ABSTRACT: In this work, a novel met

ABSTRACT: In this work, a novel method was established to isolate and purify Human plasminogen Kringle 5 (HPK5) as a histidinetagged
fusion protein expressed in Escherichia coli BL21 (DE3). This method consisted of sample extraction using a Ni-chelated
Sepharose Fast-Flow affinity column, ammonium sulfate salting-out and Sephadex G-75 size-exclusion column in turn. The purity
analysis by SDS–PAGE, high-performance size-exclusion and reversed-phase chromatographies showed that the obtained

recombinant fusion HPK5 was homogeneous and its purity was higher than 96%; the activity analysis by chorioallantoic
membrane model of chicken embryos revealed that the purified recombinant HPK5 exhibited an obvious anti-angiogenic activity
under the effective range of 5.0–25.0 μg/mL. Through this procedure, about 19mg purified recombinant fusion HPK5 can be
obtained from 1 L of original fermentation solution. Approximate 32% of the total recombinant fusion HPK5 can be captured
and the total yield was approximately 11%. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.

Kết quả (Việt) 1:

Tóm tắt: Trong công việc này, một phương pháp mới lạ được thành lập để cô lập và tinh chế của con người plasminogen Kringle 5 (HPK5) như là một histidinetagged
phản ứng tổng hợp protein bày tỏ trong Escherichia coli BL21 (DE3). Phương pháp này bao gồm khai thác mẫu bằng cách sử dụng một Ni sản chelated
Sepharose nhanh-dòng chảy ái lực cột, amoni sulfat ướp muối-out và Sephadex G-75 loại trừ kích thước cột lần lượt. Độ tinh khiết
phaân tích cuûa phaân SDS–PAGE, hiệu suất cao kích thước-loại trừ và đảo ngược, giai đoạn chromatographies đã chỉ ra rằng các thu được

tái tổ hợp fusion HPK5 là đồng nhất và độ tinh khiết của nó là cao hơn 96%; phân tích hoạt động bằng chorioallantoic
màng mô hình của gà phôi tiết lộ rằng HPK5 tái tổ hợp tinh khiết trưng bày một hoạt động rõ ràng chống-angiogenic
dưới tầm bắn hiệu quả của 5.0–25.0 μg/mL. Thông qua thủ tục này, khoảng 19mg tinh khiết tái tổ hợp nhiệt hạch HPK5 có thể
thu được từ 1 L ban đầu lên men giải pháp. Khoảng 32% của tất cả tái tổ hợp fusion HPK5 có thể được chụp
và năng suất tất cả là khoảng 11%. Bản quyền © năm 2013 John Wiley & con trai, Ltd.

Kết quả (Việt) 2:

TÓM TẮT: Trong nghiên cứu này, một phương pháp mới được thành lập để cách ly và làm sạch plasminogen Nhân Kringle 5 (HPK5) như là một histidinetagged
protein phản ứng tổng hợp thể hiện trong Escherichia coli BL21 (DE3). Phương pháp này bao gồm việc khai thác sử dụng một mẫu Ni-chelated
cột Sepharose nhanh-Flow mối quan hệ, muối ammonium sulfate-out và Sephadex G-75 kích thước loại trừ cột lần lượt. Độ tinh khiết
phân tích bởi SDS-PAGE, hiệu suất cao kích thước loại trừ và chromatographies giai đoạn đảo ngược cho thấy được phản ứng tổng hợp tái tổ hợp HPK5 là đồng nhất và độ tinh khiết của nó là cao hơn 96%; phân tích hoạt động của chorioallantoic mô hình màng tế bào của phôi gà tiết lộ rằng tinh khiết HPK5 tái tổ hợp trưng bày một hoạt động chống tạo mạch rõ ràng thuộc phạm vi hiệu quả của 5,0-25,0 mg / ml. Thông qua thủ tục này, khoảng 19mg tinh khiết kết hợp tái tổ hợp HPK5 có thể được lấy từ 1 L dung dịch lên men ban đầu. Xấp xỉ 32% tổng HPK5 hợp tái tổ hợp có thể được bắt và tổng sản lượng đạt xấp xỉ 11%. Bản quyền © 2013 John Wiley & Sons, Ltd