2.3. Total phenolics determinationT

2.3. Total phenolics determination

The concentration of total phenolic compounds was determined spectrophotometrically, using the Folin–Ciocalteu total phenol procedure, described by Spanos and Wrolstad (1990), with modifications. Gallic acid standard solutions were prepared at 0.0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 and 0.5 mg/ml. The extracts (0.1 ml) and the gallic acid standards (0.1 ml) were transferred to 15 ml test tubes. 3.0 ml of 0.2 N Folin–Ciocalteu reagent (Sigma–Aldrich Co., St. Louis, MO) were added to each test tube and mixed using a vortex mixer. After 1 min, 2.0 ml of 9.0% (w/v) Na2CO3 in water were added and mixed. Absorbance at 765 nm was determined using a Spectronic 21 spectrophotometer (Bausch and Lomb, USA) after 2 h at room temperature. The concentration of total phenolic compounds in the extracts was determined by comparing the absorbance of the extract samples to that of the gallic acid standard solutions. All samples were determined in duplicate. Total phenolic content (TPC) was expressed as mg gallic acid equivalents (GAE) per g dry peanut skins.

2.4. Oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay

Antioxidant activity (AOA) was determined using an ORAC procedure described by Zhou et al. (2007). Trolox standard solutions were prepared at 20, 40, 80, 200 and 400 μM. The trolox standards (40 μl), PSE (40 μl) and blanks containing only extraction solvent (40 μl) were added to appropriate wells of a 96-well plate. Two hundred microlitre of a 100 nM FL solution were added to each well and the plates were covered and incubated for 20 min in a Victor 3 multilabel plate reader (Perkin–Elmer, Turku, Finland) preheated to 37 °C. A solution of 0.36 M AAPH (35 μl) was added to each of the wells to generate the peroxyl radicals. Fluorescence readings of the plate were taken every minute using an excitation wavelength of 485 nm and an emission wavelength of 535 nm until all fluorescence readings declined to less than 5% of the initial values. Samples and standards were determined in duplicate.

2.5. HPLC analysis

Kết quả (Việt) 1:

2.3. tất cả phenolics quyết tâmNồng độ của tất cả các hợp chất phenolic được xác định spectrophotometrically, bằng cách sử dụng các thủ tục phenol tất cả Folin-Ciocalteu, được mô tả bởi Spanos và Wrolstad (1990), với sửa đổi. Gallic acid giải pháp tiêu chuẩn đã được chuẩn bị tại 0.0, 0.1, 0.2, 0,3, 0.4 và 0,5 mg/ml. Các chất chiết xuất (cách 0.1 ml) và tiêu chuẩn gallic acid (cách 0.1 ml) được chuyển cho ống nghiệm 15 ml. 3.0 ml cách 0.2 tinh khiết N Folin-Ciocalteu (công ty Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) đã được thêm vào mỗi ống nghiệm và pha trộn bằng cách sử dụng một máy trộn xoáy. Sau đợt 1 min, 2.0 ml 9,0% (w/v) Na2CO3 trong nước đã được thêm vào và trộn. Hấp thu tại 765 nm đã được xác định bằng cách sử dụng một phối Spectronic 21 (Bausch và Lomb, Hoa Kỳ) sau khi 2 h ở nhiệt độ phòng. Sự tập trung của các hợp chất phenolic tất cả trong các chất chiết xuất đã được xác định bằng cách so sánh hấp thu các mẫu chiết xuất của các giải pháp tiêu chuẩn gallic acid. Tất cả mẫu đã được xác định trong bản sao. Tất cả nội dung phenolic (TPC) được thể hiện như tương đương gallic acid mg (GAE) trên g khô da đậu phộng.2.4. oxygen radical hấp thu năng lực (ORAC) khảo nghiệmChất chống oxy hóa hoạt động (AOA) đã được xác định bằng cách sử dụng một thủ tục ORAC được mô tả bởi chu et al. (2007). Trolox giải pháp tiêu chuẩn đã được chuẩn bị tại 20, 40, 80, 200 và 400 μM. Các tiêu chuẩn trolox (40 μl), PSE (40 μl) và khoảng trống có chỉ chiết xuất dung môi (40 μl) đã được thêm vào thích hợp wells một tấm 96-Vâng. Hai trăm microlitre của một giải pháp nM FL 100 đã được bổ sung tốt đến mỗi và các tấm được bao phủ và ủ cho 20 phút trong một 3 Victor multilabel tấm đọc (Perkin-Elmer, Turku, Phần Lan) preheated đến 37 ° C. Một giải pháp 0,36 m AAPH (35 μl) đã được bổ sung cho mỗi giếng để tạo ra các gốc tự do peroxyl. Huỳnh quang đọc của mảng được thực hiện mỗi phút bằng cách sử dụng một bước sóng kích thích số 485 nm và một bước sóng phát thải của 535 nm cho đến khi tất cả các bài đọc huỳnh quang từ chối ít hơn 5% giá trị ban đầu. Mẫu và các tiêu chuẩn đã được xác định trong bản sao.2.5. HPLC phân tích

