Thirteen landraces and nine advance

Thirteen landraces and nine advanced cultivars of P.nigrum and one accession each of P. longum and P.colubrinum were used in the present study (Table 1). DNA was extracted according to cTAB method with minor modifications. Leaf tissue of 5 g was ground to fine powder in liquid nitrogen, followed by incubation in 15 mL of pre-heated extraction buffer (4% w/v cTAB, 1.4 M NaCl, 100 mM Tris-HCl pH 8.0, 20 mM EDTA, 2% PVP and 0.1% v/v b-mercaptoethanol) for 2 h at 558C. The homogenate was extracted once at 72 8C. Out of 34 random decamer primers (Operon Technologies, USA) tested, 24 giving satisfactory results (Table 2) were employed for detailed analysis. These primers were selected based on the robustness of amplification and clarity and, scorability of band ing patterns. Amplification products were separated by electrophoresis on 1.2% agarose gels in 1 x TBE buffer. Clear and well resolved bands were scored for presence (1) or absence (0). Same size bands across accessions were treated as identical markers. Poly morphism was confirmed by repeating the experiment at least once.

Kết quả (Việt) 1:

Mười ba các giống và giống cây trồng cao cấp chín của P.nigrum và một gia nhập mỗi P. longum và P.colubrinum đã được sử dụng trong nghiên cứu hiện nay (bảng 1). DNA chiết xuất theo phương pháp cTAB với sửa đổi nhỏ. Lá mô của 5 g là đất để tinh bột trong nitơ lỏng, theo sau là ấp trứng trong 15 mL nước nóng trước khi khai thác đệm (4% w/v cTAB, 1.4 M NaCl, 100 mM Tris-HCl pH 8.0, 20 mM EDTA, 2% PVP và 0.1% v/v b-mercaptoethanol) cho 2 h ở 558 C. Homogenate được tách ra một lần tại 72 8C. Ra khỏi 34 ngẫu nhiên decamer chất nền, mồi (Operon công nghệ, Hoa Kỳ) được thử nghiệm, 24 cho kết quả khả quan (bảng 2) được sử dụng để phân tích chi tiết. Các chất nền, mồi đã được lựa chọn dựa trên mạnh mẽ của khuếch đại và rõ ràng, và scorability của ban nhạc ing mẫu. Khuếch đại sản phẩm đã được tách ra bởi điện trên 1,2% agarose gel trong 1 x TBE bộ đệm. Ban nhạc rõ ràng và cũng giải quyết được ghi cho mặt (1) hay vắng mặt (0). Cùng một kích thước ban nhạc trên accessions đã được điều trị như là dấu hiệu giống hệt nhau. Nhiều morphism đã được xác nhận bằng cách lặp lại thử nghiệm ít nhất một lần.

Kết quả (Việt) 2:

Mười ba giống bản địa và chín giống tiên tiến của P.nigrum và một nhập mỗi P. longum và P.colubrinum đã được sử dụng trong nghiên cứu này (Bảng 1). DNA được chiết xuất theo phương pháp CTAB với những thay đổi nhỏ. Leaf mô 5 g được nghiền thành bột mịn trong nitơ lỏng, tiếp theo là ủ trong 15 mL đệm khai thác trước khi đun nóng (4% w / v CTAB, 1,4 M NaCl, 100 mM Tris-HCl pH 8.0, 20 mM EDTA, 2% PVP và 0,1% v / v b-mercaptoethanol) trong 2 giờ ở 558C. Các đồng chất được chiết xuất một lần tại 72 8C. Trong số 34 mồi ngẫu nhiên decamer (operon Technologies, Mỹ) thử nghiệm, 24 kết quả thỏa đáng cho (Bảng 2) đã được sử dụng để phân tích chi tiết. Các loại sơn lót được lựa chọn dựa trên sự vững mạnh của khuếch đại và rõ ràng, và scorability của mẫu ban nhạc ing. Sản phẩm khuếch đại được phân cách bằng điện di trên gel agarose 1,2% trong 1 x TBE đệm. Ban nhạc rõ ràng và cũng giải quyết được cho điểm về sự hiện diện (1) hay không (0). Ban nhạc có cùng kích thước trên gia nhập đã được điều trị như đánh dấu giống hệt nhau. Poly cấu xạ đã được xác nhận bằng cách lặp lại thí nghiệm ít nhất một lần.