ABSTRACT: In this work, a novelmeth

ABSTRACT: In this work, a novelmethodwas established to isolate and purify Human plasminogen Kringle 5 (HPK5) as a histidinetagged
fusion protein expressed in Escherichia coli BL21 (DE3). This method consisted of sample extraction using a Ni-chelated
Sepharose Fast-Flow affinity column, ammonium sulfate salting-out and Sephadex G-75 size-exclusion column in turn. The purity
analysis by SDS–PAGE, high-performance size-exclusion and reversed-phase chromatographies showed that the obtained
recombinant fusion HPK5 was homogeneous and its purity was higher than 96%; the activity analysis by chorioallantoic
membrane model of chicken embryos revealed that the purified recombinant HPK5 exhibited an obvious anti-angiogenic activity
under the effective range of 5.0–25.0 μg/mL. Through this procedure, about 19mg purified recombinant fusion HPK5 can be
obtained from 1 L of original fermentation solution. Approximate 32% of the total recombinant fusion HPK5 can be captured
and the total yield was approximately 11%. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.

Kết quả (Việt) 1:

Tóm tắt: Trong công việc này, một novelmethodwas được thành lập để cô lập và tinh chế của con người plasminogen Kringle 5 (HPK5) như là một histidinetagged
phản ứng tổng hợp protein bày tỏ trong Escherichia coli BL21 (DE3). Phương pháp này bao gồm khai thác mẫu bằng cách sử dụng một Ni sản chelated
Sepharose nhanh-dòng chảy ái lực cột, amoni sulfat ướp muối-out và Sephadex G-75 loại trừ kích thước cột lần lượt. Độ tinh khiết
phân tích bởi SDS–PAGE, hiệu suất cao kích thước-loại trừ và đảo ngược, giai đoạn chromatographies đã chỉ ra rằng các thu được
tái tổ hợp fusion HPK5 là đồng nhất và độ tinh khiết của nó là cao hơn 96%; phân tích hoạt động bằng chorioallantoic
màng mô hình của gà phôi tiết lộ rằng HPK5 tái tổ hợp tinh khiết trưng bày một hoạt động rõ ràng chống-angiogenic
dưới tầm bắn hiệu quả của 5.0–25.0 μg/mL. Thông qua thủ tục này, khoảng 19mg tinh khiết tái tổ hợp nhiệt hạch HPK5 có thể
thu được từ 1 L ban đầu lên men giải pháp. Khoảng 32% của tất cả tái tổ hợp fusion HPK5 có thể được chụp
và năng suất tất cả là khoảng 11%. Bản quyền © năm 2013 John Wiley & con trai, Ltd.

Kết quả (Việt) 2:

ABSTRACT: In this work, a novelmethodwas established to isolate and purify Human plasminogen Kringle 5 (HPK5) as a histidinetagged
Expressed fusion protein in Escherichia coli BL21 (DE3). This consisted of sample extraction method using a Ni-chelated
affinity Sepharose Fast-Flow column, the salting-out with ammonium sulfate and Sephadex G-75 size-exclusion column in turn. The purity
by SDS-PAGE analysis, high-performance size-exclusion and reversed-phase chromatographies showed là thu được
recombinant fusion HPK5 was homogeneous and its purity was 96% higher coal; activity analysis by the chorioallantoic
membrane of chicken ie composed model revealed rằng Obvious purified recombinant HPK5 exhibited an anti-angiogenic activity
under the effective range of 5.0-25.0 microg / mL. Through this procedure, about 19mg can be purified recombinant fusion HPK5
thu được from 1 L of fermentation original solution. Approximate 32% of the total recombinant fusion HPK5 can be captured
and the total yield was approximately 11%. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd..