Mô miễn dịch Các thủ tục miễn dịch dựa trên Janjatović et al. (2008). Các mô ruột hồi nhúng được khúc tại 5 mm và được đặt trên microslides. Chống gen hồi cho bạch cầu trung tính ở lợn đã được thực hiện bằng cách nung nóng các slide trong 10 mmol / L của sodium citrate solu- tion (pH 6.0) cho 20 phút trong lò vi sóng, trong khi đó đối với các đại thực bào ở lợn đã được điều trị bằng 0,1% trypsin trong 20 phút. Hoạt động peroxidase đã bị chặn bằng cách xử lý các slide với 0,3% dung dịch hydrogen peroxide tion solu- trong 30 phút ở nhiệt độ phòng. Slides sau đó lần lượt là ủ trong 30 phút với neutro- lợn kháng thể phil-PM1 cụ thể (BMA Biomedicals, Augst, Thụy Sĩ) pha loãng 1: 200 với PBS hoặc lợn vĩ mô thực khuẩn kháng thể đặc hiệu MAC387 (Abcam, Cambridge, MA) pha loãng 1: 1000 với PBS. Kháng thể ràng buộc được hình dung bằng cách sử dụng phức tạp avidin-biotin, và các diaminobenzidine (DAB) nhiễm sắc (Biogenex, mont Fre-, CA). Hematoxylin (Biogenex) đã được áp dụng như một vết truy cập. Slides ủ mà không tibodies An- chính, nhưng với PBS đã được sử dụng như điều khiển âm. Hình ảnh đã được chụp (Digital Hệ thống Bệnh NanoZoomer; Hamamatsu Co.), và tất cả các phép đo được thực hiện trong phần mềm NDP.view liên quan. Mười lăm thẳng và tích hợp vi nhung mao ruột hồi đã được chọn để đo lường mức độ surement. Các đơn vị là số lượng các tế bào trên mỗi milimet vuông.
đang được dịch, vui lòng đợi..