factors, 0.6 mL min21 was found to

factors, 0.6 mL min21 was found to be the most suitable choice for further discussion.


Optimization of extraction conditions The accurate choice of extraction solvent is extremely important for extracting fucoidan and laminarin from brown seaweeds. As
shown in Figure 3, the amounts of fucoidan and laminarin ex- tracted with 0.1 mol L21 HCl were higher than those extracted
with water or other acids. Therefore, hydrochloric acid was used as the solvent in the following optimization.
The solvent concentration is another factor that can affect the extraction efftciency. The acid concentration affects the hydroly- sis ratio of polysaccharides. Figure 4 shows that the amounts of both fucoidan and laminarin extracted were relatively small when the acid concentration was extremely low. At the same time, a higher acid concentration resulted in a smaller amount of fucoidan detected because of hydrolysis. Therefore, a 0.10-M

hydrochloric acid solution was more suitable as the extract solvent.
Heating was carried out from 40 to 908C to determine the op-
timal temperature. As shown in Figure 5, the amounts of fucoidan and laminarin extracted increased until the temperature reached 808C, and the levels of the two polysaccharides began to decrease with increasing temperature.
The sample-to-solvent ratio is also another critical factor af- fecting the amounts of fucoidan and laminarin extracted. A series of sample-to-solvent ratios were examined, as shown in Figure 6. No obvious changes in the amounts of fucoidan and laminarin ex- tracted were observed, and the level of these polysaccharides de- creased with the increasing ratio. A lower sample-to-solvent ratio appeared to be more suitable for extraction. Therefore, a sample-to-solvent ratio of 1:30 was considered the appropriate extraction ratio.
From the variation trends of two polysaccharides shown in Figure 7, it can be concluded that time plays a critical role in breaking the glucosidic bonds. The amount of laminarin
increased after heating for 4 h, and the amount began to decrease thereafter, while at the same time, the amount of fucoidan increased instantly and the growth rate decreased gradually. As a result, 4 h was found to be sufftcient under economic considerations.


Discussion
Optimization of chromatographic separation conditions SEC is an excellent method for separating macromolecules ac- cording to their size or molecular weight. The mobile phase should be chosen carefully considering the existence of polar ionic groups in the stationary phase used in SEC. This suggests that there is no sample loss for SEC chromatography, but for aqueous SEC columns, the elution efftciency can be affected by a range of effects, such as molecular adsorption, ion exclusion and aggregate formation (14). For SEC chromatography, the fol- lowing basic conditions should be satisfted: (i) the sample should

Figure 8. The calibration curves of two standard polysaccharides.


be soluble in the selected mobile phase and the performance of the SEC stationary phase is not destroyed, (ii) there are no inter- actions between the sample and stationary phase and (iii) the re- sponse signals generated by the detector should be strong enough (15). The flow rate of the mobile phase can more or less affect the diffusion of the polysaccharides in the chromato- graphic column.

Optimization of extraction conditions
Three traditional methods are used to extract polysaccharides: heating water extraction method, diluted acid extraction method and dilute alkali extraction method. In general, most polysaccha- rides can be extracted with hot water or dilute alkali solutions (16). On the other hand, in the present experiment, dilute alkali solutions should not be used as the solvent to avoid dissolving an interferential polysaccharide, such as alginate.
Both the acid concentration and temperature affect the hydro- lysis ratio of polysaccharides. A lower temperature can only make the extracellular polysaccharides dissolve in the solvent, which means that it was difftcult to prepare polysaccharides exposed to the solvent. On the other hand, glucosidic bonds will break if the temperature is too high. From a combination of theory
and experimental data, 808C was selected as the optimal temper-
ature. As important as temperature, time has an intense effect on the polysaccharides decomposition ratio.

Kết quả (Việt) 1:

