Materials and MethodsCulture and Me

Materials and Methods
Culture and Media. A. oryzae NRRL 697 was obtained from the USDA Midwest Area National Center for Agricultural Utilization Research. Working cultures were maintained on potato dextrose agar (Difco) slants. Spore inocula for the fermentation study were prepared from culture grown on rice substrate. A small sample (approximately 1 g) of heavily sporulated rice was collected in a sterile flask. Portions (4-10 mL) of sterile Tween 80 solution (Polysorbate 80, Emulsion Engineering, Sandford, FL; 6 drops per 25 mL of distilled water) were added to the flask and the contents swirled. The spore suspension was decanted to a clean sterile flask, diluted to 106 spores/mL, and then used as a standardized spore inoculum in the fermentation study. The substrate used in fermentation was brown rice (Le Gourmet brand, Rice Mill, Inc., Stuttgart, AK), which contained 76.1% (w/w) total carbohydrate, including ∼10% fiber (cellulose) and the remainder mainly as starch, 7.1% (w/w) protein, 2.3% (w/w) fat, and 0.2% (w/ w) potassium. The moisture content of the raw rice was ∼10%. The rice substrate was prepared by mixing 25 g of brown rice with 14 mL of distilled water in a 250-mL Erlenmeyer flask, covering it with a silicone rubber
sponge closure, and autoclaving for 15 min at 121 °C. After autoclaving, the rice moisture content was ∼40% (w/w) and the pH was ∼6.2. After removal from the autoclave, the flasks were shaken to break up the rice clumps and cooled to room temperature. For larger amounts of the rice substrate, enough number of flasks were prepared and the rice substrate was pooled together into a sterile 600-mL beaker. Static Fermentation. Static solid-state fermentations were carried out in 600-mL beakers, covered with aluminum foil. Each beaker was charged with 25-125 g of rice substrate, with a corresponding bed depth of 1.5-5.5 cm, inoculated with a spore inoculum (1 mL per 25 g of rice), shaken to disperse the inoculum, and then placed in a static incubator at 37 °C. The fermentations were sampled by using two scoopulas turned with their concave surfaces toward each other as a coring device. The scoopulas were inserted into the substrate until the bottom of the beaker was touched, then they were squeezed together and lifted, thereby removing a sample that extended from the surface of the reactor to the bottom. Sampling in this manner allowed retrieval of a sample representative of the entire mass, rather than of just the surface layers. Samples were frozen before protein and enzyme activity assays were performed

Kết quả (Việt) 1:

Vật liệu và phương phápVăn hóa và truyền thông. A. oryzae NRRL 697 nhận được từ Trung tâm quốc gia khu vực miền Trung Tây của USDA cho nghiên cứu nông nghiệp sử dụng. Nền văn hóa làm việc đã được duy trì trên khoai tây dextrose agar (Difco) nghiêng. Spore inocula cho việc nghiên cứu quá trình lên men được chuẩn bị từ các nền văn hóa phát triển trên bề mặt gạo. Một mẫu nhỏ (khoảng 1 g) nặng nề sporulated gạo được thu thập trong một flask vô trùng. Phần (4-10 mL) của giải pháp Tween 80 vô trùng (Polysorbate 80, tan trong kỹ thuật, Sandford, FL; 6 giọt mỗi 25 mL nước cất) được thêm vào flask và nội dung hoà quyện. Spore treo được decanted vào một bình sạch sẽ vô trùng, pha loãng để bào tử 106/mL, và sau đó được sử dụng như một tiêu chuẩn hóa spore inoculum trong nghiên cứu lên men. Bề mặt được sử dụng trong quá trình lên men là gạo nâu (Le Gourmet thương hiệu, gạo Mill, Inc, Stuttgart, AK), chứa 76,1% (w/w) tổng carbohydrate, bao gồm ∼10% chất xơ (cellulose) và phần còn lại chủ yếu là tinh bột, 7,1% (w/w) protein, 2,3% (w/w) chất béo và 0,2% (w / w) kali. Ẩm trong gạo nguyên là ∼10%. Bề mặt gạo đã được chuẩn bị bằng cách trộn 25 g gạo nâu với 14 mL nước cất trong một flask Erlenmeyer 250-mL, bao gồm nó với một cao su siliconesponge đóng cửa, và khử trùng cho 15 phút ở 121 ° C. Sau khi khử trùng, các nội dung độ ẩm gạo đã là ∼40% (w/w) và độ pH là ∼6.2. Sau khi loại bỏ từ nồi hấp, bình các rung động để phá vỡ khối gạo và làm lạnh tới nhiệt độ phòng. Đối với số tiền lớn hơn của bề mặt cơm, đủ số lượng bình đã được chuẩn bị và bề mặt gạo được gộp lại với nhau thành một cốc 600 mL vô trùng. Quá trình lên men tĩnh. Tĩnh trạng thái rắn fermentations đã được thực hiện trong lọ 600 mL, bọc giấy nhôm. Mỗi cốc đã được tính phí với 25-125 g của bề mặt cơm, với độ sâu giường tương ứng 1.5-5,5 cm, tiêm chủng với một spore inoculum (1 mL / 25 g gạo), rung động để giải tán inoculum, và sau đó được đặt trong một lồng ấp tĩnh ở 37 ° C. Các fermentations lấy mẫu bằng cách sử dụng hai scoopulas bật với các bề mặt lõm của họ với nhau như một thiết bị coring. Các scoopulas đã được chèn vào bề mặt cho đến cuối của cốc đã xúc động trước, sau đó họ đã được ép với nhau và nâng, do đó loại bỏ một mẫu kéo dài từ bề mặt của các lò phản ứng để phía dưới. Lấy mẫu theo cách này cho phép thu hồi của một mẫu đại diện của khối lượng toàn bộ, hơn là chỉ các lớp trên bề mặt. Mẫu đã được đông lạnh trước khi protein và enzym hoạt động thử nghiệm đã được thực hiện

