We intend to solve whether or not P

We intend to solve whether or not Phl p 1 can be regarded as a protease. A group reported that Phl p 1 has
papain-like properties and later on, that this allergen resembles cathepsin B, while another one demonstrated
that Phl p 1 lacks proteinase activity and suggested that the measured activity may rise either from a recombinant
Phl p 1 contaminant or as a result of an incompletely purified natural allergen. A third group reported
Phl p 1 to act by a non-proteolytic activity mechanism. We report the purification of the natural Phl p 1 by
means of hydrophobic interaction, gel filtration and STI-Sepharose affinity chromatographies. The Phl p 1 purity
was assessed by silver-stained SDS-PAGE and by ‘in-gel’ and ‘gel-free’ approaches associated to mass
spectrometry analyses. The proteolytic activity was measured using Boc–Gln–Ala–Arg–AMC and Z-Phe–
Arg–AMC as substrates. While amidolytic activity could be measured with Phl p 1 after rechromatography
on gel filtration, it however completely disappeared after chromatography on STI-Sepharose. The contaminant
activity co-eluting with Phl p 1 was not affected by cysteine proteases inhibitors and other
thiol-blocking agents, by metalloproteases inhibitors and by aspartic proteases inhibitors. However, it was
completely inhibited by low molecular weight and proteinaceous serine proteases inhibitors. TLCK, but not
TPCK, inhibited the contaminant activity, showing a trypsin-like behavior. The pH and temperature optimum
were 8.0 and 37 °C, respectively. These data indicated that Phl p 1 is not a protease. The contaminant
trypsin-like activity should be considered when Phl p 1 allergenicity is emphasized.
© 2012 Elsevier B.V. All righ

Kết quả (Việt) 1:

Chúng tôi dự định để giải quyết định có hay không Phl p 1 có thể được coi là một protease. Một nhóm báo cáo rằng Phl p 1 cópapain – giống như tài sản và sau đó chất gây dị ứng này tương tự như cathepsin B, trong khi một số khác đã chứng minhPhl p 1 thiếu proteinase hoạt động và đề nghị rằng các hoạt động đo có thể tăng lên hoặc từ một tái tổ hợpPHL p 1 chất gây ô nhiễm hoặc là kết quả của một chất gây dị ứng tự nhiên không đầy đủ tinh khiết. Một nhóm thứ ba báo cáoPHL p 1 hành động bởi một cơ chế phòng không proteolytic hoạt động. Chúng tôi báo cáo dùng làm sạch tự nhiên Phl p 1 bởiphương tiện kỵ nước tương tác, gel lọc và STI-Sepharose mối quan hệ chromatographies. Độ tinh khiết p 1 Phlđược đánh giá bởi màu bạc dùng mũi SDS-trang và 'trong gel' và 'gel miễn phí' cách tiếp cận liên quan đến khối lượngspectrometry phân tích. Các hoạt động proteolytic đã được đo bằng cách sử dụng bộc-Gln-Ala-Arg-AMC và Z-Phe-ARG-AMC là chất nền. Trong khi hoạt động amidolytic có thể được đo với Phl p 1 sau khi rechromatographytrên gel lọc, nó Tuy nhiên hoàn toàn biến mất sau khi sắc kí trên STI-Sepharose. Chất gây ô nhiễmhoạt động đồng eluting với Phl p 1 đã không bị ảnh hưởng bởi chất ức chế protease cysteine và khácsulfhydryl-chặn các đại lý, bởi metalloproteases ức chế và bởi aspartic protease ức chế. Tuy nhiên, nó đãức chế hoàn toàn bởi trọng lượng phân tử thấp và proteinaceous serine protease ức chế. TLCK, nhưng khôngTPCK, ức chế hoạt động chất gây ô nhiễm, Đang hiển thị một hành vi giống như trypsin. PH và nhiệt độ tối ưulà 8.0 và 37 ° C, tương ứng. Những dữ liệu chỉ ra rằng Phl p 1 không phải là một protease. Chất gây ô nhiễmtrypsin như hoạt động cần được xem xét khi Phl p 1 allergenicity được nhấn mạnh.© 2012 Elsevier B.V Tất cả righ

Kết quả (Việt) 2:

Chúng tôi dự định để giải quyết hay không PHL p 1 có thể được coi là một protease. Một nhóm báo cáo rằng PHL p 1 có
tính chất papain giống và sau này, mà gây dị ứng này tương tự như cathepsin B, trong khi một số khác đã chứng minh
rằng PHL p 1 thiếu hoạt động proteinase và cho rằng các hoạt động đo có thể tăng hoặc từ một tổ hợp của
PHL p 1 chất gây ô nhiễm hoặc như là kết quả của một chất gây dị ứng tự nhiên không hoàn toàn tinh khiết. Một nhóm thứ ba báo cáo
PHL p 1 để hành động bằng một cơ chế hoạt động thủy phân protein. Chúng tôi báo cáo việc làm sạch của PHL p tự nhiên 1 bằng
phương tiện tương tác kỵ nước, lọc gel và STI-Sepharose chromatographies ái lực. Các PHL p 1 độ tinh khiết
được đánh giá bằng bạc màu SDS-PAGE và bởi 'trong-gel' và 'gel-free "phương pháp tiếp cận liên quan tới hàng loạt
phân tích quang phổ. Các hoạt động phân giải protein được đo bằng Bộc-GLN-Ala-Arg-AMC và Z-Phe-
Arg-AMC làm chất nền. Trong khi hoạt động amidolytic có thể được đo bằng PHL p 1 sau rechromatography
về lọc gel, tuy nhiên nó hoàn toàn biến mất sau khi sắc ký trên STI-Sepharose. Các chất gây ô nhiễm
hoạt động hợp tác tẩy rửa với PHL p 1 không bị ảnh hưởng bởi các chất ức chế protease cystein và các
đại lý thiol-blocking, do ức chế metalloproteases và các chất ức chế protease bởi aspartic. Tuy nhiên, nó đã
hoàn toàn bị ức chế bởi trọng lượng phân tử thấp và các chất ức chế protease serine proteinaceous. TLCK, nhưng không
TPCK, ức chế hoạt động gây ô nhiễm, cho thấy một hành vi trypsin giống. PH và nhiệt độ tối ưu
là 8.0 và 37 ° C, tương ứng. Các dữ liệu chỉ ra rằng PHL p 1 không phải là một protease. Các chất gây ô nhiễm
hoạt động trypsin giống nên được xem xét khi PHL p 1 gây dị ứng được nhấn mạnh.
© 2012 Elsevier BV Tất cả righ