yếu tố cách 0.6 mL min21 được tìm thấy là sự lựa chọn thích hợp nhất để thảo luận thêm.Tối ưu hóa các điều kiện khai thác các sự lựa chọn chính xác trong chiết xuất dung môi là cực kỳ quan trọng đối với chiết xuất fucoidan và laminarin từ tảo, rau biển màu nâu. Nhưminh họa trong hình 3, số tiền của fucoidan và laminarin ex-tracted với 0.1 mol L21 HCl đã cao hơn so với chiết xuấtvới nước hay axít khác. Vì vậy, axít HCl được sử dụng làm dung môi trong việc tối ưu hóa sau.Nồng độ dung môi là một yếu tố có thể ảnh hưởng đến khai thác efftciency. Nồng độ axit ảnh hưởng đến tỷ lệ hydroly-sis polysaccharides. Hình 4 cho thấy rằng số tiền của fucoidan và laminarin chiết xuất đã tương đối nhỏ khi nồng độ acid là rất thấp. Cùng lúc đó, nồng độ axit cao đã dẫn đến một số lượng nhỏ hơn của fucoidan phát hiện do thủy phân. Vì vậy, 0,10 M axít clohiđric giải pháp là phù hợp hơn như chiết xuất dung môi.Hệ thống sưởi được thực hiện từ 40 đến 908C để xác định op-timal nhiệt độ. Như minh hoạ trong hình 5, số tiền của fucoidan và laminarin chiết xuất tăng lên cho đến khi đạt đến nhiệt độ 808C, và mức độ của polysaccharides hai bắt đầu giảm với sự gia tăng nhiệt độ.Tỷ lệ mẫu dung môi cũng là một yếu tố quan trọng af-fecting một lượng fucoidan và laminarin được chiết xuất. Một loạt các tỷ lệ mẫu dung môi đã được kiểm tra, như minh hoạ trong hình 6. Không có thay đổi rõ ràng trong số tiền của fucoidan và laminarin ex-tracted đã được quan sát, và mức độ các polysaccharides de - lằn nhăn với tỉ lệ ngày càng tăng. Một tỷ lệ thấp hơn mẫu với dung môi đã xuất hiện để phù hợp hơn cho khai thác. Do đó, một tỷ lệ mẫu dung môi 1:30 được coi là tỷ lệ thích hợp khai thác.Từ những xu hướng biến thể của hai polysaccharides Hiển thị ở hình 7, nó có thể kết luận rằng thời gian đóng một vai trò quan trọng trong việc phá vỡ các liên kết glucosidic. Số lượng laminarintăng lên sau khi, Hệ thống sưởi cho 4 h, và số tiền đã bắt đầu giảm sau đó, trong khi tại cùng một thời gian, số lượng fucoidan tăng ngay lập tức và tốc độ tăng trưởng giảm dần. Kết quả là 4 h được tìm thấy là sufftcient dưới xem xét kinh tế.Thảo luậnTối ưu hóa các điều kiện tách chromatographic SEC là một phương pháp tuyệt vời để tách đại phân tử ac-cording với kích thước hoặc trọng lượng phân tử của họ. Giai đoạn di động nên được lựa chọn cẩn thận xem xét sự tồn tại của nhóm ion cực trong pha tĩnh sử dụng trong các SEC. Điều này cho thấy rằng không không có tổn thất mẫu cho sắc ký SEC, nhưng cho dung dịch SEC cột, elution efftciency có thể bị ảnh hưởng bởi một loạt các hiệu ứng, chẳng hạn như phân tử hấp phụ, ion loại trừ và tổng hợp hình thành (14). Đối với sắc ký SEC, fol-lowing điều kiện cơ bản phải là satisfted: (i) mẫu nên Hình 8. Các đường cong hiệu chuẩn của hai tiêu chuẩn polysaccharides.được hòa tan trong giai đoạn lựa chọn điện thoại di động và hiệu suất của pha tĩnh SEC không bị phá hủy, (ii) không có không có inter-hành động giữa các mẫu và văn phòng phẩm giai đoạn và (iii) re-sponse tín hiệu được tạo ra bởi các máy dò nên mạnh đủ (15). Với tỷ lệ flow giai đoạn di động nhiều hay ít có ảnh hưởng đến sự khuếch tán của polysaccharides trong cột chromato đồ họa.Tối ưu hóa các điều kiện khai thácBa phương pháp truyền thống được sử dụng để trích xuất các polysaccharides: Hệ thống các phương pháp khai thác nước, pha loãng phương pháp chiết axít và kiềm khai thác phương pháp pha loãng. Nói chung, hầu hết polysaccha-rides có thể được tách ra với nước nóng hoặc pha loãng giải pháp kiềm (16). Mặt khác, trong hiện tại thử nghiệm, pha loãng kiềm giải pháp không nên được sử dụng làm dung môi để tránh giải thể một polysacarit interferential, chẳng hạn như Nitrite NaNO2.Nồng độ axit và nhiệt độ ảnh hưởng đến tỷ lệ thủy-lysis polysaccharides. Nhiệt độ thấp chỉ có thể làm cho ngoại bào polysaccharides hòa tan trong dung môi có nghĩa là nó đã là difftcult để chuẩn bị tiếp xúc với dung môi polysaccharides. Mặt khác, các glucosidic trái phiếu sẽ phá vỡ nếu nhiệt độ quá cao. Từ sự kết hợp của lý thuyếtvà dữ liệu thực nghiệm, 808C đã được lựa chọn như tính khí tối ưu-ature. Quan trọng như nhiệt độ, thời gian có hiệu lực dữ dội vào tỷ lệ phân hủy polysaccharides.

Kết quả (Việt) 2:

yếu tố, 0,6 ml min21 đã được tìm thấy là sự lựa chọn thích hợp nhất để thảo luận thêm.


