Single Strand Conformational Polymo

Single Strand Conformational Polymorphism (SSCP) reveals differences in electrophoretic mobility between normal and mutant single strands of DNA (4). In SSCP, normal and mutant duplex DNA are denatured to form single stranded molecules of equal length. These molecules can re-anneal onto themselves and based on the varying degree of intrastrand base pairing, form different three-dimensional structures. These structures, differ in electrophoretic mobility and can be separated on a chilled non-denaturing polyacrylamide gel.
The electrophoretic mobility of these “conformers” change depending on temperature and buffer ionic strength. For accurate characterization of mutations within these re-folded single strands, it is essential that the buffer temperature be tightly controlled within each electrophoresis procedure, usually between 4°-15°C. If the gel temperature is not precisely controlled, the resolution will suffer because of the loss of intrastrand base pairing and change in the overall shape of the 3-dimensional conformer.

Kết quả (Việt) 2:

Độc Strand Conformational Polymorphism (SSCP) cho thấy sự khác biệt trong tính di động điện di giữa các sợi đơn thông thường và đột biến của ADN (4). Trong SSCP, DNA duplex bình thường và đột biến được biến tính để tạo thành phân tử sợi đơn có độ dài bằng nhau. Những phân tử này có thể tái ủ vào bản thân và dựa trên các mức độ khác nhau của intrastrand bắt cặp base, tạo thành cấu trúc ba chiều khác nhau. Những cấu trúc này, có sự khác biệt về tính di động điện di và có thể được tách trên gel lạnh không biến tính polyacrylamide.
Tính di động điện di của những "conformers" thay đổi tùy thuộc vào nhiệt độ và bộ đệm sức mạnh ion. Đối với đặc tính chính xác của các đột biến trong các sợi đơn lại gấp lại, nó là cần thiết rằng nhiệt độ đệm được kiểm soát chặt chẽ trong từng quy trình điện, thường là từ 4 ° -15 ° C. Nếu nhiệt độ gel không được kiểm soát một cách chính xác, độ phân giải sẽ đau khổ vì sự mất mát của intrastrand cặp cơ sở và thay đổi trong hình dạng tổng thể của conformer 3 chiều.