may vary between tissues, fruits an

may vary between tissues, fruits and seeds may be (partially) haploid, etc.) a large body of practical experience currently justifies its use (Berdal & Holst-Jensen, 2001; Corbisier et al., 2007; Trapmann, 2006; Trapmann, Corbisier, Schimmel, & Emons, 2010) and its existence as an official recommendation from the European Commission (EC 2004/787/EC, 2004). In animals, there are again several biological facts that complicate the assumption of equivalence between DNA ratio and mass percentage, the most straightforward relating to the nature of muscle tissue. During embryonic development, myoblasts fuse to form multinucleated myo- fibers. Postnatal growth of skeletal muscle happens mainly by increases in length and width of the muscle fibres and not by an increase of the number of muscle fibres (Rehfeldt, Fiedler, Dietl, & Ender, 2000) (and therefore, in the number of cell nuclei). Yet, there is significant postnatal DNA accumulation in muscle tissue (Allen, Merkel, & Young, 1979) in so-far that there appears to be a quite linear relation between the number of nuclei and the muscle mass (Trenkle, DeWitt, & Topel, 1978), relating to the large population of satellite cells that are associated with muscle tissue (Mauro, 1961; Moss & Leblond, 1971). Transferability of the observed DNA percentages to ingredient weight ratios thus seems likely but will have to be confirmed and validated before this assumption can be put to practice in quantifying food and feed for their GM animal content. As an additional complication, ‘fat’ is often regarded as a separate ingredient for certain food products. On DNA basis however, the distinction between different tissues is not readily made and in practice it may only be possible to distinguish between ingredients if they originate from different (animal) species. GM animal product derivatives Next to samples that are either pure meat or have meat as their main ingredient, there are a large number of processed food products that contain animal derivatives (see Table 4 for a list of common ingredients derived from animals). Although the DNA content of food has been of increasing interest to control authorities worldwide, data that show which food or food fractions still contain DNA are not readily available. As a consequence, the degree to which a single animal derivative ingredient is detectable by DNA based methods in a sample (if at all) is currently not known and is likely to differ between products and ingredients. In such cases, the detection of GM animal content and its quantification may be more difficult and/or require specific DNA extraction methods or entirely different approaches. PCR inhibition and DNA degradation Many problems of sensitivity and repeatability in the field of real-time PCR have to do with the quality of the extracted DNA and its ability to sustain an efficient PCR reaction. Maximal reaction efficiency is rarely guaranteed due to the possible presence of so-called PCR inhibitors (Bessetti, 2007) which limit reaction efficiency. These inhibitors generally act by direct interaction with DNA or interference with the polymerases (Opel, Chung, & McCord, 2010). In addition, DNA polymerases have ionic requirements that can be the target of inhibition. These problems are not limited to GM animal samples and strongly depends on where in the processing chain the sampling takes place since the prime source of inhibitors are the samples themselves. In most cases these chemicals are co-extracted with the DNA and additional purification steps are required to reach a sufficient level of DNA purity. Another source of inhibitors are the reagents used during sample processing and DNA extraction. These