Tối ưu hóa các điều kiện khai thác Sự lựa chọn chính xác của dung môi chiết là cực kỳ quan trọng cho việc trích xuất fucoidan và laminarin từ rong nâu. Như
thể hiện trong hình 3, lượng Fucoidan và laminarin nghiệm hút được 0,1 mol HCl L21 cao hơn so với chiết xuất
bằng nước hoặc axit khác. Do đó, axit hydrochloric được sử dụng làm dung môi trong việc tối ưu hóa sau đây.
Nồng độ dung môi là một yếu tố khác có thể ảnh hưởng đến efftciency khai thác. Nồng độ axit ảnh hưởng đến tỷ lệ sis hydroly- của polysaccharides. Hình 4 cho thấy rằng số tiền của cả hai Fucoidan và laminarin chiết xuất tương đối nhỏ khi nồng độ axit là rất thấp. Đồng thời, nồng độ axit cao hơn dẫn đến một số lượng nhỏ hơn của fucoidan phát hiện vì quá trình thủy phân. Do đó, một 0,10-M

dung dịch axit hydrochloric là phù hợp hơn như chiết xuất dung môi.
Sưởi được thực hiện từ 40 đến 908C để xác định op-
nhiệt độ timal. Như thể hiện trong hình 5, lượng Fucoidan và laminarin đã trích tăng cho đến khi nhiệt độ đạt tới 808C, và các cấp của hai polysaccharides bắt đầu giảm với nhiệt độ ngày càng tăng.
Tỷ lệ mẫu-to-dung môi cũng là một yếu tố quan trọng bị ảnh hưởng đến các lượng Fucoidan và laminarin trích xuất. Một loạt các tỷ lệ mẫu-to-dung môi đã được kiểm tra, như thể hiện trong hình 6. Không có thay đổi rõ ràng trong các khoản của fucoidan và laminarin nghiệm hút được quan sát thấy, và mức độ của các polysaccharides de- nhăn với tỷ lệ ngày càng tăng. Một tỷ lệ mẫu-to-dung môi thấp dường như là phù hợp hơn cho khai thác. Do đó, tỷ lệ mẫu-to-dung môi của 1:30 đã được coi là tỷ lệ khai thác phù hợp.
Từ những xu hướng biến động của hai polysaccharides thể hiện trong hình 7, có thể kết luận rằng thời gian đóng một vai trò quan trọng trong việc phá vỡ liên kết glucosidic. Lượng laminarin
tăng sau khi sưởi ấm trong 4 giờ, và số tiền đã bắt đầu giảm sau đó, trong khi tại cùng một thời điểm, lượng Fucoidan tăng ngay lập tức và tốc độ tăng trưởng giảm dần. Kết quả là, 4 h đã được tìm thấy sẽ được sufftcient dưới cân nhắc kinh tế.


Thảo luận
Tối ưu hóa các điều kiện tách sắc ký SEC là một phương pháp tuyệt vời để tách phân tử chiếm trí theo các kích thước hoặc trọng lượng phân tử. Giai đoạn di động nên được lựa chọn một cách cẩn thận xem xét sự tồn tại của các nhóm ion cực trong pha tĩnh sử dụng trong SEC. Điều này cho thấy rằng không có mất mẫu cho SEC sắc ký, nhưng đối với cột SEC chứa nước, các efftciency rửa giải có thể bị ảnh hưởng bởi một loạt các hiệu ứng, chẳng hạn như khả năng hấp thụ phân tử, loại bỏ ion và hình tổng hợp (14). Đối với SEC sắc ký, các điều kiện cơ bản rống fol nên satisfted: (i) mẫu nên

Hình 8. Các đường cong hiệu chuẩn của hai polysaccharides chuẩn.


Được hòa tan trong pha động lựa chọn và thực hiện các pha tĩnh SEC không bị tiêu diệt, (ii) không có các hành động liên giữa mẫu và pha tĩnh và (iii) các tín hiệu ứng phó được tạo ra bởi máy dò nên đủ mạnh (15). Tỷ lệ ow fl của pha động nhiều hơn hoặc ít hơn có thể ảnh hưởng đến sự khuếch tán của các polysaccharides trong cột đồ họa chromato.

Tối ưu hóa các điều kiện khai thác
Ba phương pháp truyền thống được sử dụng để trích xuất polysaccharides: phương pháp chiết nước nóng, pha loãng phương pháp chiết xuất axit và pha loãng khai thác kiềm phương pháp. Nhìn chung, hầu hết cưỡi polysaccha- có thể được chiết xuất bằng nước nóng hoặc pha loãng dung dịch kiềm (16). Mặt khác, trong thí nghiệm, loãng giải pháp kiềm không nên được sử dụng làm dung môi hòa tan để tránh một polysaccharide nhiễu, chẳng hạn như alginate.
Cả hai nồng độ axit và nhiệt độ ảnh hưởng đến tỷ lệ ly giải thủy của polysaccharides. Nhiệt độ thấp chỉ có thể làm cho các polysaccharides bào hòa tan trong dung môi, có nghĩa là nó đã difftcult để chuẩn bị polysaccharides tiếp xúc với dung môi. Mặt khác, glucosidic sẽ phá vỡ nếu nhiệt độ quá cao. Từ sự kết hợp giữa lý thuyết
và thực nghiệm, 808C được chọn làm temper- tối ưu
ature. Cũng quan trọng như nhiệt độ, thời gian ảnh hưởng mãnh liệt về tỷ lệ polysaccharides phân hủy.