By contrast, the 5'-3' exonuclease

By contrast, the 5'-3' exonuclease activity often present in DNA polymerase enzymes is often undesired in a particular application since it may digest nucleic acids, including primers, that have an unprotected 5' end. Thus, a thermostable DNA polymerase with an attenuated 5'-3' exonuclease activity, or in which such activity is absent, is also a desired characteristic of an enzyme for biochemical applications. Various DNA polymerase enzymes have been described where a modification has been introduced in a DNA polymerase which accomplishes this object. For example, the Klenow fragment of E. coli DNA polymerase I can be produced as a proteolytic fragment of the holoenzyme in which the domain of the protein controlling the 5'-3' exonuclease activity has been removed. The Klenow fragment still retains the polymerase activity and the 3'-5' exonuclease activity. Barnes, supra, and Gelfund et al., U.S. Pat. No. 5,079,352 have produced 5'-3' exonuclease-deficient recombinant Taq DNA polymerases. Ishino et al., EPO Publication No. 0517418A2, have produced a 5'-3' exonuclease-deficient DNA polymerase derived from Bacillus caldotenax.

Kết quả (Việt) 1:

Ngược lại, 5' - 3' exonuclease hoạt động thường hiện diện trong DNA polymerase enzyme là thường không mong muốn trong một ứng dụng cụ thể kể từ khi nó có thể tiêu hóa các axit nucleic, bao gồm cả lớp lót, trong đó có một không được bảo vệ 5' kết thúc. Vì vậy, một các ADN polymerase với một loại 5' - 3' exonuclease hoạt động, hoặc trong đó hoạt động như vậy là vắng mặt, cũng là một đặc tính mong muốn của một loại enzyme cho sinh hóa ứng dụng. Các ADN polymerase enzym đã mô tả nơi mà một sửa đổi đã được giới thiệu trong một DNA polymerase mà hoàn thành đối tượng này. Ví dụ, các đoạn Klenow của E. coli DNA polymerase tôi có thể được sản xuất như một mảnh proteolytic của holoenzyme trong đó tên miền của protein kiểm soát các hoạt động của exonuclease 5' - 3' đã được gỡ bỏ. Đoạn Klenow vẫn còn giữ lại các hoạt động polymerase và các hoạt động của exonuclease 3' - 5'. Barnes, siêu, và Gelfund et al., Hoa Kỳ Pat. No. 5,079,352 đã sản xuất 5' - 3' exonuclease thiếu tái tổ hợp Taq DNA polymerase. Ishino et al., EPO xuất bản số 0517418A2, đã sản xuất một 5' - 3' thiếu exonuclease DNA polymerase từ trực khuẩn caldotenax.

Kết quả (Việt) 2:

Ngược lại, 5'-3 'exonuclease hoạt động thường xuyên có mặt trong các enzym DNA polymerase thường không mong muốn trong một ứng dụng đặc biệt vì nó có thể tiêu hóa axit nucleic, trong đó có mồi, có một không được bảo vệ 5' cuối. Như vậy, một polymerase DNA thermostable với một hoạt động 5'-3 'exonuclease giảm độc lực, hoặc trong đó hoạt động như vắng mặt, cũng là một đặc tính mong muốn của một enzyme cho các ứng dụng sinh hóa. Enzyme polymerase DNA khác nhau đã được mô tả nơi sửa đổi đã được giới thiệu trong một polymerase DNA mà hoàn thành đối tượng này. Ví dụ, đoạn Klenow của E. coli polymerase DNA tôi có thể được sản xuất như là một đoạn phân hủy protein của các holoenzyme trong đó miền của protein kiểm soát các hoạt động 5'-3 'exonuclease đã được gỡ bỏ. Các Klenow mảnh vẫn giữ lại các hoạt động polymerase và 3'-5 'exonuclease hoạt động. Barnes, supra, và Gelfund et al., Mỹ Pat. Số 5.079.352 đã sản xuất 5'-3 'Taq polymerase DNA tái tổ hợp exonuclease thiếu. Ishino et al., EPO xuất bản số 0517418A2, đã sản xuất một polymerase DNA 5'-3 'exonuclease thiếu nguồn gốc từ vi khuẩn Bacillus caldotenax.