Kết quả (Việt) 2:

2.3. Tổng số phenolics quyết Nồng độ tổng hợp chất phenolic được xác định spectrophotometrically, sử dụng Folin-Ciocalteu thủ tục tổng phenol, được mô tả bởi Spanos và Wrolstad (1990), với những thay đổi. Dung dịch axit galic tiêu chuẩn đã được chuẩn bị ở mức 0.0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 và 0.5 mg / ml. Các chất chiết xuất (0,1 ml) và các tiêu chuẩn axit gallic (0,1 ml) đã được chuyển đến 15 ml ống nghiệm. 3,0 ml 0,2 N Folin-Ciocalteu thuốc thử (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO) đã được thêm vào mỗi ống nghiệm và trộn bằng máy trộn xoáy. Sau 1 phút, 2,0 ml 9,0% (w / v) Na2CO3 trong nước được thêm vào và hỗn hợp. Hấp thụ ở 765 nm được xác định bằng cách sử dụng một Spectronic 21 quang phổ (Bausch và Lomb, Mỹ) sau 2 giờ ở nhiệt độ phòng. Sự tập trung của tổng số các hợp chất phenolic trong chiết xuất được xác định bằng cách so sánh độ hấp thụ của các mẫu trích cho rằng các giải pháp chuẩn axit gallic. Tất cả các mẫu đã được xác định trong bản sao. Tổng hàm lượng phenolic (TPC) được thể hiện như mg tương đương axit gallic (GAE) mỗi g đậu phộng da khô. 2.4. Khả năng hấp thu oxy (ORAC) khảo nghiệm triệt để hoạt động chống oxy hóa (AOA) được xác định bằng cách sử dụng một thủ tục ORAC mô tả bởi Zhou et al. (2007). Giải pháp tiêu chuẩn trolox đã được chuẩn bị ở mức 20, 40, 80, 200 và 400 mM. Các tiêu chuẩn trolox (40 ml), PSE (40 ml) và khoảng trống chỉ chứa dung môi chiết (40 ml) được thêm vào các giếng thích hợp của phiến 96 giếng. Hai trăm microlitre của một giải pháp 100 nM FL đã được thêm vào từng giếng và các tấm được bảo hiểm và ủ trong 20 phút trong một Victor 3 multilabel đọc tấm (Perkin-Elmer, Turku, Phần Lan) làm nóng trước đến 37 ° C. Một giải pháp là 0,36 M AAPH (35 ml) được thêm vào mỗi giếng để tạo ra các gốc peroxyl. Đọc huỳnh quang của các tấm được chụp mỗi phút sử dụng một bước sóng kích thích 485 nm và bước sóng phát xạ của 535 nm đến khi tất cả các bài đọc huỳnh quang giảm xuống dưới 5% của giá trị ban đầu. Mẫu và tiêu chuẩn đã được xác định trong bản sao. 2.5. Phân tích HPLC