include high concentrations of KCl, NaCl and other salts, ionic detergents (sodium deoxycholate, sarkosyl, SDS), alcohols (ethanol, isopropanol), phenol, etc. (Bessetti, 2007). In addition to inhibitors, processing of foodstuffs further reduces the DNA quality. Chemical and physical treatment of the products (heat, pH, excessive grinding, etc.) result in random fragmentation of the DNA (Kakihara, Matsufuji, Chino, & Takeda, 2006). This reduction in the average length of the DNA molecules makes their isolation more challenging (Kakihara et al., 2006) and may cause loss of amplification targets, thus decreasing sensitivity of detection and inducing bias in the quantification results (Godalova, Bergerova, & Siekel, 2013). Although there are no direct reasons to suspect the situation will be significantly different in animal samples compared to other food samples, an assessment of which methods work best on which matrices may be necessary to validate the applicability of existing protocols. Especially during the initial stages of testing for GM animals, the adoption of specific extraction methods and the design of standard operating protocols may slow the pace of the laboratory work. Conclusion We have counted at least 74 (on-going) attempts at animal modification, of which abo

Kết quả (Việt) 1:

có thể khác nhau giữa mô, trái cây và hạt giống có thể haploid (một phần), vv..) một cơ thể lớn của kinh nghiệm thực tiễn hiện nay biện minh cho việc sử dụng nó (Berdal & Holst-Jensen, 2001; Corbisier et al., 2007; Trapmann, năm 2006; Trapmann, Corbisier, Schimmel & Emons, 2010) và tồn tại của nó như là một đề nghị chính thức từ Ủy ban châu Âu (EC 2004/787/EC, 2004). Ở động vật, một lần nữa là một vài dữ kiện sinh học phức tạp giả định tương đương giữa DNA tỷ lệ và tỷ lệ phần trăm khối lượng, đơn giản nhất liên quan đến bản chất của các mô cơ. Trong quá trình phát triển phôi thai, myoblasts cầu chì để tạo thành multinucleated myo-sợi. Tốc độ tăng trưởng sau khi sinh của cơ xương xảy ra chủ yếu là do tăng chiều dài và chiều rộng của sợi cơ bắp và không phải bằng cách tăng số lượng sợi cơ (Rehfeldt, Fredler, Dietl, & Ender, 2000) (và do đó, số lượng nhân tế bào). Tuy nhiên, đó là đáng kể sau khi sinh tích lũy DNA trong mô cơ (Allen, Merkel & Young, 1979) trong vì vậy-xa mà có vẻ là một mối quan hệ khá tuyến tính giữa số lượng các hạt nhân và khối lượng cơ bắp (Trenkle, DeWitt, và sân bay Topel, 1978), liên quan đến dân số lớn của các tế bào vệ tinh được liên kết với các mô cơ bắp (Mauro, 1961; Moss & Leblond, 1971). Chuyển nhượng của DNA quan sát tỷ lệ phần trăm để tỷ lệ trọng lượng thành phần như vậy có vẻ như có khả năng nhưng sẽ phải được xác nhận và xác nhận trước khi giả định này có thể được đưa vào thực hành trong định lượng thức ăn và thức ăn cho nội dung động vật GM của họ. Như là một biến chứng thêm, 'fat' thường được coi như một thành phần riêng biệt cho một số sản phẩm thực phẩm. Trên cơ sở DNA Tuy nhiên, sự khác biệt giữa các mô khác nhau không dễ dàng thực hiện và trong thực tế chỉ có thể phân biệt giữa các thành phần, nếu họ có nguồn gốc từ loài khác nhau (động vật). GM động vật sản phẩm dẫn xuất bên cạnh mẫu đó hoặc thịt tinh khiết hoặc có thịt như là thành phần chính của họ, có một số lượng lớn các sản phẩm thực phẩm chế biến có chứa dẫn xuất động vật (xem bảng 4 để có danh sách phổ biến các thành phần có nguồn gốc từ động vật). Mặc dù nội dung DNA của thức ăn đã quan tâm ngày càng tăng để kiểm soát chính quyền trên toàn thế giới, dữ liệu Hiển thị thực phẩm hoặc các phần phân đoạn của thực phẩm mà vẫn chứa ADN là không sẵn có. Kết quả là, mức độ mà một thành phần phái sinh động vật duy nhất được phát hiện bởi DNA Dựa trên phương pháp trong một mẫu (nếu ở tất