và ly tâm ở 900 g trong 15 phút ở 4 C. nổi
đã được gỡ bỏ và thu vào ống kính và acetonitril (1 ml)
là bổ sung vào thức ăn viên. Ba chu kỳ trộn xoáy ly tâm
thủ tục đã được thực hiện. Các nước nổi đã được
gộp lại, bốc hơi đến khô dưới dòng nitơ ở 42 C
(tắm nước thermostated) và bảo quản ở 80 C. Trước khi RP-HPLC
phân tích, phần dư được tái lơ lửng trong nước (1 ml, HPLC
grade), ủ trong 5 phút ở 37 C và sau đó ly tâm ở
12.000 g trong 15 phút ở 20 C. nổi đã được gỡ bỏ,
lọc qua một kích thước 0.22lmpore Anotop 10 lọc ống
(Whatman, nghiên cứu SpBiodistribution được thực hiện trên khối u mang
nữ Balb chuột / c. Modified mô hình chiều thẳng của khối u phổi
đã được phát triển trên chuột như thông báo trước đó (Garbuzenko et al.,
2010). Tóm lại, các tế bào A549 transfected với luciferase (5-8 106
)
đã được lơ lửng trong 0,1 ml dung dịch vừa RPMI chứa 20%
FBS, trộn với 5 LM EDTA và quản intratracheally đến
phổi của chuột thông qua một ống thông. Nó đã được chỉ ra rằng một sự gián đoạn nhẹ
của biểu mô phổi hoặc các lớp bề mặt do việc dùng chung
của EDTA phép cấy ghép khối u tốt hơn đáng kể.
Bốn tuần sau khi nhỏ thuốc của các tế bào khối u, những con chuột được
sử dụng để nghiên cứu biodistribution. Biodistribution của thuốc đã được
xác định, với những thay đổi nhỏ như báo cáo trước đó (Yoo
và Park, 2004), để nghiên cứu sự phân bố của thuốc trong các cơ quan khác nhau.
Hai mươi bảy Balb / c chuột khỏe mạnh đã được lựa chọn và được chia
thành ba nhóm của chín con chuột mỗi nhóm cho GEM miễn phí, GEM
nạp-CTS / PEG và CTS / PEG-AA NP. GEM Plain, GEM loadedCTS / PEG
và CTS / PEG-AA NP được quản lý thông qua tĩnh mạch đuôi
ở một liều lượng tương đương với 18 mg / kg trọng lượng cơ thể. Ba loài động vật từ
mỗi nhóm đã hy sinh vào lúc 2, 12, và 24 giờ, và cơ quan khác nhau
quần chúng như tim, gan, lá lách và thận đã được thu thập
và rửa sạch với nước muối; và cân trước khi đồng nhất trong
dung dịch muối. Mẫu mô được làm lạnh trên băng sau khi đồng nhất
thủ tục; các đồng chất sau đó được ly tâm ở 19.000 g
trong 12 phút. Methanol và acetonitrile đã được thêm vào các bề
(1: 1) để kết tủa protein không mong muốn; mẫu được ly tâm
(19.000 g, 10 phút) như mô tả ở trên. Các phần phân ước đã được
kiểm định về mức độ GEM sử dụng RP-HPLC để ước tính tổng số tiền
của GEM được thực hiện bằng phương pháp RP-HPLC theo
phương pháp nêu tại mục 2.3.
2ringfield Mill, Vương quốc Anh) và được đặt trong 4 ml HPLC kính
lọ để xác định phân tích . Phát hiện Gemcitabine trong
huyết thanh đã được thực hiện bằng cách sử dụng RBiodistribution nghiên cứu được thực hiện trên khối u mang
nữ Balb chuột / c. Thay đổi mô hình chiều thẳng của khối u phổi
đã được phát triển trên chuột như thông báo trước đó (Garbuzenko et al.,
2010). Tóm lại, các tế bào A549 transfected với luciferase (5-8 106
)
đã được lơ lửng trong 0,1 ml dung dịch vừa RPMI chứa 20%
FBS, trộn với 5 LM EDTA và quản intratracheally đến
phổi của chuột thông qua một ống thông. Người ta thấy rằng một sự gián đoạn nhẹ
của biểu mô phổi hoặc các lớp bề mặt do việc dùng chung
của EDTA phép cấy ghép khối u tốt hơn đáng kể.
Bốn tuần sau khi nhỏ thuốc của các tế bào khối u, con chuột này được
sử dụng để nghiên cứu biodistribution. Biodistribution của thuốc đã được
xác định, với những thay đổi nhỏ như báo cáo trước đó (Yoo
và Park, 2004), để nghiên cứu sự phân bố của thuốc trong các cơ quan khác nhau.
Hai mươi bảy Balb / c chuột khỏe mạnh đã được lựa chọn và được chia
thành ba nhóm của chín con chuột mỗi nhóm cho GEM miễn phí, GEM
nạp-CTS / PEG và CTS / PEG-AA NP. GEM Plain, GEM loadedCTS / PEG
và CTS / PEG-AA NP được quản lý thông qua tĩnh mạch đuôi
ở một liều lượng tương đương với 18 mg / kg trọng lượng cơ thể. Ba loài động vật từ
mỗi nhóm đã hy sinh vào lúc 2, 12, và 24 giờ, và cơ quan khác nhau
quần chúng như tim, gan, lá lách và thận đã được thu thập
và rửa sạch với nước muối; và cân trước khi đồng nhất trong
dung dịch muối. Mẫu mô được làm lạnh trên băng sau khi đồng nhất
thủ tục; các đồng chất sau đó được ly tâm ở phương pháp 19P-HPLC như đã đề cập trong
phần 2.3, và các thông số dược động học khác từ thuốc
nồng độ huyết thanh được xác định bằng phiên bản phần mềm Kinetica 5.
2.6.2.