Kết quả (Việt) 2:

Vật liệu và phương pháp
Văn hóa và Truyền thông. A. oryzae NRRL 697 được lấy từ Trung tâm Quốc gia USDA Midwest Khu nghiên cứu Sử dụng nông nghiệp. Văn hóa làm việc được duy trì trên thạch đường khoai tây (Difco) slants. Spore inocula cho việc nghiên cứu quá trình lên men đã được chuẩn bị từ nền văn hóa phát triển trên bề mặt gạo. Một mẫu nhỏ (khoảng 1 g) gạo nặng sporulated được thu thập trong một bình khử trùng. Phần (4-10 ml) vô trùng giải pháp Tween 80 (Polysorbate 80, Emulsion Engineering, Sandford, FL, 6 giọt mỗi 25 ml nước cất) đã được thêm vào bình và các nội dung xoay. Các bào tử được chiết vào bình đã khử trùng sạch sẽ, pha loãng đến 106 bào tử / ml, và sau đó được sử dụng như một chất tiêm chủng bào tử được tiêu chuẩn hóa trong việc nghiên cứu quá trình lên men. Các chất nền được sử dụng trong quá trình lên men là gạo nâu (Le Gourmet thương hiệu, Rice Mill, Inc., Stuttgart, AK), trong đó có 76,1% (w / w) tổng carbohydrate, bao gồm ~10% chất xơ (cellulose) và phần còn lại chủ yếu là tinh bột , 7,1% (w / w) protein, 2,3% (w / w) chất béo, và 0,2% (w / w) kali. Độ ẩm của gạo nguyên là ~10%. Các chất nền gạo đã được chuẩn bị bằng cách trộn 25 g gạo nâu với 14 ml nước cất trong một 250-mL bình Erlenmeyer, bao phủ nó với một cao su silicone
bọt biển đóng cửa, và hấp trong 15 phút ở 121 ° C. Sau khi hấp khử trùng, độ ẩm gạo ~40% (w / w) và pH ~6.2. Sau khi loại bỏ khỏi nồi hấp, các bình rúng động để phá vỡ các khối lúa và làm lạnh đến nhiệt độ phòng. Đối với số lượng lớn hơn của nền gạo, đủ số lượng bình đã được chuẩn bị và chất nền gạo đã được gộp lại với nhau thành một vô trùng 600 ml cốc. Tĩnh lên men. Lên men trạng thái rắn tĩnh được thực hiện trong cốc 600 ml, được phủ bằng lá nhôm. Mỗi cốc bị buộc tội 25-125 g chất gạo, với độ sâu giường tương ứng 1,5-5,5 cm, tiêm phòng cấy bào tử (1 ml mỗi 25 g gạo), lắc để giải tán các chất tiêm chủng, và sau đó được đặt trong một lồng ấp tĩnh ở 37 ° C. Các quá trình lên men đã được lấy mẫu bằng cách sử dụng hai scoopulas quay với các bề mặt lõm của họ đối với nhau như một thiết bị lấy mẫu lõi. Các scoopulas được chèn vào các chất nền cho đến đáy của cốc được xúc động, sau đó họ đã ép lại với nhau và dỡ bỏ, do đó loại bỏ một mẫu mà mở rộng từ bề mặt của các lò phản ứng để phía dưới. Lấy mẫu theo cách này cho phép truy của một đại diện mẫu của toàn bộ khối lượng, chứ không phải chỉ các lớp bề mặt. Các mẫu được đông lạnh trước khi protein và hoạt động của enzyme xét nghiệm đã được thực hiện