cả) là hiện nay không biết đến và có khả năng khác nhau giữa các sản phẩm và thành phần. Trong trường hợp phát hiện nội dung động vật GM và định lượng của nó có thể khó khăn hơn và/hoặc yêu cầu cụ thể phương pháp khai thác ADN hoặc phương pháp tiếp cận hoàn toàn khác nhau. Ức chế PCR và DNA xuống cấp nhiều vấn đề về độ nhạy và độ trong lĩnh vực real-time PCR có để làm với chất lượng của các chiết xuất DNA và khả năng của mình để duy trì một phản ứng PCR hiệu quả. Hiệu quả tối đa phản ứng hiếm khi được bảo đảm do sự hiện diện có thể có của cái gọi là ức chế PCR (Bessetti, 2007) mà giới hạn hiệu suất phản ứng. Các chất ức chế thường hành động theo các tương tác trực tiếp với ADN hoặc can thiệp với polymerase (Opel, Chung & McCord, 2010). Ngoài ra, DNA polymerase có ion yêu cầu có thể là mục tiêu của sự ức chế. Những vấn đề này không giới hạn đối với các mẫu động vật GM và mạnh mẽ phụ thuộc vào nơi trong dây chuyền xử lý việc lấy mẫu xảy ra kể từ khi nguồn chất ức chế, thủ tướng chính là các mẫu tự. Trong hầu hết trường hợp các hóa chất được chiết xuất kết hợp với DNA và các bước bổ sung thanh lọc được yêu cầu để đạt được một mức độ đầy đủ của DNA tinh khiết. Một nguồn của chất ức chế là các hoá chất sử dụng trong mẫu chế biến và khai thác DNA. Trong đó có nồng độ cao của KCl, NaCl và muối khác, ion các chất tẩy rửa (natri deoxycholate, sarkosyl, dùng mũi SDS), rượu (ethanol, isopropanol), phenol, vv (Bessetti, 2007). Ngoài việc ức chế, chế biến thực phẩm hơn nữa làm giảm chất lượng ADN. Hóa học và vật lý điều trị do sản phẩm (nhiệt độ, độ pH, quá nhiều mài, vv), các phân mảnh ngẫu nhiên của DNA (Kakihara, Matsufuji, Chino, và Takeda, 2006). Điều này giảm chiều dài trung bình của phân tử ADN làm cho sự cô lập của họ khó khăn hơn (Kakihara et al., 2006) và có thể gây ra mất khuếch đại mục tiêu, do đó làm giảm sự nhạy cảm của phát hiện và gây ra thiên vị trong các kết quả định lượng (Godalova, Bergerova, và Siekel, 2013). Mặc dù không có trực tiếp không có lý do để nghi ngờ tình hình sẽ khác biệt đáng kể trong các mẫu động vật so với các mẫu thực phẩm, đánh giá phương pháp làm việc tốt nhất trên ma trận mà có thể cần thiết để xác nhận các ứng dụng của giao thức sẵn có. Đặc biệt là trong giai đoạn đầu của thử nghiệm cho động vật GM, việc áp dụng các phương pháp khai thác cụ thể và thiết kế tiêu chuẩn giao thức hoạt động có thể làm chậm tốc độ của các công việc phòng thí nghiệm. Kết luận chúng ta có tính ít 74 (đang) nỗ lực tại sửa đổi động vật, mà abo

Kết quả (Việt) 2:

có thể khác nhau giữa các mô, hoa quả và hạt có thể được (một phần) đơn bội, vv) một cơ thể lớn các kinh nghiệm thực tế hiện biện minh cho việc sử dụng nó (Berdal & Holst-Jensen, 2001; Corbisier et al, 2007;. Trapmann, 2006; Trapmann, Corbisier, Schimmel, & Emons, 2010) và sự tồn tại của nó như là một đề nghị chính thức từ Ủy ban châu Âu (EC 2004/787 / EC, 2004). Ở động vật, có lại một số sự kiện sinh học mà làm phức tạp các giả định về sự tương đương giữa tỷ lệ ADN và tỷ lệ phần trăm khối lượng, đơn giản nhất có liên quan đến bản chất của mô cơ. Trong sự phát triển của phôi thai, myoblasts cầu chì để tạo thành sợi myo- đa nhân. tăng trưởng sau sinh của cơ xương xảy ra chủ yếu là do tăng chiều dài và chiều rộng của các sợi cơ và không phải bởi sự gia tăng của số lượng sợi cơ (Rehfeldt, Fiedler, Dietl, & Ender, 2000) (và do đó, trong số các nhân tế bào ). Tuy nhiên, có sự tích lũy DNA sau khi sinh có ý nghĩa trong mô cơ (Allen, Merkel, & Young, 1979) trong cái xa mà dường như có một mối quan hệ khá tuyến tính giữa số lượng của các hạt nhân và khối lượng cơ bắp (TRENKLE, DeWitt, & Topel , 1978), liên quan đến dân số lớn các tế bào vệ tinh có liên quan đến mô cơ (Mauro, 1961; Moss & Leblond, 1971). Khả năng chuyển nhượng của các tỷ lệ phần trăm DNA quan sát để thành phần tỷ lệ trọng lượng như vậy dường như có khả năng nhưng sẽ phải được xác nhận và xác nhận trước khi giả định này có thể được đưa vào thực hành trong việc định lượng thực phẩm và thức ăn cho nội dung động vật chuyển gen. Là một biến chứng thêm, 'béo' thường được coi là một thành phần riêng biệt cho các sản phẩm thực phẩm nào đó. Trên cơ sở DNA Tuy nhiên, sự khác biệt giữa các mô khác nhau là không dễ dàng thực hiện và trong thực tế nó chỉ có thể có thể phân biệt giữa các thành phần nếu họ có nguồn gốc từ các loài (động vật) khác nhau. các dẫn xuất sản phẩm động vật GM Next để mẫu được hoặc thịt tinh khiết hoặc có thịt như là thành phần chính của họ, có một số lượng lớn các sản phẩm thực phẩm chế biến có chứa các dẫn xuất của động vật (xem Bảng 4 cho một danh sách các thành phần phổ biến có nguồn gốc từ động vật). Mặc dù nội dung DNA của thực phẩm đã tăng lãi suất để kiểm soát chính quyền trên toàn thế giới, dữ liệu cho thấy có thức ăn hoặc thực phẩm phân số vẫn còn chứa DNA là không có sẵn. Như một hệ quả, mức độ mà một con vật thành phần phái sinh duy nhất được phát hiện bằng phương pháp dựa trên DNA trong mẫu (nếu có) hiện chưa được biết đến và có thể khác nhau giữa các sản phẩm và nguyên liệu. Trong trường hợp như vậy, việc phát hiện các nội dung động vật biến đổi gen và định lượng của nó có thể khó khăn hơn và / hoặc yêu cầu phương pháp tách chiết DNA cụ thể hoặc cách tiếp cận hoàn toàn khác nhau. ức chế PCR và suy thoái DNA Nhiều vấn đề nhạy cảm và lặp lại trong lĩnh vực PCR thời gian thực có để làm với chất lượng của DNA chiết xuất và khả năng duy trì một phản ứng hiệu quả PCR. hiệu quả phản ứng tối đa là rất hiếm khi được bảo đảm do sự hiện diện có thể có của các chất ức chế PCR cái gọi là (Bessetti, 2007) làm hạn chế hiệu quả phản ứng. Các chất ức chế nói chung hành động bởi sự tương tác trực tiếp với DNA hoặc can thiệp với các polymerase (Opel, Chung, và McCord, 2010). Ngoài ra, polymerase DNA có yêu cầu ion có thể là mục tiêu của sự ức chế. Những vấn đề này không chỉ giới hạn đối với các mẫu động vật biến đổi gen và phụ thuộc mạnh mẽ vào nơi trong dây chuyền chế biến các mẫu diễn ra kể từ khi các nguồn chính của chất ức chế là những mẫu tự. Trong hầu hết các trường hợp, những hóa chất được chiết xuất hợp với DNA và các bước thanh lọc bổ sung cần thiết để đạt được một mức độ đủ độ tinh khiết DNA. Một nguồn các chất ức chế là thuốc thử sử dụng trong quá trình xử lý mẫu và tách chiết DNA. Chúng bao gồm nồng độ cao của KCl, NaCl và muối khác, chất tẩy rửa ion (natri deoxycholate, sarkosyl, SDS), cồn (ethanol, isopropanol), phenol, vv (Bessetti, 2007). Ngoài các chất ức chế, chế biến thực phẩm tiếp tục làm giảm chất lượng DNA. Hóa chất và vật lý trị liệu của sản phẩm (nhiệt, pH, mài quá mức, vv) kết quả trong phân mảnh ngẫu nhiên của DNA (Kakihara, Matsufuji, Chino, & Takeda, 2006). giảm chiều dài trung bình của các phân tử DNA này làm cho cô lập của họ khó khăn hơn (Kakihara et al., 2006) và có thể gây mất tín hiệu khuếch đại, do đó làm giảm độ nhạy cảm phát hiện và gây sai lệch trong kết quả định lượng (Godalova, Bergerova, & Siekel năm 2013). Mặc dù không có lý do để nghi ngờ trực tiếp tình hình sẽ khác nhau đáng kể trong các mẫu động vật so với các mẫu thực phẩm khác, đánh giá về những phương pháp làm việc tốt nhất mà các ma trận có thể cần thiết để xác nhận khả năng áp dụng các giao thức hiện có. Đặc biệt trong giai đoạn đầu của thử nghiệm cho động vật biến đổi gen, việc áp dụng các phương pháp khai thác cụ thể và thiết kế các giao thức vận hành tiêu chuẩn có thể làm chậm tốc độ của công việc trong phòng thí nghiệm. Kết luận Chúng tôi đã đếm được ít nhất là 74 (đang) cố gắng sửa đổi ở động vật, trong đó ABO